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检测PRRSV抗体的两种间接ELISA方法的建立和应用

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 猪繁殖与呼吸障碍综合征研究进展第11-20页
    1.1 PRRS的发病机制及病理变化第11-12页
    1.2 PRRSV基因组结构第12-13页
    1.3 PRRSV基因组编码的N和NSP9蛋白及其功能第13-15页
        1.3.1 PRRSV N蛋白及其功能第14页
        1.3.2 PRRSV非结构蛋白Nsp9及其功能第14-15页
    1.4 PRRSV诊断方法的研究进展第15-18页
        1.4.1 临床诊断第15-16页
        1.4.2 病毒分离第16页
        1.4.3 病原检测第16页
        1.4.4 分子生物学诊断技术第16-17页
        1.4.5 血清学诊断技术第17-18页
        1.4.6 结语第18页
    1.5 本研究的目的与意义第18-20页
第二章 PRRSV的N和NSP9蛋白的原核诱导表达与纯化第20-28页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 质粒和菌种第20页
        2.1.2 主要试剂及配制第20-22页
        2.1.3 主要仪器与耗材第22页
    2.2 试验方法第22-26页
        2.2.1 PRRSV核衣壳蛋白N的原核诱导表达和纯化第22-24页
        2.2.2 PRRSV非结构蛋白Nsp9的原核诱导表达和纯化第24页
        2.2.3 表达蛋白的SDS-PAGE检测第24-25页
        2.2.4 表达蛋白的Western blot鉴定第25页
        2.2.5 纯化蛋白的BCA法浓度测定第25-26页
    2.3 实验结果第26页
        2.3.1 重组蛋白的SDS-PAGE分析和Western blot鉴定结果第26页
        2.3.2 纯化蛋白的浓度第26页
    2.4 讨论与分析第26-28页
第三章 检测PRRSV抗体的间接ELISA方法的建立及应用第28-38页
    3.1 材料第28-29页
        3.1.1 血清与抗体第28页
        3.1.2 试剂及其配制第28-29页
        3.1.3 主要仪器与耗材第29页
    3.2 试验方法第29-31页
        3.2.1 间接ELISA方法基本操作步骤第29-30页
        3.2.2 间接ELISA反应条件的优化第30页
        3.2.3 两种间接ELISA方法阴阳性临界值的确定第30页
        3.2.4 建立两种间接ELISA与Western blot、IDEXX PRRSV的符合率比较第30-31页
        3.2.5 两种间接ELISA方法的初步应用第31页
    3.3 实验结果第31-36页
        3.3.1 两种间接ELISA方法条件的优化结果第31-34页
        3.3.2 间接ELISA方法的阴阳性临界值的确定第34页
        3.3.3 建立两种间接ELISA与Western blot、IDEXX ELISA的符合率第34页
        3.3.4 建立的两种间接ELISA方法的初步应用结果第34-36页
    3.4 讨论和分析第36-38页
结论第38-39页
参考文献第39-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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