| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 绪论 | 第14-20页 |
| 第一部分 N2a细胞氧糖模型的建立 | 第20-36页 |
| 引言 | 第20页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1.1 细胞株 | 第20页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第20-22页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 1.2.1 N2a细胞培养 | 第22-23页 |
| 1.2.2 OGD细胞模型的建立 | 第23-24页 |
| 1.2.3 CCK8检测OGD后各组细胞活力 | 第24页 |
| 1.2.4 Western blot检测OGD后自噬相关蛋白的表达 | 第24-28页 |
| 1.2.5 酸性磷酸酶活性的检测 | 第28-29页 |
| 1.2.6 统计学处理 | 第29-30页 |
| 1.3 实验结果 | 第30-34页 |
| 1.3.1 OGD后N2a的细胞形态变化 | 第30页 |
| 1.3.2 OGD处理减弱N2a细胞活力 | 第30-31页 |
| 1.3.3 OGD增加N2a细胞自噬相关蛋白表达 | 第31-33页 |
| 1.3.4 OGD增加了N2a细胞酸性磷酸酶活性 | 第33-34页 |
| 1.4 实验结论 | 第34-36页 |
| 第二部分 OGD中3-MA对N2a细胞自噬及活性的影响 | 第36-46页 |
| 引言 | 第36页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第36页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第36-38页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 2.2.1 N2a细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.2 3-MA储存于的配制及用法 | 第39页 |
| 2.2.3 Western blot检测 3-MA处理后N2a细胞的自噬相关蛋白表达 | 第39-40页 |
| 2.2.4 酸性磷酸酶活性的检测 | 第40页 |
| 2.2.5 CCK8检测OGD后各组细胞活力 | 第40-41页 |
| 2.2.6 统计学处理 | 第41页 |
| 2.3 实验结果 | 第41-44页 |
| 2.3.1 3-MA对自噬相关蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.2 3-MA降低N2a细胞酸性磷酸酶活性 | 第42-43页 |
| 2.3.3 3-MA降低N2a细胞活力 | 第43-44页 |
| 2.4 实验结论 | 第44-46页 |
| 第三部分 Beclin 1基因沉默对OGD中N2a细胞自噬及活性的影响 | 第46-73页 |
| 引言 | 第46-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 3.1.1 质粒、菌种和细胞株 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第47-49页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-62页 |
| 3.2.1 sh RNA序列设计 | 第49-51页 |
| 3.2.2 构建表达sh RNA的质粒载体 | 第51-55页 |
| 3.2.3 293FT细胞培养 | 第55-56页 |
| 3.2.4 重组质粒转染 293FT细胞 | 第56页 |
| 3.2.5 慢病毒感染N2a细胞 | 第56-57页 |
| 3.2.6 q RT-PCR检测Beclin 1 m RNA表达水平 | 第57-60页 |
| 3.2.7 western检测蛋白的表达水平 | 第60页 |
| 3.2.8 Beclin 1 干扰后对N2a细胞酸性磷酸酶活性的作用 | 第60-61页 |
| 3.2.9 Beclin 1 干扰后对N2a细胞活力的影响 | 第61-62页 |
| 3.2.10 统计学处理 | 第62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-69页 |
| 3.3.1 sh RNA质粒构建成功 | 第62-63页 |
| 3.3.2 慢病毒成功感染N2a细胞 | 第63-64页 |
| 3.3.3 Beclin 1 sh RNA抑制N2a细胞中Beclin 1 m RNA表达 | 第64-65页 |
| 3.3.4 Beclin 1 sh RNA抑制N2a细胞中Beclin 1 蛋白表达 | 第65-66页 |
| 3.3.5 Beclin 1 干扰后对自噬相关蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.6 Beclin 1 干扰后增加了N2a细胞酸性磷酸酶活性 | 第67-68页 |
| 3.3.7 Beclin 1 干扰后对N2a细胞自噬活性的影响 | 第68-69页 |
| 3.4 实验结论 | 第69-73页 |
| 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第79页 |
