| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 斑马鱼心脏发育形态过程及分子机制 | 第11-18页 |
| 1.1.1 斑马鱼胚胎心脏发育形态过程 | 第11-14页 |
| 1.1.2 斑马鱼心管形成及分子机制 | 第14-16页 |
| 1.1.3 腔室的形成及分子机制 | 第16-17页 |
| 1.1.4 斑马鱼心脏环化及分子机制 | 第17页 |
| 1.1.5 斑马鱼胚胎与鸡、小鼠和人类的心脏发育时期比较 | 第17-18页 |
| 1.2 斑马鱼FBXL5基因及其在心脏发育中的作用 | 第18页 |
| 1.3 泛素-蛋白酶体途径与心脏发育 | 第18-22页 |
| 1.3.1 泛素-蛋白酶体途径的组成 | 第18-21页 |
| 1.3.2 泛素-蛋白酶体途径与心脏发育 | 第21-22页 |
| 1.4 本文研究的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-38页 |
| 2.1 材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 酶类和试剂盒 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 斑马鱼 | 第23-24页 |
| 2.1.4 培养基和缓冲液 | 第24-25页 |
| 2.1.5 其他试剂 | 第25页 |
| 2.1.6 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.7 用于生物信息学分析的软件和数据库 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 组织样品总RNA的抽提以及cDNA文库的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.2 RNA甲醛变性胶电泳 | 第28页 |
| 2.2.3 PCR反应混合液配制 | 第28-29页 |
| 2.2.4 PCR反应 | 第29-30页 |
| 2.2.5 PCR产物纯化与回收 | 第30页 |
| 2.2.6 连接 | 第30页 |
| 2.2.7 制备感受态细胞 | 第30-31页 |
| 2.2.8 转化(热休克法) | 第31页 |
| 2.2.9 质粒的小量制备 | 第31-32页 |
| 2.2.10 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.11 测序 | 第33页 |
| 2.2.12 蛋白的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.13 免疫共沉淀(CO-IP) | 第34-35页 |
| 2.2.14 SDS-PAGE | 第35-36页 |
| 2.2.15 Westernblot | 第36-37页 |
| 2.2.16 斑马鱼morpholino技术 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果及讨论 | 第38-52页 |
| 3.1 实验结果 | 第38-49页 |
| 3.1.1 斑马鱼Fbxl5基因的生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 3.1.2 斑马鱼Fbxl5基因克隆 | 第40-44页 |
| 3.1.3 斑马鱼Fbxl5基因morpholino干扰研究 | 第44-45页 |
| 3.1.4 Fbxl5蛋白与Foxp4蛋白相互作用 | 第45页 |
| 3.1.5 Fbxl5蛋白与Skp1蛋白相互作用 | 第45-46页 |
| 3.1.6 斑马鱼Nkx2.5基因兔多克隆抗体的制备 | 第46-49页 |
| 3.1.7 Fbxl5调控Nkx2.5基因的蛋白表达分析 | 第49页 |
| 3.2 讨论 | 第49-52页 |
| 3.2.0 Morpholino oligos干扰技术 | 第49-50页 |
| 3.2.1 Fbxl5基因的功能 | 第50-51页 |
| 3.2.2 Fbxl5基因参与心脏发育的途径 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录1 | 第59-60页 |
| 附录2 | 第60-61页 |
| 后记 | 第61-62页 |
