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新布尼亚病毒传播媒介、宿主和蜱传疾病的人群血清流行病学研究

中文摘要第1-16页
英文摘要第16-22页
符号说明第22-24页
前言第24-29页
第一部分 长角血蜱作为新布尼亚布尼亚病毒的传播媒介和宿主的研究第29-65页
 一. 实验材料第29-38页
  (一) 标本来源第29页
  (二) 常规仪器及药品第29-31页
  (三) 样本提取试剂盒与耗材第31-38页
 二. 实验方法第38-54页
  (一) 总核苷酸的提取第38-41页
  (二) PCR扩增第41-44页
  (三) 琼脂糖凝胶电泳第44页
  (四) DNA凝胶回收PCR产物第44-45页
  (五) 基因克隆第45-48页
  (六) 细胞实验第48-49页
  (七) 动物实验第49-51页
  (八) 间接免疫荧光实验第51-52页
  (九) ELISA检测染毒小鼠SFTSV血清抗体水平第52页
  (十) 质量控制第52-53页
  (十一) 统计分析第53-54页
 三. 结果第54-61页
  (一) 蜱标本的采集情况第54-55页
  (二) 长角血蜱SFTSV的同源性和系统发育树分析第55-56页
  (三) 空斑实验检测收获病毒滴度的结果第56-57页
  (四) Real-time PCR检测染毒小鼠病毒载量变化的结果第57-58页
  (五) SFTSV在长角血蜱体内的传播循环模式第58-61页
 四. 讨论第61-64页
 五. 小结第64-65页
第二部分 蜱携带病原体无形体和埃立克体的分子生物学研究第65-76页
 一. 实验材料第65页
 二. 实验方法第65-69页
  (一) 埃立克体的PCR检测第65-67页
  (二) 人粒细胞无形体的PCR检测第67页
  (三) 质量控制第67-69页
 三. 结果第69-74页
  (一) 蜱标本的采集情况第69页
  (二) 埃立克体阳性序列进行同源性和系统发育树分析第69-72页
  (三) 无形体16S rRNA进行同源性和系统发育树分析第72-74页
 四. 讨论第74-76页
第三部分 蜱传疾病的人群血清流行病学研究第76-99页
 一. 实验材料第76-81页
  (一) 标本采集第76页
  (二) 实验试剂第76-81页
 二. 实验方法第81-91页
  (一) 构建pET32a-NP原核表达载体第81-85页
  (二) pET32a-NP在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达第85页
  (三) pET32a-NP,pET32a的SDS-PAGE电泳检测第85-87页
  (四) 用镍柱纯化蛋白蛋白纯化第87-88页
  (五) pET32a-NP融合蛋白功能的初步鉴定第88-89页
  (六) 用纯化的蛋白包被ELISA检测健康人群的SFTSV抗体水平第89页
  (七) 人无形体抗体(HGA-Ab)酶联免疫分析第89-90页
  (八) 质量控制第90页
  (九) 统计学分析第90页
  (十) 伦理学声明第90-91页
 三. 实验结果第91-96页
  (一) 标本采集信息第91页
  (二) pET32a-NP原核表达载体的建立和目的蛋白的纯化结果第91-92页
  (三) 蓬莱市健康人群血清流行病学研究第92-96页
 四. 讨论第96-98页
 五. 结论第98-99页
创新点与不足第99-100页
参考文献第100-110页
附图第110-112页
致谢第112-114页
攻读学位期间发表的学术论文第114-116页
学位论文评阅及答辩情况表第116-118页
附英文论著第118-129页

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