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烟草野火和角斑病菌鉴定方法研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第1章 绪论第10-19页
   ·烟草野火和角斑病的分布与危害第10-11页
   ·烟草野火病侵染规律第11-13页
     ·菌体形态第11页
     ·生物学特性第11页
     ·烟草野火病菌毒素第11页
     ·烟草野火病症状第11-12页
     ·烟草野火病的寄主范围第12页
     ·烟草野火病的发生规律第12页
     ·生理小种第12-13页
   ·烟草角斑病侵染规律第13-14页
     ·病原学第13页
     ·症状第13页
     ·烟草角斑病发生规律第13页
     ·烟草角斑病的寄主范围第13-14页
   ·细菌病害的鉴定方法第14-15页
     ·组织分离方法第14页
     ·ELISA法第14页
     ·聚合酶链反应第14页
     ·实时定量PCR技术第14页
     ·巢式PCR第14页
     ·多重PCR第14-15页
     ·细菌 16S测序第15页
   ·烟草野火病和角斑病的鉴定方法第15-16页
   ·本研究的意义第16-17页
   ·本研究的技术路线第17页
   ·实施方案第17-19页
第2章 烟草野火和角斑病菌分子生物学鉴定方法研究第19-30页
   ·材料、仪器和试剂第19页
     ·供试材料第19页
     ·主要仪器与设备第19页
     ·主要试剂与耗材第19页
   ·实验方法第19-24页
     ·田间疑似样品采集第19-20页
     ·病原菌的分离与保存第20页
     ·细菌基因组DNA的提取第20页
     ·引物设计第20-23页
     ·野火病和角斑病PCR鉴定方法第23-24页
     ·产物检测第24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·田间疑似样品采集第24-25页
     ·疑似样品病原菌分离第25-26页
     ·病原菌基因组DAN克隆测序及PCR引物设计第26-27页
     ·野火和角斑病菌PCR鉴定及引物筛选第27-29页
   ·本章小结第29-30页
第3章 烟草野火病角斑病菌分子生物学鉴定方法的验证第30-37页
   ·材料、仪器及试剂第30页
     ·材料第30页
     ·主要仪器与设备第30页
     ·主要试剂与耗材第30页
   ·实验方法第30-32页
     ·供试菌株的采集第30页
     ·供试菌株的分离第30页
     ·供试菌株的PCR验证第30页
     ·叶际微生物的分离第30-31页
     ·根际微生物的分离第31页
     ·土壤中微生物的分离第31页
     ·水中微生物的分离第31页
     ·病原细菌接种鉴定方法第31-32页
     ·PCR鉴定结果可靠性分析第32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·菌株的采集及分离第32页
     ·各供试菌株的PCR鉴定结果第32-33页
     ·PCR鉴定后细菌接种烟草致病性鉴定及可靠性分析第33-36页
   ·本章小结第36-37页
第4章 烟草野火病和角斑病快速鉴定方法第37-40页
   ·供试材料第37页
     ·实验方法第37-38页
     ·疑似病害细菌汁液的制备第37页
     ·PCR扩增方法及体系第37页
     ·多重PCR鉴定方法和体系第37-38页
   ·结果与分析第38-39页
     ·PCR方法快速鉴定野火和角斑菌第38-39页
     ·病原菌多重PCR鉴定第39页
   ·本章小结第39-40页
第5章 烟草野火角斑病原菌分子生物技术分离纯化第40-43页
   ·材料第40页
   ·实验方法第40页
     ·野火病和角斑病原菌活化第40页
     ·野火病和角斑病的分离纯化第40页
     ·野火病和角斑病原细菌的进一步纯化第40页
     ·纯化后的细菌 16SRNA测序第40页
   ·结果与分析第40-42页
     ·野火病和角斑病病原细菌的进一步纯化第40-42页
     ·菌液 16S测序第42页
   ·本章小结第42-43页
第6章 烟草角斑病生理小种鉴定第43-48页
     ·材料第43-44页
     ·供试品种第43页
     ·供试菌株第43-44页
   ·实验方法第44-45页
     ·试验设计第44页
     ·菌悬液的配制第44页
     ·接种方法第44页
     ·调查、统计及分析方法第44-45页
   ·结果与分析第45-47页
     ·烟草品种抗病性及菌种致病性差异比较第45页
     ·烟草品种抗性的聚类分析第45-46页
     ·烟草角斑病菌鉴别寄主的选择第46页
     ·烟草角斑病菌生理小种的划分第46-47页
   ·本章小结第47-48页
讨论第48-50页
结论第50-51页
参考文献第51-56页
附录 1第56-57页
附录 2第57-60页
致谢第60-61页
攻读学位期间发表的学术论文第61页

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