| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 赭曲霉毒素A的简介 | 第12-13页 |
| 1.2 赭曲霉毒素A的理化性质和结构 | 第13-14页 |
| 1.3 赭曲霉毒素A的危害 | 第14-17页 |
| 1.3.1 急性毒性 | 第14页 |
| 1.3.2 慢性毒性 | 第14-17页 |
| 1.4 赭曲霉毒素A的脱毒方法 | 第17-18页 |
| 1.4.1 物理脱毒 | 第17页 |
| 1.4.2 化学脱毒 | 第17-18页 |
| 1.4.3 生物脱毒 | 第18页 |
| 1.5 赭曲霉毒素A的限量标准与检测方法 | 第18-20页 |
| 1.5.1 赭曲霉毒素A的限量标准 | 第18页 |
| 1.5.2 赭曲霉毒素A的检测方法 | 第18-20页 |
| 1.6 噬菌体展示技术的简介 | 第20页 |
| 1.7 噬菌体展示系统的类型与发展 | 第20-22页 |
| 1.7.1 丝状噬菌体展示技术系统 | 第20-21页 |
| 1.7.2 λ 噬菌体展示技术系统 | 第21页 |
| 1.7.3 T4噬菌体展示技术系统 | 第21-22页 |
| 1.7.4 T7噬菌体展示技术系统 | 第22页 |
| 1.8 噬菌体展示技术的应用 | 第22-23页 |
| 1.8.1 抗原表位的分析 | 第22-23页 |
| 1.8.2 新型疫苗的研制 | 第23页 |
| 1.9 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 赭曲霉毒素A完全抗原的合成与鉴定 | 第25-36页 |
| 2.1 材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要溶液 | 第26-27页 |
| 2.1.4 试验动物 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 完全抗原的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.2 完全抗原的鉴定 | 第28-31页 |
| 2.3 结果 | 第31-34页 |
| 2.3.1 完全抗原浓度测定结果 | 第31页 |
| 2.3.2 紫外扫描及偶联比鉴定结果 | 第31-32页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE鉴定结果 | 第32-33页 |
| 2.3.4 免疫原性鉴定结果 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.4.1 免疫原与包被原载体的选择 | 第34页 |
| 2.4.2 偶联方法的选择 | 第34页 |
| 2.4.4 完全抗原的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 3 抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备 | 第36-49页 |
| 3.1 材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 主要溶液 | 第37-38页 |
| 3.1.4 试验动物及细胞 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 OTA单克隆抗体的制备 | 第38-41页 |
| 3.2.2 OTA单克隆抗体生物学特性的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-46页 |
| 3.3.1 杂交瘤细胞株的建立与筛选 | 第42-43页 |
| 3.3.2 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第43页 |
| 3.3.3 单克隆抗体的效价及敏感性试验 | 第43-44页 |
| 3.3.4 单克隆抗体的亲和力鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 单克隆抗体的纯化结果 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4.1 细胞融合 | 第46页 |
| 3.4.2 阳性杂交瘤细胞的筛选、克隆化、冻存和复苏 | 第46-47页 |
| 3.4.3 单克隆抗体的大量制备与纯化 | 第47页 |
| 3.5 小结 | 第47-49页 |
| 4 赭曲霉毒素A模拟表位的筛选 | 第49-62页 |
| 4.1 材料 | 第49-50页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 4.1.2 主要溶液 | 第49-50页 |
| 4.2 方法 | 第50-55页 |
| 4.2.1 OTA单克隆抗体的第一轮淘选 | 第50-51页 |
| 4.2.2 第一轮淘选噬菌体的扩增和纯化 | 第51页 |
| 4.2.3 洗脱产物和扩增产物的滴度测定 | 第51-52页 |
| 4.2.4 噬菌体的第二、三和四轮生物淘选 | 第52页 |
| 4.2.5 噬菌斑的扩增和纯化 | 第52-53页 |
| 4.2.6 OTA模拟表位的鉴定 | 第53-55页 |
| 4.3 结果 | 第55-58页 |
| 4.3.1 亲和淘选噬菌体结果 | 第55页 |
| 4.3.2 间接竞争ELISA筛选OTA的模拟表位 | 第55-58页 |
| 4.3.3 阳性噬菌体克隆的DNA测序及分析 | 第58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-61页 |
| 4.4.1 噬菌体随机七肽库 | 第58-59页 |
| 4.4.2 去污剂的浓度以及抗体的浓度和纯度 | 第59-60页 |
| 4.4.3 淘选轮数及每轮加入的噬菌体数量 | 第60页 |
| 4.4.4 OTA模拟表位氨基酸序列分析 | 第60-61页 |
| 4.5 小结 | 第61-62页 |
| 5 实验结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 附录 英文缩写词汇表 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第72页 |