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牛传染性鼻气管炎病毒gD基因的表达及ELISA诊断方法的建立

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 文献综述第8-16页
   ·牛传染性鼻气管炎的研究进展第8-10页
     ·牛传染性鼻气管炎的概述第8页
     ·牛传染性鼻气管炎发展简史第8页
     ·牛传染性鼻气管炎的流行病学第8-9页
     ·牛传染性鼻气管炎的致病性第9-10页
   ·牛传染性鼻气管炎病毒的概述第10-12页
     ·病毒的形态第10页
     ·病毒的理化性质第10-11页
     ·病毒的基因组特征第11-12页
   ·牛传染性鼻气管炎诊断方法的研究进展第12-16页
     ·病原学诊断第12页
     ·血清学诊断第12-13页
     ·分子生物学诊断第13-16页
第二章 牛传染性鼻气管炎 gD 基因的截断克隆表达第16-28页
   ·材料第16页
     ·细胞、病毒和质粒第16页
     ·血清与抗体第16页
     ·主要试剂和酶第16页
     ·主要仪器第16页
   ·方法第16-22页
     ·牛传染性鼻气管炎 gD 基因的克隆第16-18页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第18-19页
     ·重组 gD 蛋白的诱导表达第19-20页
     ·重组蛋白的 SDS-PAGE 检测第20页
     ·重组蛋白 gD 的纯化第20-21页
     ·纯化后 gD 蛋白的 SDS-PAGE 检测第21页
     ·纯化后 gD 蛋白的 Western blot 检测第21-22页
   ·结果第22-25页
     ·gD 基因的 PCR 扩增结果第22页
     ·基因序列的测定和分析结果第22页
     ·重组原核表达质粒的双酶切鉴定第22-23页
     ·重组质粒的测序分析第23页
     ·表达产物的鉴定第23-25页
   ·讨论第25-26页
   ·小结第26-28页
第三章 牛传染性鼻气管炎 gD 蛋白间接 ELISA 检测方法的建立及初步应用第28-38页
   ·材料第28页
     ·主要仪器和试剂第28页
   ·方法第28-30页
     ·ELISA 最佳工作条件的确定第28-30页
     ·间接 ELISA 阴、阳性临界值的确定第30页
     ·特异性试验第30页
     ·敏感性试验第30页
     ·重复性试验第30页
     ·临床样本的初步检测及对比性试验第30页
   ·结果第30-35页
     ·抗原和血清的工作浓度第30-31页
     ·最佳封闭液的确定第31页
     ·最佳血清反应时间的确定第31-32页
     ·二抗最佳工作浓度及时间的确定第32-33页
     ·最佳底物显色时间的确定第33页
     ·ELISA 阴、阳性临界值的确定第33-34页
     ·特异性试验第34页
     ·敏感性试验第34页
     ·重复性试验第34页
     ·临床样本检测结果第34-35页
   ·讨论第35页
   ·小结第35-38页
第四章 结论第38-40页
参考文献第40-44页
致谢第44-46页
附录第46-50页
个人简历第50页

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