| 摘要 | 第5-8页 |
| abstract | 第8-11页 |
| 缩写及中英文对照 | 第14-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-22页 |
| 第一章 果蝇卵巢生殖干细胞及热休克蛋白HSP83研究进展 | 第15-22页 |
| 1 经典模式生物——果蝇 | 第15-18页 |
| 1.1 果蝇简介 | 第15-16页 |
| 1.2 果蝇卵巢的基本结构 | 第16-18页 |
| 2 果蝇热休克蛋白Hsp83研究概况 | 第18页 |
| 3 果蝇卵巢生殖干细胞命运调控的信号通路 | 第18-22页 |
| 3.1 BMP信号通路 | 第18-19页 |
| 3.2 Jak/Stat信号通路 | 第19-20页 |
| 3.3 microRNAs（miRNAs）信号通路 | 第20-21页 |
| 3.4 其他信号通路 | 第21-22页 |
| 第二部分 研究论文 | 第22-60页 |
| 第二章 HSP83基因调控果蝇卵巢生殖干细胞命运的研究 | 第22-60页 |
| 1 实验材料 | 第22-26页 |
| 1.1 果蝇品系 | 第22-23页 |
| 1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 1.3 实验试剂 | 第23-26页 |
| 1.4 质粒载体 | 第26页 |
| 1.5 引物 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-39页 |
| 2.1 果蝇饲养与保种 | 第26-28页 |
| 2.2 果蝇免疫组织化学技术 | 第28页 |
| 2.3 果蝇基因组DNA提取技术 | 第28-29页 |
| 2.4 载体构建技术 | 第29-32页 |
| 2.5 镶嵌体分析技术 | 第32-33页 |
| 2.6 转基因果蝇品系构建 | 第33-34页 |
| 2.7 果蝇卵巢总RNA提取与反转录技术 | 第34-35页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR技术 | 第35-36页 |
| 2.9 果蝇卵巢总蛋白提取技术 | 第36页 |
| 2.10 蛋白质免疫印迹技术 | 第36-38页 |
| 2.11 多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| 2.12 细胞凋亡检测技术 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3.1 不育系果蝇筛选 | 第39-40页 |
| 3.2 hsp83基因突变及表达下调影响果蝇卵巢生殖干细胞的数量 | 第40-45页 |
| 3.2.1 hsp83基因缺失导致果蝇卵巢生殖干细胞的丢失 | 第40-42页 |
| 3.2.2 hsp83基因内源性缺失导致生殖干细胞的丢失 | 第42-43页 |
| 3.2.3 hsp83基因表达敲低导致卵巢生殖干细胞的缺失 | 第43-45页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR检测卵巢hsp83基因的表达 | 第45页 |
| 3.4 Hsp83多克隆抗体的制备与hsp83基因表达检测 | 第45-48页 |
| 3.4.1 Hsp83多克隆抗体的制备与鉴定 | 第45-47页 |
| 3.4.2 免疫组织化学检测hsp83基因的表达 | 第47-48页 |
| 3.4.3 蛋白质免疫印迹检测hsp83基因的表达 | 第48页 |
| 3.5 hsp83转基因果蝇品系的构建 | 第48-50页 |
| 3.5.1 转基因载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.5.2 质粒提取以及转基因显微注射 | 第49页 |
| 3.5.3 转基因果蝇的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.6 果蝇hsp83基因突变品系的挽救试验 | 第50-52页 |
| 3.7 hsp83基因突变的细胞凋亡检测 | 第52-53页 |
| 3.8 hsp83与bam遗传相互作用研究 | 第53-56页 |
| 3.9 hsp83与Dad遗传相互作用研究 | 第56页 |
| 3.10 hsp83基因过表达分析 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 4.1 hsp83基因调控果蝇生殖干细胞维持的内外源性分析 | 第58-59页 |
| 4.2 hsp83基因过表达未能明显延滞生殖干细胞的分化 | 第59页 |
| 4.3 hsp83与bam&Dad基因的上下游关系 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 硕士期间发表论文及获奖情况 | 第73页 |
