中文摘要 | 第1-16页 |
英文摘要 | 第16-22页 |
符号说明 | 第22-24页 |
前言 | 第24-29页 |
第一部分 长角血蜱作为新布尼亚布尼亚病毒的传播媒介和宿主的研究 | 第29-65页 |
一. 实验材料 | 第29-38页 |
(一) 标本来源 | 第29页 |
(二) 常规仪器及药品 | 第29-31页 |
(三) 样本提取试剂盒与耗材 | 第31-38页 |
二. 实验方法 | 第38-54页 |
(一) 总核苷酸的提取 | 第38-41页 |
(二) PCR扩增 | 第41-44页 |
(三) 琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
(四) DNA凝胶回收PCR产物 | 第44-45页 |
(五) 基因克隆 | 第45-48页 |
(六) 细胞实验 | 第48-49页 |
(七) 动物实验 | 第49-51页 |
(八) 间接免疫荧光实验 | 第51-52页 |
(九) ELISA检测染毒小鼠SFTSV血清抗体水平 | 第52页 |
(十) 质量控制 | 第52-53页 |
(十一) 统计分析 | 第53-54页 |
三. 结果 | 第54-61页 |
(一) 蜱标本的采集情况 | 第54-55页 |
(二) 长角血蜱SFTSV的同源性和系统发育树分析 | 第55-56页 |
(三) 空斑实验检测收获病毒滴度的结果 | 第56-57页 |
(四) Real-time PCR检测染毒小鼠病毒载量变化的结果 | 第57-58页 |
(五) SFTSV在长角血蜱体内的传播循环模式 | 第58-61页 |
四. 讨论 | 第61-64页 |
五. 小结 | 第64-65页 |
第二部分 蜱携带病原体无形体和埃立克体的分子生物学研究 | 第65-76页 |
一. 实验材料 | 第65页 |
二. 实验方法 | 第65-69页 |
(一) 埃立克体的PCR检测 | 第65-67页 |
(二) 人粒细胞无形体的PCR检测 | 第67页 |
(三) 质量控制 | 第67-69页 |
三. 结果 | 第69-74页 |
(一) 蜱标本的采集情况 | 第69页 |
(二) 埃立克体阳性序列进行同源性和系统发育树分析 | 第69-72页 |
(三) 无形体16S rRNA进行同源性和系统发育树分析 | 第72-74页 |
四. 讨论 | 第74-76页 |
第三部分 蜱传疾病的人群血清流行病学研究 | 第76-99页 |
一. 实验材料 | 第76-81页 |
(一) 标本采集 | 第76页 |
(二) 实验试剂 | 第76-81页 |
二. 实验方法 | 第81-91页 |
(一) 构建pET32a-NP原核表达载体 | 第81-85页 |
(二) pET32a-NP在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第85页 |
(三) pET32a-NP,pET32a的SDS-PAGE电泳检测 | 第85-87页 |
(四) 用镍柱纯化蛋白蛋白纯化 | 第87-88页 |
(五) pET32a-NP融合蛋白功能的初步鉴定 | 第88-89页 |
(六) 用纯化的蛋白包被ELISA检测健康人群的SFTSV抗体水平 | 第89页 |
(七) 人无形体抗体(HGA-Ab)酶联免疫分析 | 第89-90页 |
(八) 质量控制 | 第90页 |
(九) 统计学分析 | 第90页 |
(十) 伦理学声明 | 第90-91页 |
三. 实验结果 | 第91-96页 |
(一) 标本采集信息 | 第91页 |
(二) pET32a-NP原核表达载体的建立和目的蛋白的纯化结果 | 第91-92页 |
(三) 蓬莱市健康人群血清流行病学研究 | 第92-96页 |
四. 讨论 | 第96-98页 |
五. 结论 | 第98-99页 |
创新点与不足 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-110页 |
附图 | 第110-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第114-116页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第116-118页 |
附英文论著 | 第118-129页 |