| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·拟南芥转基因简介 | 第11-14页 |
| ·拟南芥（Arabidopsis thaliana） | 第11-12页 |
| ·拟南芥浸花转化法 | 第12-14页 |
| ·杆状病毒简介及其应用研究进展 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒 | 第14页 |
| ·杆状病毒在生物防治中的应用及其特点 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒生物增效途径 | 第15页 |
| ·杆状病毒几丁质酶的研究 | 第15-17页 |
| ·杆状病毒几丁质酶的功能 | 第15-16页 |
| ·HearNPV几丁质酶基因的研究 | 第16-17页 |
| ·研究目的意义 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·供试虫体 | 第18页 |
| ·供试病毒和菌株 | 第18页 |
| ·载体 | 第18-19页 |
| ·pGEM?-T Easy Vector | 第18-19页 |
| ·植物表达载体pSR784d | 第19页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第19-20页 |
| ·培养基及常用溶液配制 | 第20-21页 |
| ·细菌培养基 | 第20页 |
| ·缓冲液 | 第20页 |
| ·碱裂解法质粒抽提液 | 第20-21页 |
| ·CTAB法基因组抽提液 | 第21页 |
| ·主要抗生素的配制 | 第21页 |
| ·其他试剂的配制 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·重组植物表达载体的构建 | 第21-24页 |
| ·PCR引物的设计及合成 | 第21页 |
| ·PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR产物纯化、平末端加A反应及T载体连接反应 | 第22-23页 |
| ·氯化钙法制备新鲜的大肠杆菌TG1感受态细胞 | 第23页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌TG1感受态细胞 | 第23页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA | 第23-24页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第24页 |
| ·植物表达载体pSR784d与Chitinase基因片段的粘性末端连接反应 | 第24页 |
| ·重组载体Chitinase-pSR784d转化农杆菌LBA4404 | 第24-25页 |
| ·氯化钙法制备新鲜农杆菌LBA4404感受态细胞 | 第24-25页 |
| ·电穿孔法转化农杆菌LBA4404感受态细胞 | 第25页 |
| ·拟南芥转化和转基因株系的获得 | 第25-26页 |
| ·拟南芥室内培养 | 第25页 |
| ·农杆菌LBA4404转化液的制备 | 第25-26页 |
| ·拟南芥花序侵染 | 第26页 |
| ·转化后拟南芥培养和种子的收获 | 第26页 |
| ·转基因拟南芥的筛选 | 第26页 |
| ·T_3代转基因拟南芥的分子检测 | 第26-29页 |
| ·转基因拟南芥基因组PCR检测 | 第26-28页 |
| ·T3代转基因拟南芥的定量RT-PCR（Quantitative RT-PCR）分析 | 第28-29页 |
| ·Chitinase转基因拟南芥对HearNPV增效作用的试验 | 第29-32页 |
| ·取食转基因植株和HearNPV的棉铃虫的LT50和LT90的测定 | 第29页 |
| ·取食转基因植株和HearNPV的棉铃虫体内病毒拷贝数的测定 | 第29-30页 |
| ·取食转基因植株并感染HearNPV后的棉铃虫病毒产量的测定 | 第30页 |
| ·取食转基因植株HearNPV的棉铃虫体幼虫日均累积增重量的测定 | 第30-32页 |
| 第三章 实验结果分析 | 第32-41页 |
| ·Chitinase重组植物表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·Chitinase基因的克隆及测序 | 第32-33页 |
| ·重组植物表达载体Chitinase-pSR784d的构建 | 第33页 |
| ·Chitinase转基因拟南芥的获得 | 第33-34页 |
| ·T_3代转基因拟南芥的分子检测 | 第34-36页 |
| ·PCR检测 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR分析 | 第35-36页 |
| ·转Chitinase基因拟南芥对HearNPV的增效作用 | 第36-41页 |
| ·LT_(50)和LT_(90)的测定 | 第36-38页 |
| ·不同处理棉铃虫细胞内的病毒DNA的定量检测 | 第38-39页 |
| ·不同处理棉铃虫体内的病毒产量 | 第39-40页 |
| ·棉铃虫日累积增重的测定 | 第40-41页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第41-43页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
