| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 英文缩写表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| ·传染性海绵状脑病的概述 | 第13-15页 |
| ·传染性和海绵状脑病的特征及分类 | 第13-14页 |
| ·TSEs的发展历史 | 第14-15页 |
| ·朊蛋白的生理功能 | 第15-21页 |
| ·PrP~C的结构 | 第15-16页 |
| ·PrP~C的生物学功能 | 第16-19页 |
| ·PrP~C向PrP~(Sc)的转化机制 | 第19-21页 |
| ·感染机制 | 第21-23页 |
| ·朊病毒进入体内的方式 | 第21-22页 |
| ·朊病毒进入神经系统的途径 | 第22-23页 |
| ·自噬在朊病毒中的作用 | 第23-28页 |
| ·自噬的分类及特点 | 第23-25页 |
| ·自噬的调节 | 第25-27页 |
| ·疾病相关的选择性自噬 | 第27-28页 |
| ·HDAC6在神经退化性疾病中的功能 | 第28-31页 |
| ·HDAC6作为脱乙酰酶的功能 | 第28-29页 |
| ·HDAC6在细胞应对错误折叠的聚集体蛋白中的作用 | 第29-31页 |
| ·HDAC6作为压力存活因子 | 第31页 |
| ·朊蛋白的神经毒性形式 | 第31页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 HDAC6负调节PRP106-126诱导的神经元死亡 | 第33-52页 |
| 引言 | 第33页 |
| ·材料 | 第33-38页 |
| ·细胞 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·实验所用溶液的配制 | 第35-37页 |
| ·主要仪器及设备 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-45页 |
| ·小鼠原代皮质神经元的分离培养 | 第38页 |
| ·HA-HDAC6重组表达质粒的构建 | 第38-41页 |
| ·无内毒素重组质粒HDAC6-HA的大量提取 | 第41-42页 |
| ·HDAC6-HA的质粒、shRNA-HDAC6的质粒转染原代神经元 | 第42-43页 |
| ·PrP106-126刺激神经元 | 第43页 |
| ·FITC-PrP106-126刺激神经元 | 第43页 |
| ·PrP106-126与HDAC6的特异性抑制剂Tubacin共同作用神经元 | 第43页 |
| ·HDAC6蛋白的检测 | 第43-44页 |
| ·免疫荧光检测HDAC6的定位 | 第44页 |
| ·细胞活力的检测 | 第44-45页 |
| ·统计学分析 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-50页 |
| ·小鼠大脑皮质神经元的分离培养及鉴定 | 第45-46页 |
| ·小鼠HDAC6基因的PCR扩增 | 第46页 |
| ·重组质粒HDAC6-HA的鉴定 | 第46-47页 |
| ·PrP106-126改变神经元内HDAC6的表达 | 第47-48页 |
| ·PrP106-126与神经元内的HDAC6共定位 | 第48-49页 |
| ·HDAC6参与调节PrP106-126诱导的神经元死亡 | 第49-50页 |
| ·分析与讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 自噬在HDAC6负调节PRP106-126诱导的神经元死亡中的作用 | 第52-63页 |
| 引言 | 第52页 |
| ·材料 | 第52-56页 |
| ·小鼠大脑皮质神经元的分离培养 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·实验所用溶液的配制 | 第53-56页 |
| ·主要仪器及设备 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-59页 |
| ·HDAC6-HA的质粒、shRNA-HDAC6的质粒转染原代神经元 | 第56-57页 |
| ·PrP106-126刺激神经元 | 第57页 |
| ·PrP106-126分别与自噬的激活剂和抑制剂共刺激神经元 | 第57页 |
| ·细胞内LC3-Ⅱ的检测 | 第57-58页 |
| ·细胞活力检测 | 第58页 |
| ·透射电镜观察PrP106-126作用过表达HDAC6的神经元的自噬情况 | 第58页 |
| ·统计学分析 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-62页 |
| ·过表达HDAC6可以增强自噬 | 第59-60页 |
| ·抑制HDAC6的活性可以降低自噬 | 第60-61页 |
| ·透射电镜观察过表达HDAC6对神经元自噬的影响 | 第61-62页 |
| ·分析与讨论 | 第62-63页 |
| 第四章 PI3K-AKT-MTOR信号通路在HDAC6负调节PRP106-126诱导的神经元死亡中的作用 | 第63-76页 |
| 引言 | 第63页 |
| ·材料 | 第63-67页 |
| ·小鼠大脑皮质神经元的分离培养 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63-64页 |
| ·实验所用溶液的配制 | 第64-66页 |
| ·主要仪器及设备 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-70页 |
| ·HDAC6-HA的质粒、shRNA-HDAC6的质粒转染原代神经元 | 第67-68页 |
| ·PrP106-126刺激神经元 | 第68页 |
| ·PrP106-126与Tubacin和PI3K-Akt抑制剂Wortmanin共刺激神经元 | 第68页 |
| ·细胞内Phospho-mTOR、Phspho-Akt、Phospho-70S6K的检测 | 第68-69页 |
| ·免疫荧光检测Phospho-Akt | 第69页 |
| ·细胞活力检测 | 第69-70页 |
| ·统计学分析 | 第70页 |
| ·实验结果 | 第70-74页 |
| ·HDAC6通过抑制mTOR的活性来增强自噬 | 第70-71页 |
| ·过表达HDAC6可以激活Akt | 第71-73页 |
| ·抑制HDAC6降低磷酸化的Akt | 第73-74页 |
| ·分析与讨论 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 创新点 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 个人简介 | 第92页 |
