| 中文摘要 | 第12-15页 |
| ABSTRACT | 第15-17页 |
| 缩写说明 | 第18-20页 |
| 第一章 前言 | 第20-43页 |
| 1.1 念珠菌及白色念珠菌感染概述 | 第20-21页 |
| 1.2 临床抗真菌药物 | 第21-27页 |
| 1.2.1 多烯类抗生素 | 第21-22页 |
| 1.2.2 唑类 | 第22-25页 |
| 1.2.3 棘白菌素类 | 第25-27页 |
| 1.3 溶杆菌简介 | 第27-28页 |
| 1.4 溶杆菌天然产物概述 | 第28-35页 |
| 1.4.1 Cyclodepsipeptides | 第28-29页 |
| 1.4.2 Cyclic lipodepsipeptides | 第29-32页 |
| 1.4.3 头孢烯β-内酰胺类化合物 | 第32-33页 |
| 1.4.4 PTM类化合物 | 第33-34页 |
| 1.4.5 其它类型天然产物 | 第34-35页 |
| 1.5 小结与展望 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 第二章 产酶溶杆菌C3菌株的次级代谢产物分离和结构测定 | 第43-57页 |
| 2.1 引言 | 第43页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第43-45页 |
| 2.2.1 培养基 | 第43-44页 |
| 2.2.2 试剂与耗材 | 第44页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第44-45页 |
| 2.2.4 显色剂 | 第45页 |
| 2.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 2.3.1 薄层层析色谱法 | 第45页 |
| 2.3.2 反相硅胶柱层析色谱法(RP-18) | 第45-46页 |
| 2.3.3 葡聚糖凝胶柱层析色谱法 | 第46页 |
| 2.3.4 高效液相色谱法(HPLC) | 第46-47页 |
| 2.3.5 质谱(MS) | 第47页 |
| 2.3.6 核磁共振(NMR) | 第47页 |
| 2.4 实验结果 | 第47-53页 |
| 2.4.1 产酶溶杆菌C3菌株的发酵条件 | 第47-49页 |
| 2.4.2 发酵产物的分离纯化 | 第49-50页 |
| 2.4.3 ATB的结构解析 | 第50-53页 |
| 2.5 本章小结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三章 HSAF抗真菌活性与作用机制的研究 | 第57-88页 |
| 3.1 引言 | 第57-58页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第58-61页 |
| 3.2.1 菌株及培养条件 | 第58页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第58页 |
| 3.2.3 试剂和培养基的配制 | 第58-60页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第60-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-68页 |
| 3.3.1 HSAF对丝状真菌抑制活性的检测 | 第61页 |
| 3.3.2 HSAF作用不同时间对水稻稻瘟植物病原真菌菌丝形态的影响 | 第61页 |
| 3.3.3 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第61页 |
| 3.3.4 实时定量PCR(RT-PCR) | 第61-63页 |
| 3.3.5 白色念珠菌牙管萌发的检测 | 第63-64页 |
| 3.3.6 白色念珠菌原生质体的制备 | 第64页 |
| 3.3.7 白色念珠菌细胞内ROS含量的测定 | 第64-65页 |
| 3.3.8 白色念珠菌线粒体膜电位的检测 | 第65页 |
| 3.3.9 HSAF对白色念珠菌细胞DNA的损伤 | 第65-66页 |
| 3.3.10 白色念珠菌细胞周期的检测 | 第66页 |
| 3.3.11 白色念珠菌细胞早期凋亡的检测 | 第66-67页 |
| 3.3.12 白色念珠菌细胞晚期凋亡的检测 | 第67页 |
| 3.3.13 HSAF对白色念珠菌的体内抑制活性评价 | 第67-68页 |
| 3.4 结果与分析 | 第68-85页 |
| 3.4.1 HSAF的抗丝状真菌活性筛选 | 第68-69页 |
| 3.4.2 HSAF对水稻稻瘟病菌的抑制作用 | 第69-73页 |
| 3.4.3 HSAF对白色念珠菌的抑制作用 | 第73-85页 |
| 3.5 本章小结 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 第四章 Alteramide B抗白色念珠菌的作用机制 | 第88-136页 |
| 4.1 引言 | 第88页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第88-92页 |
| 4.2.1 菌株及培养条件 | 第88-89页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第89页 |
| 4.2.3 试剂和培养基的配制 | 第89-91页 |
| 4.2.4 实验仪器 | 第91-92页 |
| 4.3 实验方法 | 第92-110页 |
| 4.3.1 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第92-93页 |
| 4.3.2 白色念珠菌牙管萌发的检测 | 第93页 |
| 4.3.3 白色念珠菌细胞内ROS含量的测定 | 第93-94页 |
| 4.3.4 白色念珠菌细胞内线粒体膜电位的检测 | 第94页 |
| 4.3.5 ROS清除剂VC、TU、NAC和GSH对ATB活性的影响 | 第94页 |
| 4.3.6 白色念珠菌细胞周期的分析 | 第94-95页 |
| 4.3.7 细胞凋亡的检测 | 第95页 |
| 4.3.8 免疫荧光实验 | 第95-96页 |
| 4.3.9 热稳定实验 | 第96-97页 |
| 4.3.10 白色念珠菌tubulin蛋白在大肠杆菌中的异源表达 | 第97-99页 |
| 4.3.11 猪脑组织中微管蛋白的提取 | 第99-100页 |
| 4.3.12 Tubulin的聚合反应 | 第100页 |
| 4.3.13 电镜实验 | 第100-101页 |
| 4.3.14 动力学实验 | 第101页 |
| 4.3.15 白色念珠菌基因组的提取 | 第101-102页 |
| 4.3.16 白色念珠菌β-tubulin的定点突变 | 第102-108页 |
| 4.3.17 β-tubulin定点突变后在白色念珠菌中进行过表达 | 第108-109页 |
| 4.3.18 真菌存活率的评价 | 第109页 |
| 4.3.19 ATB对白色念珠菌的体内抑制活性评价 | 第109-110页 |
| 4.4 结果与分析 | 第110-132页 |
| 4.4.1 ATB对白色念珠菌的体外抑制活性 | 第110页 |
| 4.4.2 ATB能够抑制白色念珠菌牙管的萌发 | 第110-111页 |
| 4.4.3 ATB诱导白色念珠菌细胞内活性氧水平的升高 | 第111-112页 |
| 4.4.4 ATB引起白色念珠菌线粒体膜电位下降 | 第112-114页 |
| 4.4.5 ROS清除剂降低ATB的活性 | 第114-115页 |
| 4.4.6 ATB引起白色念珠菌细胞G2/M期停滞 | 第115-117页 |
| 4.4.7 ATB诱导白色念珠菌细胞早期凋亡 | 第117-118页 |
| 4.4.8 ATB诱导白色念珠菌细胞晚期凋亡 | 第118-119页 |
| 4.4.9 ATB促进HeLa细胞β-tubulin的解聚 | 第119-121页 |
| 4.4.10 白色念珠菌α-和β-tubulin在大肠杆菌中的异源表达 | 第121-123页 |
| 4.4.11 微管蛋白的提取纯化 | 第123-124页 |
| 4.4.12 ATB与tubulin的体外结合 | 第124-125页 |
| 4.4.13 ATB与β-tubulin相互作用的动力学研究 | 第125-128页 |
| 4.4.14 ATB对白色念珠菌β-tubulin过表达突变株的体外抑制活性 | 第128-130页 |
| 4.4.15 ATB具有良好的体内抗白色念珠菌活性 | 第130-132页 |
| 4.5 本章小结 | 第132-135页 |
| 参考文献 | 第135-136页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第136-139页 |
| 参考文献 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文目录 | 第142-143页 |
| 附录 | 第143-150页 |
| 附件 | 第150页 |
