摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-30页 |
1.1 棉铃虫对杀虫剂抗药性的发展 | 第12-14页 |
1.2 细胞色素P450酶系与拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性 | 第14-20页 |
1.2.1 细胞色素P450酶系 | 第14-18页 |
1.2.2 P450基因与拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性的关系 | 第18-20页 |
1.3 昆虫P450基因的表达调控机制 | 第20-25页 |
1.3.1 基因表达调控的顺式作用元件(Cis-acting Element) | 第20-21页 |
1.3.2 基因表达调控的反式作用因子(Trans-acting Factor) | 第21-22页 |
1.3.3 P450基因的表达调控与昆虫的环境适应性 | 第22-23页 |
1.3.4 P450基因的表达调控与昆虫的抗药性 | 第23-24页 |
1.3.5 P450基因顺式作用元件的研究方法 | 第24-25页 |
1.4 转录组测序揭示昆虫抗药性发展的研究进展 | 第25-28页 |
1.4.1 转录组测序的简介 | 第25-27页 |
1.4.2 转录组测序在昆虫学中的应用 | 第27-28页 |
1.5 本研究的意义、主要内容和技术路线 | 第28-30页 |
1.5.1 研究意义 | 第28页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第28-29页 |
1.5.3 技术路线 | 第29-30页 |
第二章 田间棉铃虫抗性水平及抗性相关P450基因表达水平测定 | 第30-47页 |
2.1 材料与方法 | 第30-38页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第30-31页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第31-32页 |
2.1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
2.1.4 实验方法 | 第33-38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-44页 |
2.2.1 河间(Hejian)和夏津(Xiajin)种群棉铃虫抗性测定 | 第38-39页 |
2.2.2 采自2014年的田间种群棉铃虫对四种杀虫剂的抗性水平 | 第39-40页 |
2.2.3 田间种群棉铃虫对氰戊菊酯的抗性水平及增效作用测定 | 第40页 |
2.2.4 RNA提取结果 | 第40-41页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR扩增效率和熔解曲线 | 第41-42页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR结果 | 第42-44页 |
2.3 讨论 | 第44-47页 |
第三章 棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区序列的克隆和分析 | 第47-64页 |
3.1 材料与方法 | 第47-57页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第47页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第47页 |
3.1.3 主要试剂 | 第47-48页 |
3.1.4 实验方法 | 第48-57页 |
3.2 结果与分析 | 第57-63页 |
3.2.1 基因组DNA提取结果 | 第57-58页 |
3.2.2 基因组DNA完整性检测 | 第58页 |
3.2.3 四种限制性内切酶酶切结果 | 第58-59页 |
3.2.4 目的片段的获得 | 第59页 |
3.2.5 CYP6B7基因5'非翻译区序列的分析 | 第59-62页 |
3.2.6 HDS和Beijing种群棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区序列比较 | 第62-63页 |
3.3 讨论 | 第63-64页 |
第四章 棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区2-十三烷酮顺式作用元件的鉴定 | 第64-81页 |
4.1 材料与方法 | 第64-71页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第64页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第64页 |
4.1.3 主要试剂 | 第64-65页 |
4.1.4 实验方法 | 第65-71页 |
4.2 实验结果 | 第71-79页 |
4.2.1 2-十三烷酮对棉铃虫中肠CYP6B7基因的诱导表达 | 第71-73页 |
4.2.2 pGL3-CYP6B7重组质粒的构建 | 第73-74页 |
4.2.3 2-十三烷酮顺式作用元件的鉴定 | 第74-79页 |
4.3 讨论 | 第79-81页 |
第五章 棉铃虫CYP6B7基因5'非翻译区氰戊菊酯响应区的鉴定 | 第81-88页 |
5.1 材料与方法 | 第81-82页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第81页 |
5.1.2 主要仪器设备 | 第81页 |
5.1.3 主要试剂 | 第81页 |
5.1.4 实验方法 | 第81-82页 |
5.2 实验结果 | 第82-86页 |
5.2.1 氰戊菊酯对棉铃虫中肠CYP6B7基因的诱导表达 | 第82-83页 |
5.2.2 CYP6B7基因5'非翻译区氰戊菊酯响应区的鉴定 | 第83-86页 |
5.3 讨论 | 第86-88页 |
第六章 氰戊菊酯抗性和敏感种群棉铃虫转录组测序分析 | 第88-101页 |
6.1 材料与方法 | 第88-91页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第88页 |
6.1.2 主要仪器设备 | 第88页 |
6.1.3 主要试剂 | 第88-89页 |
6.1.4 实验方法 | 第89-91页 |
6.2 实验结果 | 第91-99页 |
6.2.1 BJR种群氰戊菊酯抗药性测定结果 | 第91页 |
6.2.2 Illumina测序结果和数据组装 | 第91-92页 |
6.2.3 unigenes的功能注释和分类 | 第92-96页 |
6.2.4 差异表达基因(DEGs)的筛选 | 第96页 |
6.2.5 差异表达基因的验证 | 第96-98页 |
6.2.6 转录因子分析 | 第98-99页 |
6.3 讨论 | 第99-101页 |
第七章 全文总结 | 第101-103页 |
7.1 田间棉铃虫抗药性及抗性相关细胞色素P450基因表达水平测定 | 第101页 |
7.2 CYP6B7基因5'非翻译区序列的克隆和分析 | 第101页 |
7.3 2-十三烷酮对CYP6B7基因的诱导和顺式作用元件的鉴定 | 第101页 |
7.4 氰戊菊酯对CYP6B7基因的诱导和响应区的鉴定 | 第101-102页 |
7.5 氰戊菊酯抗性和敏感种群棉铃虫转录组测序分析 | 第102-103页 |
第八章 创新点及展望 | 第103-104页 |
8.1 本研究的创新点 | 第103页 |
8.2 展望 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
作者简介 | 第117页 |