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miRNA在二化螟蜕皮激素合成通路中的调控功能分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略词中英文对照表第11-12页
第一章 文献综述第12-26页
    1 昆虫变态发育过程中的激素调节第12-19页
        1.1 昆虫的变态发育过程第12页
        1.2 蜕皮激素与保幼激素对昆虫变态发育过程的调控第12-13页
        1.3 蜕皮激素与保幼激素的生物合成与分解第13-16页
        1.4 蜕皮激素与保幼激素的分子互作机制第16-19页
    2 microRNA在昆虫变态发育中的功能研究第19-22页
        2.1 microRNA的特征第19-20页
        2.2 microRNA在昆虫变态发育中功能的研究第20-22页
    3 昆虫miRNA在变态发育过程中与mRNA之间的网络调控第22-23页
    4 昆虫化蛹羽化过程中的分子调控第23-24页
        4.1 昆虫化蛹过程第23页
        4.2 昆虫的蛹期发育第23页
        4.3 昆虫的羽化第23-24页
    5 二化螟第24-25页
    6 本文研究目的及意义第25-26页
第二章 二化螟20E信号通路基因3'UTR的克隆第26-36页
    1 引言第26页
    2 材料与方法第26-33页
        2.1 昆虫饲养及试虫材料提取第26-27页
        2.2 主要试剂和仪器第27-28页
        2.3 二化螟总RNA提取与cDNA合成第28-29页
        2.4 PCR反应第29-31页
        2.5 分子克隆第31-32页
        2.6 序列测定与分析第32页
        2.7 二化螟致死基因序列验证的引物第32-33页
    3 结果与分析第33-35页
    4 讨论第35-36页
第三章 二化螟miRNA在20E通路上的靶标预测第36-44页
    1 引言第36页
    2 材料与方法第36-38页
        2.1 miRNA与靶标基因第36-37页
        2.2 软件第37-38页
    3 结果与分析第38-41页
        3.1 4个软件取交集结果分析:第38-39页
        3.2 5个软件取交集结果分析:第39-41页
    4 讨论第41-44页
第四章 二化螟20E基因与miRNA的体外靶标验证第44-50页
    1 引言第44-45页
    2 材料与方法第45-47页
        2.1 质粒与细胞株第45页
        2.2 主要试剂第45页
        2.3 主要仪器第45-46页
        2.4 实验步骤第46-47页
    3 结果与分析第47-49页
        3.1 csu-miR-9b等与csu-nvd基因靶标验证结果第47-48页
        3.2 csu-miR-260与csu-dib基因靶标验证结果第48页
        3.3 csu-miR-bantam、csu-miR-8、csu-miR-80、csu-miR-89、csu-miR-124、csu-miR-154、csu-miR-257与csu-spook基因朝标验证结果(本节工作与Faisal Shahzad 共同完成)第48-49页
    4 讨论第49-50页
第五章 二化螟miRNA在5龄、6龄幼虫及蛹期的表达谱第50-60页
    1 引言第50-51页
    2 材料与方法第51-53页
        2.1 昆虫饲养及试虫材料提取第51页
        2.2 主要试剂第51页
        2.3 主要仪器设备第51-52页
        2.4 二化螟总RNA提取第52页
        2.5 miRNA特异性反转录第52页
        2.6 荧光定量PCR第52-53页
    3 结果与分析第53-57页
        3.1 csu-miR-bantam在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第53页
        3.2 csu-miR-9b在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第53-54页
        3.3 csu-miR-80在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第54-55页
        3.4 csu-miR-89在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第55页
        3.5 csu-miR-154在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第55-56页
        3.6 csu-miR-257在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第56-57页
        3.7 csu-miR-260在二化螟5龄、6龄幼虫及蛹期的逐日表达谱与分析第57页
    4 讨论第57-60页
第六章 二化螟miRNA在变态发育中的功能研究第60-72页
    1 引言第60-61页
    2 材料与方法第61-62页
        2.1 昆虫饲养及试虫材料提取第61页
        2.2 主要试剂第61页
        2.3 主要仪器第61页
        2.4 mimics注射第61页
        2.5 miRNA 定量PCR第61-62页
        2.6 20E滴度测定第62页
    3 结果与分析第62-71页
        3.1 二化螟6龄幼虫在miRNA mimics之后的表型观察(死亡与化蛹)第62-68页
        3.2 注射miRNA mimics之后24h对各miRNA表达量的测定第68-70页
        3.3 注射miRNA mimics之后24h与48h的血淋巴20E滴度测定第70-71页
    4 讨论第71-72页
全文总结第72-74页
参考文献第74-84页
硕士期间论文发表情况第84-86页
致谢第86页

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