摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第8-17页 |
1.1 Rap1 简介 | 第8-11页 |
1.2 Rap1 GEFs 和 GAPs | 第11-13页 |
1.3 Rap1 生理功能与信号通路 | 第13-14页 |
1.4 Rap1 在肿瘤发生中的角色 | 第14-15页 |
1.5 本课题的研究目的、内容与意义 | 第15-17页 |
2 核心实验技术与原理 | 第17-23页 |
2.1 蛋白纯化原理 | 第17-18页 |
2.2 蛋白质浓度测定原理 | 第18页 |
2.3 GST Pull-down 技术 | 第18-19页 |
2.4 变性凝胶电泳与免疫印迹技术 | 第19-20页 |
2.5 流式细胞技术原理 | 第20-21页 |
2.6 共聚焦扫描显微镜的成像原理 | 第21页 |
2.7 细胞增殖检测-MTT 比色法原理 | 第21页 |
2.8 细胞粘附实验原理 | 第21-23页 |
3 材料与方法 | 第23-40页 |
3.1 细胞传代培养实验 | 第23-25页 |
3.2 GST 融合蛋白纯化与鉴定 | 第25-28页 |
3.3 细胞总蛋白测定 | 第28-30页 |
3.4 GST-RBD Pull-down Assay 技术 | 第30-31页 |
3.5 Western Blot 实验 | 第31-34页 |
3.6 免疫印迹—转膜实验 | 第34-35页 |
3.7 流式细胞实验技术 | 第35-36页 |
3.8 激光共聚焦扫描显微镜成像试验—Confocal 成像技术 | 第36-38页 |
3.9 细胞增殖检测试验-MTT 法 | 第38-40页 |
4 结果与分析 | 第40-46页 |
4.1 合成肽 Pep-RBD-CPPs-FAM 和 Pep-RBD 竞争性抑制人乳腺癌MDA-MB-231 细胞 Rap1GTP 水平 | 第40-43页 |
4.2 合成肽 Pep-RBD-CPPs-FAM 和 Pep-RBD 抑制 MDA-MB-231 细胞粘附功能 | 第43-44页 |
4.3 合成肽 Pep-RBD-CPPs-FAM 或 Pep-RBD 不影响人乳腺癌MDA-MB-231 细胞 RasGTP 或 RacGTP 水平 | 第44-46页 |
5 总结与讨论 | 第46-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 主要符号和缩略词表 | 第56页 |