摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1 植物激素与衰老的研究 | 第12-15页 |
1.1 植物衰老概念与衰老类型 | 第12页 |
1.2 植物衰老的诱导 | 第12-13页 |
1.3 叶片衰老的分子基础 | 第13-15页 |
1.3.1 叶片衰老相关基因的分类 | 第13-14页 |
1.3.2 叶片衰老相关基因的表达调控 | 第14-15页 |
2 矮牵牛研究概况 | 第15-16页 |
3 油菜素内酯的研究进展 | 第16-21页 |
3.1 油菜素内酯合成和代谢途径 | 第16-17页 |
3.2 油菜素内酯合成途径 | 第17-18页 |
3.3 油菜素内酯代谢途径 | 第18-19页 |
3.4 油菜素内酯的生理功能 | 第19-20页 |
3.4.1 细胞伸长与分裂 | 第19页 |
3.4.2 促进光合作用 | 第19-20页 |
3.4.3 调节衰老 | 第20页 |
3.4.4 逆境响应 | 第20页 |
3.5 油菜素内酯与其它植物激素之间的相互作用 | 第20-21页 |
3.5.1 油菜素内酯与生长素之间的关系 | 第20页 |
3.5.2 油菜素内酯与赤霉素之间的关系 | 第20-21页 |
3.5.3 油菜素内酯与细胞分裂素之间的关系 | 第21页 |
3.5.4 油菜素内酯与脱落酸之间的关系 | 第21页 |
3.5.5 油菜素内酯与乙烯之间的关系 | 第21页 |
4 花卉分子育种研究进展及存在的问题 | 第21-22页 |
5 研究目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 转SAG12-BAS1基因烟草植株的获得 | 第24-41页 |
1 材料与方法 | 第24-27页 |
1.1 材料供试 | 第24页 |
1.2 实验试剂及仪器 | 第24-25页 |
1.2.1 主要试剂 | 第24-25页 |
1.2.2 主要仪器 | 第25页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第25-27页 |
1.3.1 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
1.3.2 主要培养基的配制 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-34页 |
2.1 植物表达载体构建 | 第27页 |
2.2 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第27页 |
2.3 大肠杆菌的DNA转化 | 第27-28页 |
2.4 质粒DNA提取 | 第28页 |
2.5 农杆菌感受态细胞制备 | 第28页 |
2.6 农杆菌的DNA转化 | 第28页 |
2.7 农杆菌菌液PCR鉴定 | 第28-30页 |
2.8 菌种保存 | 第30页 |
2.9 遗传转化 | 第30-31页 |
2.9.1 农杆菌活化与培养 | 第30页 |
2.9.2 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第30页 |
2.9.3 抗性芽筛选和生根 | 第30-31页 |
2.9.4 烟草的炼苗与移栽 | 第31页 |
2.10 转基因植株GUS组织化学染色 | 第31页 |
2.11 烟草植株DNA提取 | 第31页 |
2.12 烟草基因组DNA的PCR | 第31-32页 |
2.13 生长观察试验 | 第32页 |
2.14 转基因烟草叶绿素含量测定和保护性酶活性的测定 | 第32-34页 |
2.14.1 叶绿素含量测定 | 第32-33页 |
2.14.2 烟草中SOD酶活和MDA含量的测定 | 第33-34页 |
2.15 植物激素含量测定 | 第34页 |
3 结果与分析 | 第34-39页 |
3.1 植物表达载体的获得 | 第34页 |
3.2 农杆菌介导的烟草遗传转化与转基因植株获得 | 第34-35页 |
3.3 植物表型及叶片衰老分析 | 第35-37页 |
3.4 转基因烟草理化指标测定和叶片衰老进程 | 第37-39页 |
3.5 烟草植株中细胞分裂素含量的测定 | 第39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
第三章转 基因矮牵牛的获得 | 第41-59页 |
1 材料与方法 | 第41页 |
1.1 材料与试剂 | 第41页 |
1.2 实验试剂,仪器,主要溶液的配制(参考第三章:实验材料) | 第41页 |
2 实验方法 (参考第三章:实验方法) | 第41-47页 |
2.1 农杆菌介导的矮牵牛遗传转化 | 第41页 |
2.2 抗性芽筛选和生根 | 第41页 |
2.3 矮牵牛的炼苗与移栽 | 第41-42页 |
2.4 转基因植株GUS组织化学染色(参考第三章:烟草组织化学染色) | 第42页 |
2.5 矮牵牛植株DNA提取 | 第42页 |
2.6 矮牵牛基因组DNA的PCR鉴定 | 第42页 |
2.7 叶片的离体培养及花朵寿命的检测 | 第42页 |
2.8 叶绿素含量测定及可溶性糖测定 | 第42页 |
2.9 SOD、POD和CAT酶活性测定及MDA含量测定: | 第42-45页 |
2.10 矮牵牛衰老相关基因表达分析 | 第45-47页 |
2.10.1 矮牵牛叶及花中提取总RNA | 第45页 |
2.10.2 cDNA第一链合成 | 第45页 |
2.10.3 Real time-PCR反应 | 第45-47页 |
3 结果分析 | 第47-57页 |
3.1 农杆菌介导的矮牵牛遗传转化与转基因植株获得 | 第47-48页 |
3.2 矮牵牛植物表型及叶片衰老分析 | 第48-53页 |
3.3 转基因矮牵牛理化指标测定和叶片衰老进程 | 第53-55页 |
3.4 转BAS1基因对植物衰老相关基因表达的影响 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
第四章 结论、创新与展望 | 第59-62页 |
1 研究结论 | 第59-60页 |
(1)转基因烟草 | 第59页 |
(2)转基因矮牵牛 | 第59-60页 |
2 研究创新 | 第60-61页 |
3 研究展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-73页 |
缩略词 | 第73-74页 |
附录 | 第74-76页 |
1.硕士期间发表研究论文 | 第74-75页 |
2.硕士期间参加会议 | 第75页 |
3.硕士期间参加课题 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-78页 |