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棉铃虫细胞色素P450CYP6B7基因过量表达及调控机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩略语第11-12页
第一章 绪论第12-30页
    1.1 棉铃虫对杀虫剂抗药性的发展第12-14页
    1.2 细胞色素P450酶系与拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性第14-20页
        1.2.1 细胞色素P450酶系第14-18页
        1.2.2 P450基因与拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性的关系第18-20页
    1.3 昆虫P450基因的表达调控机制第20-25页
        1.3.1 基因表达调控的顺式作用元件(Cis-acting Element)第20-21页
        1.3.2 基因表达调控的反式作用因子(Trans-acting Factor)第21-22页
        1.3.3 P450基因的表达调控与昆虫的环境适应性第22-23页
        1.3.4 P450基因的表达调控与昆虫的抗药性第23-24页
        1.3.5 P450基因顺式作用元件的研究方法第24-25页
    1.4 转录组测序揭示昆虫抗药性发展的研究进展第25-28页
        1.4.1 转录组测序的简介第25-27页
        1.4.2 转录组测序在昆虫学中的应用第27-28页
    1.5 本研究的意义、主要内容和技术路线第28-30页
        1.5.1 研究意义第28页
        1.5.2 主要研究内容第28-29页
        1.5.3 技术路线第29-30页
第二章 田间棉铃虫抗性水平及抗性相关P450基因表达水平测定第30-47页
    2.1 材料与方法第30-38页
        2.1.1 供试昆虫第30-31页
        2.1.2 主要仪器设备第31-32页
        2.1.3 主要试剂第32-33页
        2.1.4 实验方法第33-38页
    2.2 结果与分析第38-44页
        2.2.1 河间(Hejian)和夏津(Xiajin)种群棉铃虫抗性测定第38-39页
        2.2.2 采自2014年的田间种群棉铃虫对四种杀虫剂的抗性水平第39-40页
        2.2.3 田间种群棉铃虫对氰戊菊酯的抗性水平及增效作用测定第40页
        2.2.4 RNA提取结果第40-41页
        2.2.5 实时荧光定量PCR扩增效率和熔解曲线第41-42页
        2.2.6 实时荧光定量PCR结果第42-44页
    2.3 讨论第44-47页
第三章 棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区序列的克隆和分析第47-64页
    3.1 材料与方法第47-57页
        3.1.1 供试昆虫第47页
        3.1.2 主要仪器设备第47页
        3.1.3 主要试剂第47-48页
        3.1.4 实验方法第48-57页
    3.2 结果与分析第57-63页
        3.2.1 基因组DNA提取结果第57-58页
        3.2.2 基因组DNA完整性检测第58页
        3.2.3 四种限制性内切酶酶切结果第58-59页
        3.2.4 目的片段的获得第59页
        3.2.5 CYP6B7基因5'非翻译区序列的分析第59-62页
        3.2.6 HDS和Beijing种群棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区序列比较第62-63页
    3.3 讨论第63-64页
第四章 棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区2-十三烷酮顺式作用元件的鉴定第64-81页
    4.1 材料与方法第64-71页
        4.1.1 供试昆虫第64页
        4.1.2 主要仪器设备第64页
        4.1.3 主要试剂第64-65页
        4.1.4 实验方法第65-71页
    4.2 实验结果第71-79页
        4.2.1 2-十三烷酮对棉铃虫中肠CYP6B7基因的诱导表达第71-73页
        4.2.2 pGL3-CYP6B7重组质粒的构建第73-74页
        4.2.3 2-十三烷酮顺式作用元件的鉴定第74-79页
    4.3 讨论第79-81页
第五章 棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区氰戊菊酯响应区的鉴定第81-88页
    5.1 材料与方法第81-82页
        5.1.1 供试昆虫第81页
        5.1.2 主要仪器设备第81页
        5.1.3 主要试剂第81页
        5.1.4 实验方法第81-82页
    5.2 实验结果第82-86页
        5.2.1 氰戊菊酯对棉铃虫中肠CYP6B7基因的诱导表达第82-83页
        5.2.2 CYP6B7基因5'非翻译区氰戊菊酯响应区的鉴定第83-86页
    5.3 讨论第86-88页
第六章 氰戊菊酯抗性和敏感种群棉铃虫转录组测序分析第88-101页
    6.1 材料与方法第88-91页
        6.1.1 供试昆虫第88页
        6.1.2 主要仪器设备第88页
        6.1.3 主要试剂第88-89页
        6.1.4 实验方法第89-91页
    6.2 实验结果第91-99页
        6.2.1 BJR种群氰戊菊酯抗药性测定结果第91页
        6.2.2 Illumina测序结果和数据组装第91-92页
        6.2.3 unigenes的功能注释和分类第92-96页
        6.2.4 差异表达基因(DEGs)的筛选第96页
        6.2.5 差异表达基因的验证第96-98页
        6.2.6 转录因子分析第98-99页
    6.3 讨论第99-101页
第七章 全文总结第101-103页
    7.1 田间棉铃虫抗药性及抗性相关细胞色素P450基因表达水平测定第101页
    7.2 CYP6B7基因5'非翻译区序列的克隆和分析第101页
    7.3 2-十三烷酮对CYP6B7基因的诱导和顺式作用元件的鉴定第101页
    7.4 氰戊菊酯对CYP6B7基因的诱导和响应区的鉴定第101-102页
    7.5 氰戊菊酯抗性和敏感种群棉铃虫转录组测序分析第102-103页
第八章 创新点及展望第103-104页
    8.1 本研究的创新点第103页
    8.2 展望第103-104页
参考文献第104-116页
致谢第116-117页
作者简介第117页

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