| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-33页 |
| 1.1 手性药物的发展动态 | 第15-16页 |
| 1.2. 获得单一对映体手性化合物的途径、研发现状和策略 | 第16-18页 |
| 1.2.1 化学法获得手性化合物 | 第16-17页 |
| 1.2.2 生物技术在手性药物合成中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 光学纯的扁桃酸及其相关衍生物的药用价值 | 第18-22页 |
| 1.3.1 扁桃酸在医药中间体中的应用 | 第18-20页 |
| 1.3.2 扁桃酸苯环上不同取代基衍生物在医药中间体中的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.3 扁桃酸侧链不同长度取代物在医药中间体中的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 生物法制备光学纯扁桃酸和其相关衍生物的研究 | 第22-26页 |
| 1.4.1 腈转换酶 | 第23页 |
| 1.4.2 脂肪酶 | 第23-24页 |
| 1.4.3. 不对称氧化与不对称还原法 | 第24-25页 |
| 1.4.4. 发酵法 | 第25-26页 |
| 1.5 本论文的选题意义及研究内容 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-33页 |
| 第二章 高通量筛选模型的构建及菌株的筛选 | 第33-62页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 筛选模型Ⅰ | 第33-44页 |
| 2.2.1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1.1. 化学试剂与主要仪器 | 第35-36页 |
| 2.2.1.2. 培养基 | 第36页 |
| 2.2.1.3 菌株的初筛 | 第36页 |
| 2.2.1.4 菌株的复筛 | 第36页 |
| 2.2.1.5 2,4-二硝基苯肼显色法测定条件 | 第36-37页 |
| 2.2.1.6 液相分析检测条件 | 第37页 |
| 2.2.2 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 2.2.2.1 红棕色化合物的全波长扫描 | 第37-38页 |
| 2.2.2.2 酮酸与2,4-二硝基苯肼形成的红棕色化合物的摩尔消光系数的测定 | 第38-40页 |
| 2.2.2.3 DNPH显色法准确性的验证 | 第40-41页 |
| 2.2.2.4 显色法测得的表观选择率E_(app)和真实选择率E_(true)的比较 | 第41-43页 |
| 2.2.2.5 运用高通量筛选模型进行的菌株筛选情况 | 第43-44页 |
| 2.3. 筛选模型Ⅱ | 第44-54页 |
| 2.3.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 2.3.1.1 化学试剂与主要仪器 | 第45页 |
| 2.3.1.2 培养基 | 第45页 |
| 2.3.1.3 菌种的初筛 | 第45页 |
| 2.3.1.4 菌株的复筛 | 第45-46页 |
| 2.3.1.5 PPA与Fe~(3+)配合显色条件 | 第46页 |
| 2.3.1.6 液相分析检测条件 | 第46页 |
| 2.3.2 结果与讨论 | 第46-54页 |
| 2.3.2.1 蓝绿色的配合物的全波长扫描 | 第46-47页 |
| 2.3.2.2 显色体系pH对显色的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.2.3 不同显色剂用量对显色反应的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.2.4 不同的显色反应时间对吸光值的影响 | 第49页 |
| 2.3.2.5 蓝绿色配合物稳定性的考察 | 第49-50页 |
| 2.3.2.6 蓝绿色配合物线性范围的探究及摩尔消光系数的测定 | 第50-51页 |
| 2.3.2.7 显色法回收率实验 | 第51页 |
| 2.3.2.8 应用筛选模型进行菌株的筛选情况 | 第51-53页 |
| 2.3.2.9 菌株Sinorhizobium sp. ZJB-1 101拆分外消旋苯基乳酸的研究 | 第53-54页 |
| 2.4 相关菌株的鉴定 | 第54-60页 |
| 2.4.1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 2.4.1.1 化学试剂与主要仪器 | 第54页 |
| 2.4.1.2 菌株的形态观察 | 第54页 |
| 2.4.1.3 生理生化特征研究 | 第54-55页 |
| 2.4.1.4 16S rDNA扩增与测序 | 第55页 |
| 2.4.1.5 系统发育学分析 | 第55页 |
| 2.4.2 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 2.4.2.1 菌株ZJB1101的鉴定 | 第55-57页 |
| 2.4.2.1.1 ZJB-1101菌株形态观察 | 第55-56页 |
| 2.4.2.1.2 ZJB-1101 16S rDNA序列测序结果分析 | 第56-57页 |
| 2.4.2.2 菌株ZJB-1125的鉴定 | 第57-60页 |
| 2.4.2.2.1 ZJB-1125形态观察及生理生化鉴定 | 第57-59页 |
| 2.4.2.2.2 ZJB-1125 16S rDNA序列测序结果分析 | 第59-60页 |
| 2.5 本章小结 | 第60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 第三章 菌株酶解途径及底物特异性的研究 | 第62-82页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 材料与方法 | 第62-67页 |
| 3.2.1 菌种及静息细胞的制备 | 第62-63页 |
| 3.2.1.1 菌种 | 第62-63页 |
| 3.2.1.2 培养基 | 第63页 |
| 3.2.1.3 静息细胞的制备 | 第63页 |
| 3.2.2 静息细胞转化 | 第63页 |
| 3.2.3 手性柱上扁桃酸及其相关衍生物的分离 | 第63页 |
| 3.2.4. 菌株酶解途径的研究 | 第63-64页 |
| 3.2.5 产物的分离、提取及鉴定 | 第64-65页 |
| 3.2.6 菌株理化特性的比较和扁桃酸脱氢酶辅酶类型的探究 | 第65-66页 |
| 3.2.7 菌株底物特异性的研究 | 第66页 |
| 3.2.8 取代基效应的Hammett线性自由能方程 | 第66-67页 |
| 3.2.9 菌株Sinorhizobium sp. ZJB-1101催化各底物表观米氏常数的比较 | 第67页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第67-79页 |
| 3.3.1 手性柱上扁桃酸及其相关衍生物的分离 | 第67-69页 |
| 3.3.2 菌株酶解途径的研究 | 第69-71页 |
| 3.3.3 产物的分离、提取及鉴定 | 第71-73页 |
| 3.3.4 两种菌株理化特性的比较和扁桃酸脱氢酶辅酶类型的探究 | 第73-75页 |
| 3.3.5 取代基效应的Hammett线性自由能方程 | 第75-76页 |
| 3.3.6 菌株Sinorhizobium sp. ZJB-1101催化各底物表观米氏常数的比较 | 第76-77页 |
| 3.3.7 菌株底物特异性的研究 | 第77-79页 |
| 3.4 本章小结 | 第79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 第四章 P.aeruginosa ZJB-1 125培养条件的研究 | 第82-94页 |
| 4.1 引言 | 第82页 |
| 4.2 材料与方法 | 第82-83页 |
| 4.2.1 菌种 | 第82页 |
| 4.2.2 培养基 | 第82-83页 |
| 4.2.3 菌种发酵与静息细胞的制备 | 第83页 |
| 4.2.4 生物量测定 | 第83页 |
| 4.2.5 全细胞转化条件 | 第83页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第83-92页 |
| 4.3.1 产酶培养基组成的优化 | 第83-90页 |
| 4.3.1.1 诱导剂种类及添加量对菌体生长及产酶的影响 | 第83-85页 |
| 4.3.1.2 碳源的种类及浓度对菌体生长及产酶的影响 | 第85-87页 |
| 4.3.1.3 氮源的种类及浓度对菌体生长及产酶的影响 | 第87-89页 |
| 4.3.1.4 金属离子对菌体生长及产酶的影响 | 第89-90页 |
| 4.3.1.5 培养基正交实验 | 第90页 |
| 4.3.2 其它培养条件对菌体生长和产酶的影响 | 第90-92页 |
| 4.3.2.1 培养初始pH值对菌体生长以及产酶的影响 | 第90-91页 |
| 4.3.2.2 接种量对菌体生长和酶活力的影响 | 第91-92页 |
| 4.4 本章小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-94页 |
| 第五章 P.aeruginosa ZJB-1 125拆分邻氯扁桃酸的研究 | 第94-106页 |
| 5.1 引言 | 第94页 |
| 5.2 材料与方法 | 第94-97页 |
| 5.2.1 菌种 | 第94页 |
| 5.2.2 培养基 | 第94-95页 |
| 5.2.3 细胞培养条件 | 第95页 |
| 5.2.4 静息细胞转化 | 第95-97页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第97-104页 |
| 5.3.1 反应体系pH对菌体催化拆分外消旋邻氯扁桃酸的影响 | 第97-98页 |
| 5.3.2 底物浓度对菌体催化拆分条件的影响 | 第98页 |
| 5.3.3 反应温度对静息细胞催化拆分外消旋邻氯扁桃酸的影响 | 第98-100页 |
| 5.3.4 不同的菌体量对拆分外消旋邻氯扁桃酸的影响 | 第100页 |
| 5.3.5 静息细胞使用批次的影响 | 第100-101页 |
| 5.3.6 溶氧和氧载体对菌体拆分反应的影响 | 第101-102页 |
| 5.3.7 菌体热稳定性的研究 | 第102-103页 |
| 5.3.8 酶促反应动力学研究 | 第103-104页 |
| 5.4 本章小结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-106页 |
| 第六章 结论与展望 | 第106-110页 |
| 6.1 结论 | 第106-108页 |
| 6.2 展望 | 第108-110页 |
| 附录 | 第110-125页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
