摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-21页 |
1.1 HELQ的作用及研究进展 | 第10-11页 |
1.2 生殖细胞的研究进程 | 第11-16页 |
1.2.1 PGCs体内的发育历程 | 第11-12页 |
1.2.2 PGCs形成的重要事件 | 第12-15页 |
1.2.3 PGCs形成过程中表观遗传的重编程 | 第15-16页 |
1.2.4 PGCs特化的信号通路 | 第16页 |
1.3 生殖细胞体外分化的研究进展 | 第16-17页 |
1.4 CRISPR-Cas9系统的介绍及应用 | 第17-19页 |
1.5 研究目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.1 动物 | 第21页 |
2.2 实验主要试剂的配制 | 第21-22页 |
2.3 方法步骤 | 第22-32页 |
2.3.1 HELQ敲除ES细胞系的建立及鉴定 | 第22-25页 |
2.3.2 CF1小鼠胎儿成纤维细胞的培养及制作饲养层细胞 | 第25-26页 |
2.3.3 小鼠胚胎干细胞的培养及上胚层样细胞的分化 | 第26页 |
2.3.4 小鼠HELQ~(-/-)四倍体的获得 | 第26-28页 |
2.3.5 HELQ~(-/-) ES及EpiLCs多能性的检测 | 第28-30页 |
2.3.6 PGCLCs 细胞的获得及流式分析 | 第30-32页 |
第三章 实验结果 | 第32-39页 |
3.1 建立HELQ敲除(HELQ~(-/-))小鼠胚胎干细胞系 | 第32-33页 |
3.2 小鼠HELQ~(-/-) ES细胞多能性的鉴定 | 第33-34页 |
3.3 HELQ~(-/-) ES细胞向EpiLCs的定向分化及鉴定 | 第34-36页 |
3.4 HELQ敲除后对PGCLCs的分化的影响及分析 | 第36-39页 |
第四章 总结与讨论 | 第39-42页 |
4.1 主要结论 | 第39页 |
4.2 讨论 | 第39-42页 |
参考文献 | 第42-51页 |
研究生期间论文发表情况 | 第51-52页 |
缩写表(中英文对照) | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |