| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 引言 | 第12-13页 |
| 2 启动子简介 | 第13-14页 |
| 2.1 启动子的结构及分类 | 第13-14页 |
| 2.2 启动子的研究方法及克隆方法 | 第14页 |
| 3 转基因动物的研究进展 | 第14-19页 |
| 3.1 转基因动物的发展 | 第14-15页 |
| 3.2 转基因动物的制备方法 | 第15-17页 |
| 3.3 转基因动物的应用 | 第17页 |
| 3.4 转基因技术的难题 | 第17页 |
| 3.5 转基因动物的安全评价 | 第17-18页 |
| 3.6 转基因技术以及转基因动物的发展前景 | 第18-19页 |
| 4 MyoG及其启动子的研究进展 | 第19-21页 |
| 4.1 MyoG的研究进展 | 第19-20页 |
| 4.2 MyoG启动子的研究进展 | 第20-21页 |
| 5 PPARγ 的研究进展 | 第21-23页 |
| 6 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料方法 | 第24-47页 |
| 1 试验材料 | 第24-28页 |
| 1.1 质粒 | 第24页 |
| 1.2 试验动物 | 第24-25页 |
| 1.3 主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| 1.4 主要试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| 1.5 主要溶液的配制 | 第27-28页 |
| 2 试验方法 | 第28-47页 |
| 2.1 后代MyoG-PPARγ 阳性转基因鼠的建系及鉴定 | 第28-34页 |
| 2.1.1 MyoG-PPARγ 转基因小鼠的建系 | 第28-30页 |
| 2.1.2 小鼠基因组DNA的提取 | 第30-32页 |
| 2.1.3 转基因阳性鼠的鉴定 | 第32-34页 |
| 2.2 MyoG-PPARγ 转基因鼠基因组内拷贝数的鉴定 | 第34-36页 |
| 2.2.1 标准品的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.2 实时荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 2.3 MyoG-PPARγ 转基因鼠目的基因在RNA水平表达情况的验证 | 第36-39页 |
| 2.3.1 转基因鼠组织RNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.3.2 RNA的反转录 | 第37-38页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR分析MyoG-PPARγ转基因鼠及FVB野生型鼠肌肉组织中PPARγ及下游靶基因的表达情况 | 第38-39页 |
| 2.4 MyoG-PPARγ 转基因鼠目的基因在蛋白水平表达情况的验证 | 第39-42页 |
| 2.4.1 MyoG-PPARγ 转基因鼠与FVB野生型鼠肌肉组织蛋白的提取 | 第39-41页 |
| 2.4.2 Western Blot检测目的蛋白质的表达量 | 第41-42页 |
| 2.5 MyoG-PPARγ转基因鼠肌肉组织免疫组化分析目的蛋白PPARγ的定位和表达情况 | 第42-45页 |
| 2.5.1 小鼠肌肉组织样品石蜡包埋 | 第42-44页 |
| 2.5.2 免疫组化操作步骤 | 第44-45页 |
| 2.6 MyoG-PPARγ 转基因鼠和野生型体重及血常规测定 | 第45页 |
| 2.7 MyoG-PPARγ 转基因鼠肌肉组织甘油三酯的测定 | 第45-46页 |
| 2.8 统计学分析 | 第46-47页 |
| 第三章 Myo G-PPARγ 转基因鼠研究结果与分析 | 第47-59页 |
| 1 MyoG-PPARγ 转基因鼠建系及鉴定 | 第47-50页 |
| 1.1 MyoG-PPARγ 转基因鼠的建系 | 第47-48页 |
| 1.2 MyoG-PPARγ 转基因鼠的鉴定 | 第48-50页 |
| 1.2.1 MyoG-PPARγ 转基因鼠PCR鉴定 | 第48-49页 |
| 1.2.2 MyoG-PPARγ 转基因鼠测序鉴定 | 第49-50页 |
| 2 MyoG-PPARγ 转基因鼠遗传稳定性的鉴定 | 第50页 |
| 3 MyoG-PPARγ 转基因鼠表型的鉴定 | 第50-53页 |
| 3.1 MyoG-PPARγ 转基因鼠与FVB野生型鼠成长曲线 | 第50-51页 |
| 3.2 MyoG-PPARγ 转基因鼠与FVB野生型鼠血液指标检测 | 第51-53页 |
| 4 外源基因在MyoG-PPARγ 转基因鼠基因组内拷贝数的统计 | 第53-54页 |
| 4.1 绝对定量标准曲线的绘制 | 第53页 |
| 4.2 MyoG-PPARγ 转基因鼠外源基因拷贝数的统计 | 第53-54页 |
| 5 MyoG-PPARγ 转基因鼠与FVB野生型鼠腿肌中PPARγ 基因及下游靶基因A-FABP和LPL的检测 | 第54-56页 |
| 5.1 利用实时荧光PCR技术检测PPARγ、A-FABP和LPL在mRNA水平的表达 | 第54-56页 |
| 5.2 利用Western Blot技术检测PPARγ 在蛋白水平的表达 | 第56页 |
| 6 MyoG-PPARγ 转基因鼠腿肌中PPARγ 蛋白的定位 | 第56-57页 |
| 7 MyoG-PPARγ 转基因鼠与FVB野生型鼠腿肌内甘油三酯的检测 | 第57-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-63页 |
| 1 MyoG-PPARγ 转基因鼠表型的研究 | 第59页 |
| 2 MyoG-PPARγ 转基因鼠DNA水平的研究 | 第59-61页 |
| 3 MyoG-PPARγ 转基因鼠mRNA水平的研究 | 第61页 |
| 4 MyoG-PPARγ 转基因鼠蛋白水平的研究 | 第61-62页 |
| 5 MyoG-PPARγ 转基因鼠肌内脂肪含量的测定 | 第62页 |
| 6 MyoG-PPARγ 转基因鼠个体差异分析 | 第62-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-65页 |
| 1 本试验取得的结果 | 第63-64页 |
| 2 下一步计划 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
