| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 1 绪论 | 第18-26页 |
| 1.1 选题背景 | 第18-19页 |
| 1.2 文献综述 | 第19-25页 |
| 1.2.1 精子在受精前的活化过程 | 第19页 |
| 1.2.2 精子获能的调控机制及获能相关的主要因素 | 第19-21页 |
| 1.2.3 精子蛋白质酪氨酸磷酸化 | 第21-22页 |
| 1.2.4 精子蛋白发生酪氨酸磷酸化的信号转导途径 | 第22-23页 |
| 1.2.5 影响精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的主要因素 | 第23-24页 |
| 1.2.6 鹿类精子体外获能及其相关蛋白酪氨酸磷酸化研究概况 | 第24-25页 |
| 1.3 研究目的、内容及意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 试验动物,精液采集与冷冻保存 | 第26页 |
| 2.2 动物血清的制备 | 第26-27页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.4 主要试剂,抗体及药品 | 第27-28页 |
| 2.5 培养液及处理液 | 第28-29页 |
| 2.6 精子体外获能及其检测 | 第29-31页 |
| 2.6.1 精子处理方法 | 第29页 |
| 2.6.2 诱导精子体外获能的方法 | 第29-30页 |
| 2.6.3 精子质量检测和获能水平的评价 | 第30-31页 |
| 2.7 精子膜蛋白酪氨酸磷酸化检测(Western blotting) | 第31-34页 |
| 2.7.1 精子膜蛋白的提取 | 第31-32页 |
| 2.7.2 精子膜蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第32-33页 |
| 2.7.3 精子酪氨酸磷酸化蛋白的检测 | 第33-34页 |
| 2.8 数据处理与统计分析 | 第34-35页 |
| 2.9 研究内容及试验设计 | 第35-37页 |
| 2.9.1 对比塔里木马鹿鲜精与冻精体外获能及酪氨酸磷酸化蛋白的差异表达 | 第35页 |
| 2.9.2 对比不同个体冻融精子酪氨酸磷酸化蛋白的差异表达 | 第35页 |
| 2.9.3 筛选最适宜塔里木马鹿精子处理方法 | 第35页 |
| 2.9.4 筛选最适宜塔里木马鹿精子体外获能培养液 | 第35页 |
| 2.9.5 筛选最适宜塔里木马鹿精子体外获能方法 | 第35页 |
| 2.9.6 塔里木马鹿精子体外获能与培养基中基础成分Ca~(2+)、HCO_3~-及BSA的必要性及其协同作用的探讨 | 第35-36页 |
| 2.9.7 筛选精子获能培养基中基础成分Ca~(2+)、HCO_3~-及BSA的适宜浓度 | 第36页 |
| 2.9.8 对比不同血清对塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响 | 第36页 |
| 2.9.9 对比探讨血清和BSA与肝素结合使用对塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第36页 |
| 2.9.10 塔里木马鹿精子体外获能最佳培养体系的筛选及其验证 | 第36-37页 |
| 3 试验结果 | 第37-80页 |
| 3.1 塔里木马鹿精子的CTC染色分类 | 第37页 |
| 3.2 塔里木马鹿鲜精和冻精体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的比较 | 第37-41页 |
| 3.2.1 鲜精和冻精活力及存活时间的比较 | 第37-38页 |
| 3.2.2 鲜精和冻精体外获能率的比较 | 第38-39页 |
| 3.2.3 鲜精和冻精顶体反应率的比较 | 第39页 |
| 3.2.4 鲜精和冻精酪氨酸磷酸化蛋白的差异表达 | 第39-41页 |
| 3.3 塔里木马鹿不同个体冻融精子酪氨酸磷酸化蛋白的差异表达 | 第41-42页 |
| 3.4 冻精不同处理方法对塔里木马鹿活动精子回收率及体外获能效果的影响 | 第42-46页 |
| 3.4.1 冻精不同处理方法对活动精子回收率的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.2 冻精不同处理方法对精子活力及其存活时间的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.3 冻精不同处理方法对精子体外获能效果的影响 | 第44-46页 |
| 3.5 不同培养液对冻融塔里木马鹿精子体外获能效果的影响 | 第46-48页 |
| 3.5.1 不同培养液对精子活力及存活时间的影响 | 第46-47页 |
| 3.5.2 不同培养液对精子体外获能效果的影响 | 第47-48页 |
| 3.6 不同获能方法对冻融塔里木马鹿精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第48-50页 |
| 3.6.1 不同获能方法对精子体外获能效果的影响 | 第48-49页 |
| 3.6.2 不同获能方法对冻融塔里木马鹿精子蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响 | 第49-50页 |
| 3.7 BSA、HCO_3~-和Ca~(2+)对冻融塔里木马鹿精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第50-66页 |
| 3.7.1 BSA、HCO_3~-和Ca~(2+)协同对冻融塔里木马鹿精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第50-54页 |
| 3.7.2 BSA对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响 | 第54-58页 |
| 3.7.3 HCO_3~-对冻融塔里木马鹿精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第58-62页 |
| 3.7.4 Ca~(2+)对冻融塔里木马鹿精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第62-66页 |
| 3.8 血清与肝素结合使用对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第66-74页 |
| 3.8.1 不同血清对冻融塔里木马鹿精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响 | 第66-70页 |
| 3.8.2 发情羊血清(ESS)和BSA与肝素(Hep)交叉使用对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第70-74页 |
| 3.9 塔里木马鹿精子体外获能最佳培养体系的验证 | 第74-80页 |
| 3.9.1 3种精子体外获能体系的比较 | 第74-77页 |
| 3.9.2 塔里木马鹿精子体外获能体系的验证 | 第77-80页 |
| 4 分析与讨论 | 第80-89页 |
| 4.1 塔里木马鹿鲜精与冻精获能过程中精子活力、获能率、顶体反应率的变化 | 第80页 |
| 4.2 塔里木马鹿鲜精与冻精获能过程中酪氨酸磷酸化蛋白的变化 | 第80-81页 |
| 4.3 塔里木马鹿不同个体冻融精子蛋白酪氨酸磷酸化表达水平的比较 | 第81-82页 |
| 4.4 冻精不同处理方法对塔里木马鹿活动精子回收率及体外获能效果的影响 | 第82页 |
| 4.5 不同培养液对塔里木马鹿冻融精子体外获能效果的影响 | 第82-83页 |
| 4.6 不同获能方法对塔里木马鹿精子体外获能效果及蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第83-84页 |
| 4.7 BSA、HCO_3~-和Ca~(2+)协同对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第84-85页 |
| 4.8 BSA对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第85页 |
| 4.9 碳酸根离子(HCO_3~)对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第85-86页 |
| 4.10 钙离子(Ca~(2+))对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第86-87页 |
| 4.11 血清和肝素协同对冻融塔里木马鹿精子体外获能及其蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第87-89页 |
| 结论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-101页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
