| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 1 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 卵丘细胞与卵母细胞间的结构与功能 | 第12-14页 |
| 1.1.1 卵丘细胞与卵母细胞间的结构联系 | 第12-13页 |
| 1.1.2 卵丘细胞与卵母细胞间的功能联系 | 第13-14页 |
| 1.1.3 卵丘细胞凋亡对卵母细胞发育能力的影响 | 第14页 |
| 1.2 溶酶体组织蛋白酶概述 | 第14-15页 |
| 1.2.1 组织蛋白酶简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 组织蛋白酶的分类 | 第15页 |
| 1.2.3 组织蛋白酶的功能 | 第15页 |
| 1.3 组织蛋白酶与细胞凋亡 | 第15-17页 |
| 1.3.1 组织蛋白酶参与细胞凋亡的机制 | 第15-16页 |
| 1.3.2 组织蛋白酶、卵丘细胞凋亡及胚胎发育间的相关性 | 第16-17页 |
| 1.4 细胞凋亡研究历程概述 | 第17-21页 |
| 1.4.1 细胞凋亡的概念 | 第17页 |
| 1.4.2 细胞凋亡特征及机制 | 第17-18页 |
| 1.4.3 细胞凋亡意义 | 第18-19页 |
| 1.4.4 细胞凋亡检测方法 | 第19-21页 |
| 1.5 本研究拟解决的关键技术问题及意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第24-26页 |
| 2.2 绵羊卵母细胞采集及体外胚胎生产 | 第26-27页 |
| 2.2.1 绵羊 COCs 的采集 | 第26页 |
| 2.2.2 卵母细胞的体外成熟 | 第26页 |
| 2.2.3 卵母细胞体外受精及胚胎发育培养 | 第26-27页 |
| 2.2.4 囊胚细胞荧光染色 | 第27页 |
| 2.3 绵羊卵丘细胞内 CTSB、CTSS 基因表达检测方法 | 第27-34页 |
| 2.3.1 总 RNA 的提取和检测 | 第27-29页 |
| 2.3.2 反转录合成 cDNA | 第29页 |
| 2.3.3 PCR 反应 | 第29-30页 |
| 2.3.4 qRT-PCR 标准品的制备 | 第30-34页 |
| 2.4 绵羊卵丘细胞凋亡检测方法 | 第34-36页 |
| 2.4.1 样品准备 | 第34-35页 |
| 2.4.2 标记说明 | 第35-36页 |
| 2.5 试验设计 | 第36-37页 |
| 2.5.1 绵羊 CTSB、CTSS 基因表达规律研究 | 第36-37页 |
| 2.5.2 绵羊卵丘细胞凋亡率检测 | 第37页 |
| 2.5.3 E-64 对绵羊卵母细胞成熟的影响 | 第37页 |
| 2.5.4 E-64 对绵羊卵母细胞体外受精效率的影响 | 第37页 |
| 2.5.5 E-64 对绵羊体外受精后胚胎质量的影响 | 第37页 |
| 2.6 数据分析 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-50页 |
| 3.1 绵羊卵丘细胞内 CTSB、CTSS 基因表达规律分析 | 第38-44页 |
| 3.1.1 CTSB、CTSS 基因 qRT-PCR 结果 | 第38-39页 |
| 3.1.2 成年绵羊卵丘细胞 CTSB、CTSS 基因表达规律 | 第39-41页 |
| 3.1.3 羔羊卵丘细胞中 CTSB、CTSS 基因表达规律 | 第41-42页 |
| 3.1.4 成年羊与羔羊卵丘细胞中 CTSB、CTSS 基因表达差异 | 第42-44页 |
| 3.2 添加不同浓度 E-64 对绵羊卵丘细胞凋亡的影响 | 第44-48页 |
| 3.2.1 卵丘细胞凋亡结果分析 | 第44-45页 |
| 3.2.2 成年绵羊卵丘细胞凋亡结果 | 第45-46页 |
| 3.2.3 羔绵羊卵丘细胞凋亡结果 | 第46-47页 |
| 3.2.4 成年羊及羔羊卵丘细胞凋亡差异比较 | 第47-48页 |
| 3.3 添加不同浓度 E-64 对成年羊卵母细胞成熟及胚胎发育影响结果 | 第48-50页 |
| 3.3.1 添加不同浓度 E-64 对成年羊卵母细胞体外成熟效果的影响 | 第48页 |
| 3.3.2 添加不同浓度 E-64 对成年羊卵母细胞体外发育能力的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.3 添加不同浓度 E-64 对囊细胞数的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 绵羊卵丘细胞内 CTSB、CTSS 基因表达规律分析 | 第50页 |
| 4.1.1 绵羊卵丘细胞内 CTSB、CTSS 基因随时间变化的表达规律 | 第50页 |
| 4.1.2 E-64 浓度与绵羊卵丘细胞内 CTSB、CTSS 基因表达的相关性 | 第50页 |
| 4.2 绵羊卵丘细胞凋亡规律分析 | 第50-51页 |
| 4.2.1 绵羊卵丘细胞凋亡随时间的变化 | 第50-51页 |
| 4.2.2 添加不同浓度 E-64 对绵羊卵丘细胞凋亡规律的影响 | 第51页 |
| 4.3 成年绵羊与羔绵羊卵丘细胞凋亡规律分析 | 第51页 |
| 4.4 E-64 对绵羊卵母细胞发育能力影响的分析 | 第51-52页 |
| 4.5 组织蛋白酶、细胞凋亡及卵母细胞发育命运的相关性分析 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
