摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-16页 |
·牛传染性鼻气管炎的研究进展 | 第8-10页 |
·牛传染性鼻气管炎的概述 | 第8页 |
·牛传染性鼻气管炎发展简史 | 第8页 |
·牛传染性鼻气管炎的流行病学 | 第8-9页 |
·牛传染性鼻气管炎的致病性 | 第9-10页 |
·牛传染性鼻气管炎病毒的概述 | 第10-12页 |
·病毒的形态 | 第10页 |
·病毒的理化性质 | 第10-11页 |
·病毒的基因组特征 | 第11-12页 |
·牛传染性鼻气管炎诊断方法的研究进展 | 第12-16页 |
·病原学诊断 | 第12页 |
·血清学诊断 | 第12-13页 |
·分子生物学诊断 | 第13-16页 |
第二章 牛传染性鼻气管炎 gD 基因的截断克隆表达 | 第16-28页 |
·材料 | 第16页 |
·细胞、病毒和质粒 | 第16页 |
·血清与抗体 | 第16页 |
·主要试剂和酶 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·方法 | 第16-22页 |
·牛传染性鼻气管炎 gD 基因的克隆 | 第16-18页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第18-19页 |
·重组 gD 蛋白的诱导表达 | 第19-20页 |
·重组蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第20页 |
·重组蛋白 gD 的纯化 | 第20-21页 |
·纯化后 gD 蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第21页 |
·纯化后 gD 蛋白的 Western blot 检测 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-25页 |
·gD 基因的 PCR 扩增结果 | 第22页 |
·基因序列的测定和分析结果 | 第22页 |
·重组原核表达质粒的双酶切鉴定 | 第22-23页 |
·重组质粒的测序分析 | 第23页 |
·表达产物的鉴定 | 第23-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
·小结 | 第26-28页 |
第三章 牛传染性鼻气管炎 gD 蛋白间接 ELISA 检测方法的建立及初步应用 | 第28-38页 |
·材料 | 第28页 |
·主要仪器和试剂 | 第28页 |
·方法 | 第28-30页 |
·ELISA 最佳工作条件的确定 | 第28-30页 |
·间接 ELISA 阴、阳性临界值的确定 | 第30页 |
·特异性试验 | 第30页 |
·敏感性试验 | 第30页 |
·重复性试验 | 第30页 |
·临床样本的初步检测及对比性试验 | 第30页 |
·结果 | 第30-35页 |
·抗原和血清的工作浓度 | 第30-31页 |
·最佳封闭液的确定 | 第31页 |
·最佳血清反应时间的确定 | 第31-32页 |
·二抗最佳工作浓度及时间的确定 | 第32-33页 |
·最佳底物显色时间的确定 | 第33页 |
·ELISA 阴、阳性临界值的确定 | 第33-34页 |
·特异性试验 | 第34页 |
·敏感性试验 | 第34页 |
·重复性试验 | 第34页 |
·临床样本检测结果 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35页 |
·小结 | 第35-38页 |
第四章 结论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44-46页 |
附录 | 第46-50页 |
个人简历 | 第50页 |