摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1. 前言 | 第10-22页 |
1.1 先天性免疫 | 第10-13页 |
1.1.1 昆虫的体液免疫 | 第11-12页 |
1.1.2 昆虫的细胞免疫 | 第12-13页 |
1.2 包囊作用 | 第13-15页 |
1.2.1 入侵物的识别 | 第13页 |
1.2.2 包囊的形成 | 第13-14页 |
1.2.3 包囊相关因子 | 第14-15页 |
1.3 Integrin的概述 | 第15-19页 |
1.3.1 Integrin的种类 | 第15-16页 |
1.3.2 Integrin的结构 | 第16-17页 |
1.3.3 Integrin的功能及相关信号通路 | 第17-19页 |
1.4 昆虫Integrin的研究进展 | 第19-20页 |
1.5 本研究的背景及意义 | 第20-22页 |
2. 实验材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 实验动物、菌株及载体 | 第22页 |
2.1.2 实验仪器与设备 | 第22-23页 |
2.1.3 实验试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
2.1.4 常用的试剂及培养基 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-38页 |
2.2.1 Haβ-integrin基因全长、胞内、胞外部分序列分析 | 第25页 |
2.2.2 棉铃虫各组织RNA的提取 | 第25-26页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第26页 |
2.2.4 cDNA的检测 | 第26-27页 |
2.2.5 Haβ-integrin的原核重组表达与纯化 | 第27-31页 |
2.2.6 抗体的制备 | 第31页 |
2.2.7 荧光定量分析Haβ-integrin基因的表达模式 | 第31-32页 |
2.2.8 Haβ-integrin RNAi | 第32-34页 |
2.2.9 敲降Haβ-integrin后体内包囊率的统计 | 第34页 |
2.2.10 敲降Haβ-integrin后体外包囊率的统计 | 第34页 |
2.2.11 Western-blot检测蛋白表达情况 | 第34-36页 |
2.2.12 Haβ-integrin蛋白定位分析 | 第36页 |
2.2.13 重组蛋白rHaCTL3与血细胞表面的结合 | 第36-37页 |
2.2.14 Co-IP检测蛋白之间的互作情况 | 第37-38页 |
3. 结果与分析 | 第38-50页 |
3.1 棉铃虫Haβ-integrin基因的序列分析 | 第38-39页 |
3.2 Haβ-integrin基因的原核表达和蛋白纯化 | 第39-41页 |
3.2.1 重组质粒pET-32a-Haβ-integrin F_1R_1、F_1R_2和F_2R_1的构建 | 第39页 |
3.2.2 重组蛋白rHaβ-integrin的表达与纯化 | 第39-41页 |
3.3 Haβ-integrin在血细胞中高表达及其在血细胞膜上的定位 | 第41-42页 |
3.4 Haβ-integrin在不同发育阶段表达分析 | 第42-43页 |
3.5 注射Beads对Haβ-integrin表达的影响 | 第43-44页 |
3.6 RNAi敲降Haβ-integrin效果检测 | 第44-46页 |
3.7 敲降Haβ-integrin后抑制了血细胞包囊能力 | 第46-47页 |
3.8 rHaCTL3与血细胞表面结合 | 第47页 |
3.9 Co-IP证实Haβ-integrin与HaCTL3相互作用 | 第47-48页 |
3.10 敲降Haβ-integrin抑制HaCTI3的促包囊作用 | 第48-50页 |
4. 讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |