| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 插图和附表清单 | 第10-13页 |
| 縮略词表 | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-30页 |
| 1.1 番茄果实成熟机理研究 | 第16-20页 |
| 1.1.1 番茄果实成熟相关突变体 | 第16-17页 |
| 1.1.2 植物激素对番茄果实成熟的影响 | 第17-20页 |
| 1.2 Green-ripe(Gr)番茄的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.2.1 Gr番茄突变体的生理特征 | 第20页 |
| 1.2.2 Gr突变体果实成熟异常的分子机理 | 第20-21页 |
| 1.3 蛋白-蛋白相互作用研究 | 第21-24页 |
| 1.3.1 蛋白-蛋白相互作用的研究方法 | 第22页 |
| 1.3.2 酵母双杂交系统 | 第22-24页 |
| 1.3.3 酵母文库的筛选 | 第24页 |
| 1.4 蛋白组学的研究 | 第24-27页 |
| 1.4.1 蛋白组学的研究途径 | 第25页 |
| 1.4.2 差异蛋白组学的研究方法 | 第25-27页 |
| 1.5 本研究的技术路线与方法 | 第27-28页 |
| 1.5.1 技术路线 | 第27-28页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第28页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 第二章 SlGR调控番茄果实乙烯信号转导的机制研究 | 第30-48页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-37页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第31页 |
| 2.1.3 其他试剂的配制 | 第31-32页 |
| 2.1.4 外源乙烯处理番茄果实 | 第32-33页 |
| 2.1.5 番茄果实总RNA的提取与cDNA合成 | 第33-34页 |
| 2.1.6 TRV沉默载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.1.7 VIGS侵染液的制备与侵染 | 第36-37页 |
| 2.1.8 实时荧光定量qRT-PCR | 第37页 |
| 2.2 结果与分析 | 第37-47页 |
| 2.2.1 番茄果实总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.2 SlGR基因在几种番茄突变体果实中的表达情况 | 第38-39页 |
| 2.2.3 乙烯对SlGR基因表达水平的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.4 TRV沉默载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.2.5 番茄果实VIGS沉默效率分析 | 第41-43页 |
| 2.2.6 SlGR基因的沉默对乙烯生物合成途径关键酶基因表达水平的影响 | 第43-45页 |
| 2.2.7 SlGR基因的沉默对乙烯信号转导途径各组件分子表达水平的影响 | 第45-47页 |
| 2.3 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 番茄SlGR互作蛋白的筛选与验证 | 第48-70页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-56页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.1.2 仪器与试剂 | 第48-49页 |
| 3.1.3 其他试剂的配制 | 第49-51页 |
| 3.1.4 番茄果实总RNA的提取与cDNA合成 | 第51-52页 |
| 3.1.5 载体pGBKT7-SlGR的构建 | 第52页 |
| 3.1.6 大肠杆菌E.coli转化与载体质粒的获得 | 第52页 |
| 3.1.7 酵母菌株Y2H感受态的制备与转化 | 第52-53页 |
| 3.1.8 酵母cDNA文库丰度滴定 | 第53-54页 |
| 3.1.9 SlGR基因毒性与自激活性的检测 | 第54页 |
| 3.1.10 酵母cDNA文库的筛选与互作蛋白的鉴定 | 第54-56页 |
| 3.2 结果与分析 | 第56-69页 |
| 3.2.1 番茄果实总RNA的提取与SlGR基因的PCR扩增 | 第56-58页 |
| 3.2.2 重组体pGBKT7-SlGR质粒的构建与鉴定 | 第58页 |
| 3.2.3 酵母菌株Y2H感受态的转化效率与转化鉴定 | 第58-59页 |
| 3.2.4 番茄果实酵母cDNA文库丰度滴定 | 第59-60页 |
| 3.2.5 番茄果实酵母cDNA文库筛选与鉴定 | 第60-65页 |
| 3.2.6 候选蛋白的酵母双杂交体外验证 | 第65-67页 |
| 3.2.7 候选互作蛋白mRNA水平检测 | 第67-69页 |
| 3.3 本章小结 | 第69-70页 |
| 第四章 Gr突变体番茄果实的蛋白组学研究 | 第70-85页 |
| 4.1 材料与方法 | 第70-74页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第70页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第70-71页 |
| 4.1.3 其他试剂的配制 | 第71-72页 |
| 4.1.4 番茄果实总蛋白的提取与消化 | 第72-73页 |
| 4.1.5 iTRAQ染料标记与SCX分馏 | 第73页 |
| 4.1.6 质谱鉴定与分析 | 第73-74页 |
| 4.2 结果与分析 | 第74-84页 |
| 4.2.1 番茄果实总蛋白的定性与功能分类 | 第74-76页 |
| 4.2.2 Gr突变体番茄果实蛋白组学表达谱 | 第76-81页 |
| 4.2.3 基于蛋白组学的Gr突变体果实代谢过程特点分析 | 第81-84页 |
| 4.3 本章小结 | 第84-85页 |
| 第五章 Gr突变体果实部分差异表达蛋白的验证与功能分析 | 第85-95页 |
| 5.1 材料与方法 | 第85-88页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第85-86页 |
| 5.1.2 试剂与仪器 | 第86页 |
| 5.1.3 其他试剂的配制 | 第86页 |
| 5.1.4 番茄果实硬度测定 | 第86-87页 |
| 5.1.5 番茄果实呼吸强度测定 | 第87页 |
| 5.1.6 番茄果实总RNA的提取与cDNA合成 | 第87页 |
| 5.1.7 TRV沉默载体的构建 | 第87页 |
| 5.1.8 重组体质粒的转化 | 第87页 |
| 5.1.9 VIGS侵染液的制备与侵染 | 第87页 |
| 5.1.10 实时荧光定量qRT-PCR | 第87-88页 |
| 5.2 结果与分析 | 第88-93页 |
| 5.2.1 番茄果实总RNA的提取 | 第88-89页 |
| 5.2.2 TRV沉默载体的制备与果实沉默效率 | 第89-90页 |
| 5.2.3 SlGR基因对番茄果实软化的影响 | 第90-92页 |
| 5.2.4 SlGR基因对番茄果实呼吸作用的影响 | 第92页 |
| 5.2.5 SlGR基因对果实其他代谢途径的影响 | 第92-93页 |
| 5.3 本章小结 | 第93-95页 |
| 第六章 全文结论与展望 | 第95-97页 |
| 6.1 结论 | 第95页 |
| 6.2 创新点 | 第95-96页 |
| 6.3 展望 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-108页 |
| 附录Ⅰ | 第108-109页 |
| 附录Ⅱ | 第109-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 个人简介 | 第116-117页 |
