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小麦TaMCA4和SNAREs基因的克隆及其在小麦抗条锈病过程中的作用研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第12-18页
    1.1 小麦条锈病第12-13页
        1.1.1 小麦条锈病的危害第12页
        1.1.2 小麦条锈病的流行规律第12页
        1.1.3 小麦与条锈菌互作过程中的组织、细胞学研究第12-13页
        1.1.4 小麦条锈病的抗病基因克隆第13页
    1.2 细胞程序性死亡第13-15页
        1.2.1 细胞程序性死亡定义及概念第13-14页
        1.2.2 半胱氨酸蛋白酶研究进展第14页
        1.2.3 半胱氨酸蛋白酶的分类第14-15页
    1.3 囊泡转运相关SNARE基因第15页
        1.3.1 SNARE基因的发现第15页
        1.3.2 SNARE基因广泛参与植物抗病过程第15页
        1.3.3 植物特有NPSN基因家族第15页
    1.4 本研究的目的意义和技术路线第15-18页
        1.4.1 目的意义第15-16页
        1.4.2 技术路线第16-18页
第二章 小麦半胱氨酸蛋白酶TAMCA4基因的克隆与功能研究第18-35页
    2.1 实验材料与方法第18-22页
        2.1.1 植物材料、接种及处理第18页
        2.1.2 RNA提取与实时定量荧光PCR第18页
        2.1.3 cDNA序列的克隆第18页
        2.1.4 序列的生物信息学分析第18-19页
        2.1.5 载体构建第19页
        2.1.6 基因枪瞬时转化体系第19-21页
        2.1.7 病毒介导的基因沉默第21-22页
        2.1.8 小麦条锈菌侵染过程的组织学观察第22页
    2.2 结果与分析第22-33页
        2.2.1 小麦半胱氨酸蛋白酶TaMCA4的克隆及结构特征第22-23页
        2.2.2 瞬时表达TaMCA4可以增强由坏死诱导因子Bax引起的坏死反应第23-28页
        2.2.3 瞬时表达TaMCA4可以增强由条锈菌效应蛋白引起的坏死反应第28页
        2.2.4 TaMCA4基因在小麦与条锈菌互作过程中的表达谱第28-29页
        2.2.5 TaMCA4沉默植株抗条锈菌感病性增强第29-33页
    2.3 讨论第33-35页
第三章 小麦囊泡转运相关SNARE基因的克隆与功能研究第35-58页
    3.1 实验材料与方法第35-40页
        3.1.1 cDNA序列的克隆第35页
        3.1.2 序列分析第35-37页
        3.1.3 酵母双杂交第37页
        3.1.4 双分子荧光互补第37页
        3.1.5 小麦条锈菌接种与实时荧光定量qRT-PCR第37-38页
        3.1.6 病毒介导的基因沉默第38页
        3.1.7 条锈菌侵染及植物防卫反应的组织学观察第38-39页
        3.1.8 TaNPSN11的原核表达、抗体制备及Westernblot第39-40页
        3.1.9 TaNPSN11的免疫胶体金定位第40页
    3.2 结果与分析第40-56页
        3.2.1 小麦TaNPSNs及植物抗病相关SNARE基因的克隆第40-43页
        3.2.2 TaNPSN11与TaSYP132蛋白互作第43-45页
        3.2.3 TaNPSNs与TaSYP132基因在小麦与条锈菌互作过程中的表达谱第45-46页
        3.2.4 TaNPSN11、TaNPSN13及TaSYP132基因沉默植株的抗条锈菌抗病性减弱第46-52页
        3.2.5 TaNPSN11的免疫胶体金定位第52-56页
    3.3 讨论第56-58页
全文总结第58-59页
参考文献第59-65页
附录第65-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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