摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
符号与缩略语 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-30页 |
第一章 硒和硒蛋白S的研究进展 | 第12-22页 |
1 硒和硒蛋白的概述 | 第12-15页 |
1.1 硒元素 | 第12-13页 |
1.2 硒蛋白 | 第13页 |
1.3 硒代半胱氨酸插入元件 | 第13-15页 |
1.4 硒蛋白表达的低效性 | 第15页 |
2 硒蛋白S的概述 | 第15-17页 |
2.1 硒蛋白S的简介 | 第15-16页 |
2.2 硒蛋白S的生物学功能 | 第16-17页 |
参考文献 | 第17-22页 |
第二章 赭曲霉毒素A的研究进展 | 第22-30页 |
1 赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的概述 | 第22-24页 |
1.1 OTA的理化性质 | 第22-23页 |
1.2 OTA的合成 | 第23页 |
1.3 OTA在动物体内的代谢 | 第23-24页 |
2 OTA的毒性作用 | 第24-26页 |
2.1 OTA的肾毒性和肝毒性 | 第24页 |
2.2 OTA的免疫毒害作用 | 第24-25页 |
2.3 OTA的其它破坏作用 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-30页 |
第二篇 试验研究 | 第30-62页 |
第三章 重组质粒pcDNA3.1-SelS的构建与鉴定 | 第30-44页 |
1 材料与方法 | 第30-35页 |
1.1 主要试剂与仪器 | 第30-31页 |
1.2 猪肾总RNA的提取和cDNA的合成 | 第31页 |
1.3 引物设计合成和目的基因SelS合成 | 第31-32页 |
1.4 连接T载体和阳性克隆筛选与鉴定 | 第32-33页 |
1.5 重组基因pcDNA3.1-SelS的构建和鉴定 | 第33-35页 |
2 结果 | 第35-40页 |
2.1 猪SelS的SECIS序列 | 第35-36页 |
2.2 猪肾组织中扩增SelS基因条带 | 第36页 |
2.3 pcDNA3.1-SelS重组子的鉴定 | 第36-38页 |
2.4 pcDNA3.1-SelS测序结果 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
第四章 重组子pcDNA3.1-SelS的稳定转染及表达水平检测 | 第44-54页 |
1 材料与方法 | 第44-48页 |
1.1 主要试剂与仪器 | 第44-45页 |
1.2 猪肾细胞培养与传代 | 第45页 |
1.3 pcDNA3.1-SelS和pcDNA3.1质粒DNA的大量抽提 | 第45页 |
1.4 重组子pcDNA3.1-SelS细胞稳定转染 | 第45-46页 |
1.5 荧光定量PCR (RT-PCR)法检测转染后SelS基因的转录水平 | 第46页 |
1.6 Western Blotting检测转染后SelS蛋白的表达 | 第46-47页 |
1.7 MTT法测细胞增殖性 | 第47页 |
1.8 细胞内MDA、SOD和GSH的测定 | 第47-48页 |
2 结果 | 第48-52页 |
2.1 RT-PCR法检测SelS mRNA表达水平 | 第48-49页 |
2.2 Western Blotting检测转染后SelS蛋白的表达 | 第49-50页 |
2.3 细胞增殖性的测定结果 | 第50页 |
2.4 细胞内MDA、SOD和GSH的检测结果 | 第50-52页 |
3 讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-54页 |
第五章 过表达SelS保护PK15细胞拮抗OTA的细胞损伤 | 第54-62页 |
1 材料与方法 | 第54-56页 |
1.1 主要试剂与仪器 | 第54-55页 |
1.2 细胞培养与传代 | 第55页 |
1.3 MTT检测细胞毒力 | 第55页 |
1.4 细胞内MDA、SOD和GSH的测定 | 第55-56页 |
2 结果 | 第56-59页 |
2.1 MTT检测细胞毒力结果 | 第56-57页 |
2.2 细胞内MDA、SOD和GSH测定结果 | 第57-59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
全文结论 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |