摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 小麦条锈病 | 第12-13页 |
1.1.1 小麦条锈病的危害 | 第12页 |
1.1.2 小麦条锈病的流行规律 | 第12页 |
1.1.3 小麦与条锈菌互作过程中的组织、细胞学研究 | 第12-13页 |
1.1.4 小麦条锈病的抗病基因克隆 | 第13页 |
1.2 细胞程序性死亡 | 第13-15页 |
1.2.1 细胞程序性死亡定义及概念 | 第13-14页 |
1.2.2 半胱氨酸蛋白酶研究进展 | 第14页 |
1.2.3 半胱氨酸蛋白酶的分类 | 第14-15页 |
1.3 囊泡转运相关SNARE基因 | 第15页 |
1.3.1 SNARE基因的发现 | 第15页 |
1.3.2 SNARE基因广泛参与植物抗病过程 | 第15页 |
1.3.3 植物特有NPSN基因家族 | 第15页 |
1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第15-18页 |
1.4.1 目的意义 | 第15-16页 |
1.4.2 技术路线 | 第16-18页 |
第二章 小麦半胱氨酸蛋白酶TAMCA4基因的克隆与功能研究 | 第18-35页 |
2.1 实验材料与方法 | 第18-22页 |
2.1.1 植物材料、接种及处理 | 第18页 |
2.1.2 RNA提取与实时定量荧光PCR | 第18页 |
2.1.3 cDNA序列的克隆 | 第18页 |
2.1.4 序列的生物信息学分析 | 第18-19页 |
2.1.5 载体构建 | 第19页 |
2.1.6 基因枪瞬时转化体系 | 第19-21页 |
2.1.7 病毒介导的基因沉默 | 第21-22页 |
2.1.8 小麦条锈菌侵染过程的组织学观察 | 第22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-33页 |
2.2.1 小麦半胱氨酸蛋白酶TaMCA4的克隆及结构特征 | 第22-23页 |
2.2.2 瞬时表达TaMCA4可以增强由坏死诱导因子Bax引起的坏死反应 | 第23-28页 |
2.2.3 瞬时表达TaMCA4可以增强由条锈菌效应蛋白引起的坏死反应 | 第28页 |
2.2.4 TaMCA4基因在小麦与条锈菌互作过程中的表达谱 | 第28-29页 |
2.2.5 TaMCA4沉默植株抗条锈菌感病性增强 | 第29-33页 |
2.3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 小麦囊泡转运相关SNARE基因的克隆与功能研究 | 第35-58页 |
3.1 实验材料与方法 | 第35-40页 |
3.1.1 cDNA序列的克隆 | 第35页 |
3.1.2 序列分析 | 第35-37页 |
3.1.3 酵母双杂交 | 第37页 |
3.1.4 双分子荧光互补 | 第37页 |
3.1.5 小麦条锈菌接种与实时荧光定量qRT-PCR | 第37-38页 |
3.1.6 病毒介导的基因沉默 | 第38页 |
3.1.7 条锈菌侵染及植物防卫反应的组织学观察 | 第38-39页 |
3.1.8 TaNPSN11的原核表达、抗体制备及Westernblot | 第39-40页 |
3.1.9 TaNPSN11的免疫胶体金定位 | 第40页 |
3.2 结果与分析 | 第40-56页 |
3.2.1 小麦TaNPSNs及植物抗病相关SNARE基因的克隆 | 第40-43页 |
3.2.2 TaNPSN11与TaSYP132蛋白互作 | 第43-45页 |
3.2.3 TaNPSNs与TaSYP132基因在小麦与条锈菌互作过程中的表达谱 | 第45-46页 |
3.2.4 TaNPSN11、TaNPSN13及TaSYP132基因沉默植株的抗条锈菌抗病性减弱 | 第46-52页 |
3.2.5 TaNPSN11的免疫胶体金定位 | 第52-56页 |
3.3 讨论 | 第56-58页 |
全文总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |