| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 一、文献综述 | 第13-23页 |
| 1. 葡萄灰霉病研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1 葡萄灰霉病的发生及为害 | 第13页 |
| 1.2 葡萄灰霉病病原菌及其生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.3 葡萄灰霉病侵染循环特点 | 第14页 |
| 1.4 灰葡萄孢菌的致病因子 | 第14-15页 |
| 1.5 葡萄灰霉病防治 | 第15页 |
| 2. 漆酶研究进展 | 第15-16页 |
| 2.1 漆酶的来源与分布 | 第15页 |
| 2.2 漆酶功能的研究及应用 | 第15-16页 |
| 2.3 真菌漆酶的研究 | 第16页 |
| 3. 葡萄抗病机制研究进展 | 第16-21页 |
| 3.1 抗毒素白藜芦醇 | 第16-20页 |
| 3.1.1 白藜芦醇及其作用 | 第16-17页 |
| 3.1.2 白藜芦醇合成及代谢 | 第17-19页 |
| 3.1.3 白藜芦醇合成及代谢关键调控基因 | 第19-20页 |
| 3.2 葡萄病程相关蛋白 | 第20-21页 |
| 4. 实时荧光定量PCR研究进展 | 第21-22页 |
| 5. 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 6. 试验的技术路线图 | 第23页 |
| 二、材料与方法 | 第23-36页 |
| 1. 材料 | 第23-26页 |
| 1.1 病原菌材料 | 第23-24页 |
| 1.2 葡萄叶片和果实的准备 | 第24页 |
| 1.3 培养基的制备 | 第24页 |
| 1.4 药品及试剂 | 第24-25页 |
| 1.5 仪器设备 | 第25-26页 |
| 2. 方法 | 第26-36页 |
| 2.1 不同灰霉菌菌株产漆酶的活性检测 | 第27-28页 |
| 2.1.1 不同灰霉菌菌株产漆酶的定性检测 | 第27页 |
| 2.1.2 不同灰霉菌菌株产漆酶的定量检测 | 第27-28页 |
| 2.2 灰霉菌菌株SP4形态学、生长速率及致病性检测 | 第28-29页 |
| 2.2.1 SP4的分离纯化与保存 | 第28页 |
| 2.2.2 SP4的形态特征显微观察 | 第28-29页 |
| 2.2.3 SP4菌丝生长速率测定 | 第29页 |
| 2.2.4 SP4致病性检测 | 第29页 |
| 2.3 灰葡萄孢菌诱导葡萄叶片白藜芦醇合成及代谢的究 | 第29-34页 |
| 2.3.1 灰葡萄孢菌接种葡萄片 | 第29-30页 |
| 2.3.2 白藜芦醇及其代谢产物的提取 | 第30页 |
| 2.3.3 白藜芦醇及其代谢产物的HPLC检测 | 第30-31页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR检测葡萄抗病基因表达情况 | 第31-34页 |
| 2.4 灰葡萄孢菌诱导葡萄果皮白藜芦醇含量的检测 | 第34-36页 |
| 2.4.1 灰葡萄孢菌接种葡萄果实 | 第34-35页 |
| 2.4.2 葡萄果皮白藜芦醇的提取 | 第35页 |
| 2.4.3 葡萄果皮白藜芦醇的检测 | 第35-36页 |
| 2.5 紫外诱导葡萄叶片白藜芦醇合成及代谢的研究 | 第36页 |
| 2.5.1 紫外诱导葡萄叶片 | 第36页 |
| 2.5.2 白藜芦醇及其代谢产物的提取 | 第36页 |
| 2.5.3 白藜芦醇及其代谢产物的检测 | 第36页 |
| 2.5.4 实时荧光定量PCR检测葡萄抗病基因表达情况 | 第36页 |
| 三、结果与分析 | 第36-63页 |
| 1. 不同灰霉菌菌株产漆酶的活性检测 | 第36-42页 |
| 1.1 不同灰霉菌菌株产漆酶的定性检测结果 | 第36-40页 |
| 1.2 不同灰霉菌菌株产漆酶的定量检测结果 | 第40-41页 |
| 1.3 SP4产漆酶活性动态变化结果 | 第41-42页 |
| 2. 灰霉菌菌株SP4的鉴定 | 第42-44页 |
| 2.1 SP4的形态学特征 | 第42页 |
| 2.2 SP4菌丝生长速率测定结果 | 第42-43页 |
| 2.3 SP4致病性检测结果 | 第43-44页 |
| 3. 灰葡萄孢菌诱导葡萄叶片白藜芦醇合成及其代谢的研究 | 第44-53页 |
| 3.1 葡萄叶片接菌后的发病症状观测 | 第44-46页 |
| 3.2 灰葡萄孢菌诱导葡萄叶片白藜芦醇的提取方法及HPLC条件优化结果 | 第46-47页 |
| 3.3 灰葡萄孢菌诱导的葡萄叶片白藜芦醇及其代谢产物的检测结果 | 第47-50页 |
| 3.3.1 标准曲线的制备 | 第47-48页 |
| 3.3.2 葡萄叶片白藜芦醇及其代谢产物的检测结果 | 第48-50页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR检测葡萄抗病基因表达情况 | 第50-53页 |
| 3.4.1 葡萄叶片RNA的提取效果 | 第50-51页 |
| 3.4.2 实时荧光定量PCR检测葡萄抗病基因表达结果 | 第51-53页 |
| 4. 灰葡萄孢菌诱导葡萄果皮白藜芦醇含量的检测 | 第53-56页 |
| 4.1 夏黑和巨峰接种灰葡萄孢菌后的发病特征观测结果 | 第53-54页 |
| 4.2 葡萄果皮白藜芦醇的提取方法和HPLC条件优化结果 | 第54-55页 |
| 4.3 灰葡萄孢菌诱导葡萄果皮白藜芦醇合成的检测结果 | 第55-56页 |
| 4.3.1 标样Res的标准曲线 | 第55页 |
| 4.3.2 葡萄果皮白藜芦醇含量的检测结果 | 第55-56页 |
| 5. 紫外诱导葡萄叶片白藜芦醇合成及代谢的研究 | 第56-63页 |
| 5.1 葡萄叶片紫外诱导后的发病情况 | 第56-58页 |
| 5.2 紫外诱导的葡萄叶片白藜芦醇的提取方法和HPLC条件优化结果 | 第58页 |
| 5.3 紫外诱导的葡萄叶片白藜芦醇及其代谢产物的检测结果 | 第58-60页 |
| 5.3.1 标准曲线的制备结果 | 第58页 |
| 5.3.2 紫外诱导的葡萄叶片白藜芦醇及其代谢产物检测结果 | 第58-60页 |
| 5.4 实时荧光定量PCR检测葡萄抗病基因表达结果 | 第60-63页 |
| 四、讨论与结论 | 第63-69页 |
| 1. 不同灰霉菌菌株产漆酶能力和酶活力不同 | 第63页 |
| 2. 灰葡萄孢菌对葡萄不同部位白藜芦醇合成的诱导作用不同 | 第63-64页 |
| 3. 灰葡萄孢菌和紫外处理对葡萄白藜芦醇合成及代谢的诱导作用不同 | 第64-66页 |
| 4. 葡萄抗病基因对灰葡萄孢菌和紫外处理的诱导反应不同 | 第66-67页 |
| 5. 小结 | 第67-69页 |
| 五、参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
