摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第一部分 水稻基因编辑技术体系建立及深海细菌醛脱氢酶的水稻转化研究 | 第14-51页 |
1 前言 | 第14-31页 |
1.1 基因编辑技术研究进展 | 第14-18页 |
1.1.1 CRISPR/Cas系统的发现与结构组成 | 第15-16页 |
1.1.2 CRISPR/Cas9的作用机理 | 第16-17页 |
1.1.3 CRISPR/Cas9的遗传工程改造及应用 | 第17-18页 |
1.2 独脚金内酯途径及其调控基因D27(dwarf-27) | 第18-20页 |
1.3 醛脱氢酶的研究进展 | 第20-25页 |
1.3.1 水稻中的醛脱氢酶 | 第21-24页 |
1.3.2 细菌Halomonas axialensis ACH-L-8 来源的醛脱氢酶 | 第24-25页 |
1.4 根癌农杆菌介导的植物转基因 | 第25-30页 |
1.4.1 根癌农杆菌的生物学特性 | 第26页 |
1.4.2 根癌农杆菌Ti质粒的结构和功能 | 第26-27页 |
1.4.3 根癌农杆菌侵染植物细胞的分子机理 | 第27-29页 |
1.4.4 根癌农杆菌Ti质粒的改造和载体构建 | 第29页 |
1.4.5 根癌农杆菌介导的转基因方法在植物中的应用 | 第29-30页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-46页 |
2.1 实验材料 | 第31-36页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第31-32页 |
2.1.2 转化受体材料 | 第32页 |
2.1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
2.1.4 常用培养基 | 第33-34页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第34-35页 |
2.1.6 数据库和主要分析软件 | 第35-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-46页 |
2.2.1 CRISPR载体构建及转化 | 第36-39页 |
2.2.2 ALDH转基因载体的构建及转化 | 第39-41页 |
2.2.3 农杆菌介导水稻的转化 | 第41-43页 |
2.2.4 转基因植株的验证 | 第43-46页 |
3 结果与分析 | 第46-50页 |
3.1 T_0代转基因植株的分子检测 | 第46页 |
3.2 CRISPR转基因植株靶位点的突变检测 | 第46页 |
3.3 D27基因编辑植株的表型分析 | 第46-47页 |
3.4 D27基因的荧光相对定量表达分析 | 第47-48页 |
3.5 ALDH转基因植株的GUS组织染色 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
第二部分 深海海水间苯二甲酸二甲酯降解菌的多样性分析 | 第51-64页 |
1 前言 | 第51-57页 |
1.1 邻苯二甲酸酯简介 | 第51-52页 |
1.2 邻苯二甲酸酯的毒性及危害 | 第52-53页 |
1.3 邻苯二甲酸酯的污染现状 | 第53-55页 |
1.4 邻苯二甲酸酯的降解现象及其研究进展 | 第55-56页 |
1.4.1 邻苯二甲酸酯的非生物降解 | 第55页 |
1.4.2 邻苯二甲酸酯的生物降解 | 第55-56页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第56-57页 |
2 材料与方法 | 第57-60页 |
2.1 实验材料 | 第57-58页 |
2.1.1 深海海水样品的采集与前处理 | 第57页 |
2.1.2 主要试剂 | 第57页 |
2.1.3 常用培养基 | 第57页 |
2.1.4 主要仪器设备及主要分析软件 | 第57-58页 |
2.2 实验方法 | 第58-60页 |
2.2.1 细菌宏基因组DNA的提取 | 第58页 |
2.2.2 深海原位DMP、DMI降解菌的分离与鉴定 | 第58页 |
2.2.3 细菌基因组DNA的提取 | 第58页 |
2.2.4 DMI降解菌的鉴定 | 第58-60页 |
3 结果与分析 | 第60-63页 |
3.1 未培养DMI降解菌多样性分析 | 第60-61页 |
3.2 实验室培养DMI降解菌的多样性分析 | 第61页 |
3.3 未培养与实验室培养DMI降解菌多样性对比 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-81页 |
硕士期间发表的论文 | 第81-82页 |
附录 | 第82-85页 |
致谢 | 第85页 |