致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-19页 |
1.1 抗病毒固有免疫反应中感受器和信号通路概述 | 第8-12页 |
1.1.1 TLRs | 第8-9页 |
1.1.2 胞质RNA感受器 | 第9页 |
1.1.3 胞质DNA感受器 | 第9-10页 |
1.1.4 TBK1 | 第10页 |
1.1.5 IRFs | 第10-12页 |
1.2 三基序结合蛋白(TRIM)家族 | 第12-16页 |
1.2.1 TRIM蛋白家族的结构与功能 | 第12-13页 |
1.2.2 TRIM蛋白家族参与固有免疫及在病毒感染中的调节作用 | 第13-15页 |
1.2.3 TRIM11 | 第15-16页 |
1.3 猪伪狂犬病毒(PRV) | 第16-17页 |
1.4 展望 | 第17-19页 |
2 引言 | 第19-20页 |
3 材料方法 | 第20-28页 |
3.1 试验材料 | 第20页 |
3.2 主要试剂 | 第20页 |
3.3 主要仪器 | 第20页 |
3.4 主要溶液及其配制 | 第20-21页 |
3.5 猪TRIM11基因的生物信息学分析、克隆与真核表达载体构建 | 第21-24页 |
3.5.1 猪TRIM11基因序列和系统进化分析 | 第21页 |
3.5.2 猪TRIM11基因的组织分布 | 第21-22页 |
3.5.3 猪TRIM11基因的克隆 | 第22页 |
3.5.4 PB-TRIM11表达载体构建 | 第22-24页 |
3.6 PB-TRIM11稳定转染PK15细胞系的构建 | 第24-25页 |
3.7 TRIM11在PRV增殖中的生物学活性研究 | 第25-26页 |
3.7.1 猪伪狂犬病毒(PRV strain Bartha K16)的扩大培养 | 第25页 |
3.7.2 所制病毒TCID50测定 | 第25页 |
3.7.3 过表达TRIM11对PRV增殖的影响 | 第25页 |
3.7.4 病毒感染后TRIM11转录水平的变化 | 第25-26页 |
3.7.5 过表达TRIM11在PRV增殖中对IFN-β 的影响 | 第26页 |
3.8 数据处理 | 第26-28页 |
4 结果与分析 | 第28-36页 |
4.1 猪TRIM11基因的生物信息学分析 | 第28-30页 |
4.1.1 猪TRIM11基因的序列分析及蛋白质二级结构域模式 | 第28-29页 |
4.1.2 猪TRIM11基因在不同物种间的系统进化分析 | 第29-30页 |
4.2 荧光定量PCR分析猪TRIM11基因的组织特异性 | 第30页 |
4.3 猪TRIM11基因的克隆 | 第30-31页 |
4.4 真核表达载体PB-TRIM11的构建 | 第31-32页 |
4.5 猪TRIM11在PK15细胞中的表达 | 第32-33页 |
4.5.1 PB-TRIM11转染PK15的荧光显微镜观察 | 第32页 |
4.5.2 猪TRIM11基因过表达 | 第32-33页 |
4.6 猪TRIM11生物学作用初步研究 | 第33-36页 |
4.6.1 PRV的培养及TCID50测定 | 第33-34页 |
4.6.2 过表达猪TRIM11对PRV病毒增殖的影响 | 第34-35页 |
4.6.3 PRV感染后PK15细胞中TRIM11转录水平下降 | 第35页 |
4.6.4 TRIM11过表达促进PRV诱导的IFN-β 的激活 | 第35-36页 |
5 结论与讨论 | 第36-39页 |
5.1 讨论 | 第36-38页 |
5.1.1 猪TRIM11基因克隆与组织分布 | 第36-37页 |
5.1.2 真核表达载体PB-TRIM11的构建及稳定转染PK15细胞 | 第37页 |
5.1.3 过表达猪TRIM11对PRV病毒增殖的影响 | 第37-38页 |
5.2 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-47页 |
英文摘要 | 第47-48页 |