摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
1 引言 | 第9-18页 |
1.1 早孕因子的介绍 | 第9-15页 |
1.1.1 早孕因子的来源 | 第9-10页 |
1.1.2 早孕因子的生物学特性 | 第10-11页 |
1.1.3 早孕因子的生物学作用 | 第11页 |
1.1.4 早孕因子的分离纯化 | 第11-12页 |
1.1.5 早孕因子的临床应用 | 第12-13页 |
1.1.6 检测早孕因子方法的介绍 | 第13-15页 |
1.2 单克隆抗体技术介绍 | 第15-16页 |
1.2.1 单克隆抗体概念 | 第15页 |
1.2.2 制备单克隆抗体的基本原理 | 第15-16页 |
1.2.3 单克隆抗体和多克隆抗体性质的比较 | 第16页 |
1.3 本课题的目的和意义 | 第16-18页 |
2 绵羊早孕因子蛋白的纯化 | 第18-26页 |
2.1 试验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 主要仪器与设备 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-22页 |
2.2.1 工程菌的活化 | 第19页 |
2.2.2 IPTG诱导剂表达时间的优化 | 第19-21页 |
2.2.3 IPTG诱导剂浓度的优化 | 第21页 |
2.2.4 蛋白纯化 | 第21-22页 |
2.3 结果与分析 | 第22-24页 |
2.3.1 诱导时间的优化 | 第22页 |
2.3.2 诱导浓度的优化 | 第22-23页 |
2.3.3 重组蛋白的纯化 | 第23-24页 |
2.4 讨论 | 第24-26页 |
3 绵羊早孕因子单克隆抗体的制备及鉴定 | 第26-38页 |
3.1 试验材料 | 第26-27页 |
3.1.1 主要仪器和设备 | 第26页 |
3.1.2 实验动物与主要试剂 | 第26页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第26-27页 |
3.2 试验方法 | 第27-33页 |
3.2.1 免疫动物 | 第27页 |
3.2.2 抗原乳化剂制备 | 第27页 |
3.2.3 免疫方法 | 第27页 |
3.2.4 检测小鼠血清效价(间接ELISA方法) | 第27-28页 |
3.2.5 建立杂交瘤细胞株 | 第28-30页 |
3.2.6 筛选杂交瘤细胞 | 第30页 |
3.2.7 杂交瘤细胞亚克隆与冻存 | 第30-31页 |
3.2.8 杂交瘤细胞的冻存 | 第31页 |
3.2.9 单克隆抗体的制备 | 第31页 |
3.2.10 单克隆抗体的纯化 | 第31-32页 |
3.2.11 杂交瘤细胞及单克隆抗体的鉴定 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-36页 |
3.3.1 小鼠三免后效价检测结果 | 第33-34页 |
3.3.2 杂交瘤细胞系的建立 | 第34-35页 |
3.3.3 腹水型单克隆抗体的效价 | 第35页 |
3.3.4 杂交瘤细胞染色体及单克隆抗体亚类鉴定 | 第35页 |
3.3.5 单克隆抗体的纯化 | 第35-36页 |
3.3.6 单克隆抗体特异性检测 | 第36页 |
3.4 讨论 | 第36-38页 |
3.4.1 关于动物选择 | 第37页 |
3.4.2 关于动物免疫 | 第37页 |
3.4.3 关于细胞融合 | 第37页 |
3.4.4 关于杂交瘤细胞的筛选和克隆 | 第37-38页 |
3.4.5 ELISA方法包被原的选择 | 第38页 |
3.4.6 关于单克隆抗体特异性 | 第38页 |
展望 | 第38-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
在读期间发表的学术论文 | 第44-45页 |
作者简历 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |