| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 四跨膜蛋白超家族 | 第14页 |
| 1.2 四跨膜蛋白CD9结构及分布 | 第14-16页 |
| 1.3 四跨膜蛋白CD9与受精关系 | 第16-17页 |
| 1.4 四跨膜蛋白家族与Izumo | 第17-18页 |
| 1.5 绵羊卵母细胞超低温冷冻保存研究 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究目的意义 | 第19-20页 |
| 1.7 试验主要内容与技术路线 | 第20-22页 |
| 2 超低温冷冻对绵羊体外成熟卵母细胞的形态学和成熟影响 | 第22-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 组织样品 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.2.2 卵母细胞的采集和体外成熟培养(IVM) | 第23页 |
| 2.2.3 卵母细胞成熟鉴定 | 第23页 |
| 2.2.4 卵母细胞的冷冻保存 | 第23页 |
| 2.2.5 卵母细胞的解冻2.1.2主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.3 统计分析 | 第24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-25页 |
| 2.5 讨论 | 第25-27页 |
| 3 CD9在绵羊卵巢组织中的定位表达 | 第27-31页 |
| 3.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 组织样品 | 第27页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 3.2 方法 | 第28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-29页 |
| 3.4 讨论 | 第29-31页 |
| 4 冷冻对卵母细胞CD9的影响 | 第31-42页 |
| 4.1 试剂材料 | 第31-32页 |
| 4.1.1 细胞收集 | 第31页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 4.2 方法 | 第32-35页 |
| 4.2.1 卵母细胞总RNA的提取 | 第32页 |
| 4.2.2 总RNA反转录合成cDNA | 第32-33页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 4.2.4 卵母细胞CD9免疫荧光染色 | 第34页 |
| 4.2.5 提取卵母细胞CD9蛋白 | 第34页 |
| 4.2.6 卵母细胞CD9蛋白Western blot检测 | 第34-35页 |
| 4.3 统计分析 | 第35页 |
| 4.4 结果与分析 | 第35-39页 |
| 4.4.1 总RNA质检及Q-PCR检测 | 第35-36页 |
| 4.4.2 实时荧光定量PCR结果 | 第36-37页 |
| 4.4.3 免疫印迹结果 | 第37-38页 |
| 4.4.4 CD9蛋白免疫荧光染色结果 | 第38-39页 |
| 4.5 讨论 | 第39-42页 |
| 5 冷冻对精卵结合的影响 | 第42-46页 |
| 5.1 试验材料 | 第42-43页 |
| 5.1.1 组织样品 | 第42页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 5.1.3 主要设备 | 第42页 |
| 5.1.4 主要试剂的配制 | 第42-43页 |
| 5.2 方法 | 第43页 |
| 5.2.1 卵母细胞的采集及成熟 | 第43页 |
| 5.2.2 体外受精 | 第43页 |
| 5.2.3 检测粘附率 | 第43页 |
| 5.2.4 检测穿透率 | 第43页 |
| 5.3 统计分析 | 第43-44页 |
| 5.4 结果与分析 | 第44页 |
| 5.5 讨论 | 第44-46页 |
| 6 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
