摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
前言 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-17页 |
·植物嵌合体及形成方式 | 第12-13页 |
·植物嵌合体概述 | 第12页 |
·植物嵌合体形成方式 | 第12-13页 |
·植物白化细胞失绿的分子机制 | 第13-15页 |
·叶绿素代谢途径受阻 | 第13-14页 |
·叶绿体分化与发育相关基因的突变 | 第14页 |
·核-质互作效应导致失绿 | 第14页 |
·编码非光合系统基因突变 | 第14-15页 |
·转录组测序与功能基因挖掘 | 第15-16页 |
·转录组测序原理 | 第15页 |
·转录组测序数据分析 | 第15-16页 |
·转录组功能基因挖掘 | 第16页 |
·技术路线 | 第16-17页 |
2 红苞凤梨DNA-AFLP分析 | 第17-26页 |
·实验材料 | 第17页 |
·实验仪器 | 第17页 |
·实验试剂 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-23页 |
·红苞凤梨基因组DNA提取 | 第17-18页 |
·DNA质量检测 | 第18-19页 |
·AFLP体系的建立 | 第19-23页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23页 |
·银染 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-26页 |
·基因组DNA质量检测 | 第23-24页 |
·AFLP预扩增结果 | 第24页 |
·选择性扩增结果 | 第24-26页 |
3 红苞凤梨转录组分析 | 第26-38页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验仪器 | 第26页 |
·实验试剂 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·红苞凤梨总RNA的提取 | 第26-27页 |
·总RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
·总RNA紫外分光光度计检测 | 第27页 |
·转绿组测序 | 第27页 |
·转录组测序信息分析 | 第27-29页 |
·结果与分析 | 第29-38页 |
·总RNA质量检测 | 第29页 |
·测序数据统计与评估 | 第29-38页 |
4 红苞凤梨叶绿素合成前体物质含量分析 | 第38-41页 |
·实验材料 | 第38页 |
·测定项目与方法 | 第38-39页 |
·δ-氨基乙酰丙酸(ALA)含量测定 | 第38页 |
·胆色素原(PBG)含量测定 | 第38页 |
·尿卟啉原Ⅲ(Uroporphyrinogen Ⅲ)和粪卟啉原Ⅲ(CoprogenⅢ)含量测定 | 第38-39页 |
·原卟啉Ⅸ(Protoporphyrin Ⅸ)、镁原卟啉Ⅸ(Mg-ProtoⅨ)、原叶绿素酸脂(Pchlide)含量测定 | 第39页 |
·叶绿素含量测定 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-41页 |
·红苞凤梨叶片全绿部分与全白部分叶绿素合成前体物含量差异 | 第39-41页 |
5 红苞凤梨内参基因的筛选 | 第41-51页 |
·实验材料 | 第41页 |
·实验仪器及试剂 | 第41页 |
·主要实验仪器 | 第41页 |
·实验试剂 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-45页 |
·内参基因引物设计 | 第41-42页 |
·引物筛选 | 第42-45页 |
·结果与分析 | 第45-51页 |
·内参基因PCR扩增结果 | 第45-46页 |
·内参基因标准曲线制备结果 | 第46-49页 |
·内参基因在不同样品中的qRT-PCR结果 | 第49-50页 |
·内参基因表达稳定性分析 | 第50-51页 |
6 红苞凤梨叶绿素合成相关基因REAL TIME QPCR表达分析 | 第51-60页 |
·实验材料、仪器与试剂 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-53页 |
·目的基因引物设计 | 第51页 |
·PCR扩增与标准曲线的制备 | 第51-52页 |
·Real time qPCR | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-60页 |
·PCR扩增结果 | 第53页 |
·标准曲线制备结果 | 第53-59页 |
·Real time qPCR结果 | 第59页 |
·红苞凤梨自化细胞叶绿素合成受阻关键基因筛选 | 第59-60页 |
7 讨论 | 第60-65页 |
·红苞凤梨绿、白组织基因组DNA差异分析 | 第60-61页 |
·转录组测序结果极大地丰富了红苞凤梨基因序列信息 | 第61-62页 |
·红苞凤梨白化细胞叶绿素合成受阻关键步骤 | 第62-63页 |
·红苞凤梨内参基因筛选 | 第63页 |
·叶绿素合成代谢基因表达模式分析及关键基因筛选 | 第63-64页 |
·实验方法改进 | 第64-65页 |
·DNA提取 | 第64页 |
·RNA提取 | 第64页 |
·UroⅢ提取 | 第64-65页 |
8 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第71页 |