摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词中英文对照表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1 昆虫变态发育过程中的激素调节 | 第12-19页 |
1.1 昆虫的变态发育过程 | 第12页 |
1.2 蜕皮激素与保幼激素对昆虫变态发育过程的调控 | 第12-13页 |
1.3 蜕皮激素与保幼激素的生物合成与分解 | 第13-16页 |
1.4 蜕皮激素与保幼激素的分子互作机制 | 第16-19页 |
2 microRNA在昆虫变态发育中的功能研究 | 第19-22页 |
2.1 microRNA的特征 | 第19-20页 |
2.2 microRNA在昆虫变态发育中功能的研究 | 第20-22页 |
3 昆虫miRNA在变态发育过程中与mRNA之间的网络调控 | 第22-23页 |
4 昆虫化蛹羽化过程中的分子调控 | 第23-24页 |
4.1 昆虫化蛹过程 | 第23页 |
4.2 昆虫的蛹期发育 | 第23页 |
4.3 昆虫的羽化 | 第23-24页 |
5 二化螟 | 第24-25页 |
6 本文研究目的及意义 | 第25-26页 |
第二章 二化螟20E信号通路基因3'UTR的克隆 | 第26-36页 |
1 引言 | 第26页 |
2 材料与方法 | 第26-33页 |
2.1 昆虫饲养及试虫材料提取 | 第26-27页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
2.3 二化螟总RNA提取与cDNA合成 | 第28-29页 |
2.4 PCR反应 | 第29-31页 |
2.5 分子克隆 | 第31-32页 |
2.6 序列测定与分析 | 第32页 |
2.7 二化螟致死基因序列验证的引物 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
第三章 二化螟miRNA在20E通路上的靶标预测 | 第36-44页 |
1 引言 | 第36页 |
2 材料与方法 | 第36-38页 |
2.1 miRNA与靶标基因 | 第36-37页 |
2.2 软件 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-41页 |
3.1 4个软件取交集结果分析: | 第38-39页 |
3.2 5个软件取交集结果分析: | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
第四章 二化螟20E基因与miRNA的体外靶标验证 | 第44-50页 |
1 引言 | 第44-45页 |
2 材料与方法 | 第45-47页 |
2.1 质粒与细胞株 | 第45页 |
2.2 主要试剂 | 第45页 |
2.3 主要仪器 | 第45-46页 |
2.4 实验步骤 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-49页 |
3.1 csu-miR-9b等与csu-nvd基因靶标验证结果 | 第47-48页 |
3.2 csu-miR-260与csu-dib基因靶标验证结果 | 第48页 |
3.3 csu-miR-bantam、csu-miR-8、csu-miR-80、csu-miR-89、csu-miR-124、csu-miR-154、csu-miR-257与csu-spook基因朝标验证结果(本节工作与Faisal Shahzad 共同完成) | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
第五章 二化螟miRNA在5龄、6龄幼虫及蛹期的表达谱 | 第50-60页 |
1 引言 | 第50-51页 |
2 材料与方法 | 第51-53页 |
2.1 昆虫饲养及试虫材料提取 | 第51页 |
2.2 主要试剂 | 第51页 |
2.3 主要仪器设备 | 第51-52页 |
2.4 二化螟总RNA提取 | 第52页 |
2.5 miRNA特异性反转录 | 第52页 |
2.6 荧光定量PCR | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-57页 |
3.1 csu-miR-bantam在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第53页 |
3.2 csu-miR-9b在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第53-54页 |
3.3 csu-miR-80在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第54-55页 |
3.4 csu-miR-89在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第55页 |
3.5 csu-miR-154在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第55-56页 |
3.6 csu-miR-257在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第56-57页 |
3.7 csu-miR-260在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析 | 第57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
第六章 二化螟miRNA在变态发育中的功能研究 | 第60-72页 |
1 引言 | 第60-61页 |
2 材料与方法 | 第61-62页 |
2.1 昆虫饲养及试虫材料提取 | 第61页 |
2.2 主要试剂 | 第61页 |
2.3 主要仪器 | 第61页 |
2.4 mimics注射 | 第61页 |
2.5 miRNA 定量PCR | 第61-62页 |
2.6 20E滴度测定 | 第62页 |
3 结果与分析 | 第62-71页 |
3.1 二化螟6龄幼虫在miRNA mimics之后的表型观察(死亡与化蛹) | 第62-68页 |
3.2 注射miRNA mimics之后24h对各miRNA表达量的测定 | 第68-70页 |
3.3 注射miRNA mimics之后24h与48h的血淋巴20E滴度测定 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
硕士期间论文发表情况 | 第84-86页 |
致谢 | 第86页 |