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猪肾细胞过表达SelS细胞系的构建及其对OTA毒性的拮抗作用

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
符号与缩略语第10-11页
前言第11-12页
第一篇 文献综述第12-30页
    第一章 硒和硒蛋白S的研究进展第12-22页
        1 硒和硒蛋白的概述第12-15页
            1.1 硒元素第12-13页
            1.2 硒蛋白第13页
            1.3 硒代半胱氨酸插入元件第13-15页
            1.4 硒蛋白表达的低效性第15页
        2 硒蛋白S的概述第15-17页
            2.1 硒蛋白S的简介第15-16页
            2.2 硒蛋白S的生物学功能第16-17页
        参考文献第17-22页
    第二章 赭曲霉毒素A的研究进展第22-30页
        1 赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的概述第22-24页
            1.1 OTA的理化性质第22-23页
            1.2 OTA的合成第23页
            1.3 OTA在动物体内的代谢第23-24页
        2 OTA的毒性作用第24-26页
            2.1 OTA的肾毒性和肝毒性第24页
            2.2 OTA的免疫毒害作用第24-25页
            2.3 OTA的其它破坏作用第25-26页
        参考文献第26-30页
第二篇 试验研究第30-62页
    第三章 重组质粒pcDNA3.1-SelS的构建与鉴定第30-44页
        1 材料与方法第30-35页
            1.1 主要试剂与仪器第30-31页
            1.2 猪肾总RNA的提取和cDNA的合成第31页
            1.3 引物设计合成和目的基因SelS合成第31-32页
            1.4 连接T载体和阳性克隆筛选与鉴定第32-33页
            1.5 重组基因pcDNA3.1-SelS的构建和鉴定第33-35页
        2 结果第35-40页
            2.1 猪SelS的SECIS序列第35-36页
            2.2 猪肾组织中扩增SelS基因条带第36页
            2.3 pcDNA3.1-SelS重组子的鉴定第36-38页
            2.4 pcDNA3.1-SelS测序结果第38-40页
        3 讨论第40-41页
        参考文献第41-44页
    第四章 重组子pcDNA3.1-SelS的稳定转染及表达水平检测第44-54页
        1 材料与方法第44-48页
            1.1 主要试剂与仪器第44-45页
            1.2 猪肾细胞培养与传代第45页
            1.3 pcDNA3.1-SelS和pcDNA3.1质粒DNA的大量抽提第45页
            1.4 重组子pcDNA3.1-SelS细胞稳定转染第45-46页
            1.5 荧光定量PCR (RT-PCR)法检测转染后SelS基因的转录水平第46页
            1.6 Western Blotting检测转染后SelS蛋白的表达第46-47页
            1.7 MTT法测细胞增殖性第47页
            1.8 细胞内MDA、SOD和GSH的测定第47-48页
        2 结果第48-52页
            2.1 RT-PCR法检测SelS mRNA表达水平第48-49页
            2.2 Western Blotting检测转染后SelS蛋白的表达第49-50页
            2.3 细胞增殖性的测定结果第50页
            2.4 细胞内MDA、SOD和GSH的检测结果第50-52页
        3 讨论第52-53页
        参考文献第53-54页
    第五章 过表达SelS保护PK15细胞拮抗OTA的细胞损伤第54-62页
        1 材料与方法第54-56页
            1.1 主要试剂与仪器第54-55页
            1.2 细胞培养与传代第55页
            1.3 MTT检测细胞毒力第55页
            1.4 细胞内MDA、SOD和GSH的测定第55-56页
        2 结果第56-59页
            2.1 MTT检测细胞毒力结果第56-57页
            2.2 细胞内MDA、SOD和GSH测定结果第57-59页
        3 讨论第59-60页
        参考文献第60-62页
全文结论第62-64页
致谢第64页

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