摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 猪繁殖与呼吸障碍综合征研究进展 | 第11-20页 |
1.1 PRRS的发病机制及病理变化 | 第11-12页 |
1.2 PRRSV基因组结构 | 第12-13页 |
1.3 PRRSV基因组编码的N和NSP9蛋白及其功能 | 第13-15页 |
1.3.1 PRRSV N蛋白及其功能 | 第14页 |
1.3.2 PRRSV非结构蛋白Nsp9及其功能 | 第14-15页 |
1.4 PRRSV诊断方法的研究进展 | 第15-18页 |
1.4.1 临床诊断 | 第15-16页 |
1.4.2 病毒分离 | 第16页 |
1.4.3 病原检测 | 第16页 |
1.4.4 分子生物学诊断技术 | 第16-17页 |
1.4.5 血清学诊断技术 | 第17-18页 |
1.4.6 结语 | 第18页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 PRRSV的N和NSP9蛋白的原核诱导表达与纯化 | 第20-28页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 质粒和菌种 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂及配制 | 第20-22页 |
2.1.3 主要仪器与耗材 | 第22页 |
2.2 试验方法 | 第22-26页 |
2.2.1 PRRSV核衣壳蛋白N的原核诱导表达和纯化 | 第22-24页 |
2.2.2 PRRSV非结构蛋白Nsp9的原核诱导表达和纯化 | 第24页 |
2.2.3 表达蛋白的SDS-PAGE检测 | 第24-25页 |
2.2.4 表达蛋白的Western blot鉴定 | 第25页 |
2.2.5 纯化蛋白的BCA法浓度测定 | 第25-26页 |
2.3 实验结果 | 第26页 |
2.3.1 重组蛋白的SDS-PAGE分析和Western blot鉴定结果 | 第26页 |
2.3.2 纯化蛋白的浓度 | 第26页 |
2.4 讨论与分析 | 第26-28页 |
第三章 检测PRRSV抗体的间接ELISA方法的建立及应用 | 第28-38页 |
3.1 材料 | 第28-29页 |
3.1.1 血清与抗体 | 第28页 |
3.1.2 试剂及其配制 | 第28-29页 |
3.1.3 主要仪器与耗材 | 第29页 |
3.2 试验方法 | 第29-31页 |
3.2.1 间接ELISA方法基本操作步骤 | 第29-30页 |
3.2.2 间接ELISA反应条件的优化 | 第30页 |
3.2.3 两种间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第30页 |
3.2.4 建立两种间接ELISA与Western blot、IDEXX PRRSV的符合率比较 | 第30-31页 |
3.2.5 两种间接ELISA方法的初步应用 | 第31页 |
3.3 实验结果 | 第31-36页 |
3.3.1 两种间接ELISA方法条件的优化结果 | 第31-34页 |
3.3.2 间接ELISA方法的阴阳性临界值的确定 | 第34页 |
3.3.3 建立两种间接ELISA与Western blot、IDEXX ELISA的符合率 | 第34页 |
3.3.4 建立的两种间接ELISA方法的初步应用结果 | 第34-36页 |
3.4 讨论和分析 | 第36-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |