| 中文摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1.1 禽流感病毒概述 | 第15页 |
| 1.2 禽流感病毒生物学特性 | 第15-19页 |
| 1.2.1 聚合酶蛋白PB1、PB2、PA的结构及功能 | 第16页 |
| 1.2.2 血凝素蛋白HA的结构和功能 | 第16-17页 |
| 1.2.3 核蛋白NP的结构及功能 | 第17-18页 |
| 1.2.4 神经氨酸酶NA的机构及功能 | 第18页 |
| 1.2.5 基质蛋白M1、M2的结构及功能 | 第18页 |
| 1.2.6 非结构蛋白的结构及功能 | 第18-19页 |
| 1.3 禽流感病毒HA抗原表位研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 禽流感诊断 | 第20-21页 |
| 1.4.1 禽流感病毒的分离培养 | 第20页 |
| 1.4.2 禽流感病毒的分子生物学检测技术 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 H1-H15亚型AIV及NDV鸡抗血清的制备 | 第23-28页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 病毒 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验动物的预处理 | 第24页 |
| 2.2.2 H1—H15亚型禽流感病毒免疫抗原的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.3 新城疫病毒免疫抗原的制备 | 第25-26页 |
| 2.3 结果 | 第26页 |
| 2.3.1 各亚型流感病毒和新城疫病毒尿囊液血凝价 | 第26页 |
| 2.3.2 各亚型流感病毒鸡抗血清和新城疫病毒鸡抗血清血凝抑制价 | 第26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 2.5 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 多肽芯片筛选H5亚型HA抗原表位多肽 | 第28-33页 |
| 3.1 材料 | 第28页 |
| 3.1.1 动物血清 | 第28页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第28页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 3.2 方法 | 第28-29页 |
| 3.2.1 H5亚型HA抗原表位多肽氨基酸序列模板的选择 | 第28页 |
| 3.2.2 多肽芯片矩阵的制备 | 第28页 |
| 3.2.3 多肽芯片矩阵背景值的测定 | 第28页 |
| 3.2.4 多肽芯片矩阵与抗H5亚型AIV鸡血清反应值得测定 | 第28-29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-31页 |
| 3.3.1 H5亚型HA抗原表位多肽氨基酸序列模板 | 第29页 |
| 3.3.2 H5亚型HA抗原表位多肽的合成及矩阵的生成 | 第29页 |
| 3.3.3 HA抗原表位多肽矩阵与二抗间的背景值 | 第29页 |
| 3.3.4 多肽芯片矩阵与抗H5亚型AIV鸡血清反应扫描结果 | 第29-31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-32页 |
| 3.5 小结 | 第32-33页 |
| 第四章 H5-1抗原表位多肽ELISA方法检测H5亚型禽流感病毒HA抗体 | 第33-42页 |
| 4.1 材料 | 第33页 |
| 4.1.1 主要试剂及配制 | 第33页 |
| 4.1.2 仪器 | 第33页 |
| 4.2 方法 | 第33-35页 |
| 4.2.1 H5-1、H5-2、H5-3、H5-4抗原表位多肽的合成 | 第33-34页 |
| 4.2.2 H5-1抗原表位多肽最佳包被量及血清最佳稀释度的确定 | 第34页 |
| 4.2.3 ELISA试验条件的优化处理 | 第34-35页 |
| 4.2.4 cut off值的确定 | 第35页 |
| 4.2.5 H5-1抗原表位多肽对H1-H15亚型禽流感病毒抗体特异性的检测 | 第35页 |
| 4.2.6 H5-2、H5-3、H5-4抗原表位多肽对H1-H15亚型禽流感病毒抗体特异性的检测 | 第35页 |
| 4.2.7 H5-1抗原表位多肽对新城疫病毒抗体特异性的检测 | 第35页 |
| 4.2.8 H5-1抗原表位多肽系列梯度滴定试验 | 第35页 |
| 4.2.9 符合性试验 | 第35页 |
| 4.3 结果与分析 | 第35-41页 |
| 4.3.1 H5-1、H5-2、H5-3、H5-4抗原表位多肽的合成 | 第35-36页 |
| 4.3.2 H5-1抗原表位多肽最佳包被量及血清最佳稀释度 | 第36页 |
| 4.3.3 ELISA试验条件优化处理结果 | 第36-38页 |
| 4.3.4 cut-off值 | 第38页 |
| 4.3.5 H5-1抗原表位多肽对H1-H15亚型禽流感病毒抗体特异性检测结果 | 第38-39页 |
| 4.3.6 H5-2、H5-3、H5-4抗原表位多肽对H1-H15亚型禽流感病毒抗体特异性的检测结果 | 第39-40页 |
| 4.3.7 对新城疫病毒抗体特异性检测结果 | 第40页 |
| 4.3.8 H5-1抗原表位多肽系列梯度滴定试验结果 | 第40页 |
| 4.3.9 符合性试验结果 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41页 |
| 4.5 小结 | 第41-42页 |
| 第五章 H5-1抗原表位多肽核心基序的确定 | 第42-51页 |
| 5.1 材料 | 第42-43页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第42页 |
| 5.1.2 仪器 | 第42-43页 |
| 5.2 方法 | 第43-46页 |
| 5.2.1 H5-1抗原表位多肽截短引物的设计 | 第43页 |
| 5.2.2 H5-1抗原表位多肽截短PGEX-6P-1原核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 5.2.3 H5-1抗原表位多肽截短的原核表达 | 第44-45页 |
| 5.2.4 H5-1抗原表位多肽截短核心基序的确定 | 第45-46页 |
| 5.2.5 H5-1抗原表位多肽核心基序保守性分析 | 第46页 |
| 5.3 结果与分析 | 第46-49页 |
| 5.3.1 H5-1抗原表位多肽截短核酸引物 | 第46-47页 |
| 5.3.2 H5-1抗原表位多肽截短PGEX-6P-1原核表达载体构建结果 | 第47-48页 |
| 5.3.3 H5-1抗原表位多肽截短核心基序鉴定结果 | 第48-49页 |
| 5.3.4 H5-1抗原表位多肽核心基序保守性分析 | 第49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-50页 |
| 5.5 小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间文章发表情况 | 第60页 |
