| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 柱花草 | 第11-12页 |
| 1.2 柱花草炭疽病 | 第12-16页 |
| 1.2.1 发生、分布与危害 | 第12页 |
| 1.2.2 病原菌及生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 防治方法 | 第13-15页 |
| 1.2.4 抗病机制及转抗病基因的研究 | 第15-16页 |
| 1.3 柱花草炭疽菌分子生物学研究 | 第16-20页 |
| 1.3.1 根癌农杆菌介导炭疽菌遗传转化 | 第16页 |
| 1.3.2 T-DNA标记基因侧翼序列的研究 | 第16-17页 |
| 1.3.3 基因敲除技术的研究 | 第17-19页 |
| 1.3.4 胶孢炭疽菌致病相关基因的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 研究内容、目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.5 技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 菌株、质粒及植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂及抗生素 | 第22-24页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第24页 |
| 2.1.4 培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.5 引物 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 柱花草胶孢炭疽菌致病缺陷突变体的筛选 | 第26页 |
| 2.2.2 致病缺陷突变体分子检测 | 第26-30页 |
| 2.2.3 致病缺陷突变体生物学性状分析 | 第30-32页 |
| 2.2.4 致病缺陷突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析 | 第32-34页 |
| 2.2.5 致病缺陷突变体952、1869 T-DNA标记基因CgDps,CgPtr功能验证 | 第34-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-91页 |
| 3.1 炭疽菌致病缺陷突变体的筛选 | 第39-40页 |
| 3.2 炭疽菌致病缺陷突变体的分子检测 | 第40-42页 |
| 3.2.1 炭疽菌致病缺陷突变体T-DNA插入稳定性PCR检测 | 第40-41页 |
| 3.2.2 炭疽菌致病缺陷突变体Southern印迹杂交验证 | 第41-42页 |
| 3.3 炭疽菌致病缺陷突变体生物学性状分析 | 第42-56页 |
| 3.3.1 致病缺陷突变体菌落形态及生长速率测定分析 | 第42-43页 |
| 3.3.2 致病缺陷突变体产孢量及孢子形态分析 | 第43-45页 |
| 3.3.3 致病缺陷突变体孢子萌发率的测定分析 | 第45-46页 |
| 3.3.4 致病缺陷突变体NaCl盐胁迫分析 | 第46-49页 |
| 3.3.5 致病缺陷突变体高渗透剂山梨醇(Sorbitol)胁迫分析 | 第49-51页 |
| 3.3.6 致病缺陷突变体细胞壁敏感性分析 | 第51-53页 |
| 3.3.7 致病缺陷突变体金属离子胁迫分析 | 第53-56页 |
| 3.4 炭疽菌致病缺陷突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析 | 第56-70页 |
| 3.4.1 致病缺陷突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆 | 第56-57页 |
| 3.4.2 致病缺陷突变体T-DNA插入位点标记基因的预测 | 第57-70页 |
| 3.5 致病缺陷突变体952、1869 T-DNA标记基因CgDps、CgPtr功能验证 | 第70-91页 |
| 3.5.1 敲除突变体载体的构建 | 第70-71页 |
| 3.5.2 敲除突变体的获得 | 第71-73页 |
| 3.5.3 敲除突变体的分子检测 | 第73-75页 |
| 3.5.4 敲除突变体致病力的测定 | 第75-76页 |
| 3.5.5 敲除突变体生物学性状分析 | 第76-91页 |
| 4 讨论 | 第91-97页 |
| 4.1 炭疽菌致病缺陷突变体的筛选 | 第91页 |
| 4.2 炭疽菌致病缺陷突变体生物学性状分析 | 第91-92页 |
| 4.3 炭疽菌致病缺陷突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆 | 第92页 |
| 4.4 炭疽菌致病缺陷突变体T-DNA插入位点标记基因的分析 | 第92-95页 |
| 4.5 基因CgDps、CgPtr功能验证 | 第95-97页 |
| 5 结论 | 第97-100页 |
| 6 研究展望 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-114页 |
| 基金项目资助 | 第114-115页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
