| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-21页 |
| ·硒与硒蛋白 | 第12-16页 |
| ·硒 | 第12页 |
| ·硒蛋白 | 第12-16页 |
| ·SelK | 第16-19页 |
| ·SelK的结构特征 | 第16页 |
| ·SelK的细胞内定位与组织分布 | 第16-17页 |
| ·SelK的生物学功能研究进展 | 第17-19页 |
| ·T细胞活化的信号转导途径 | 第19-20页 |
| ·RNA干扰技术 | 第20页 |
| ·论文的选题与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-45页 |
| ·实验材料 | 第21-26页 |
| ·小鼠 | 第21页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第22-24页 |
| ·实验主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·实验主要仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-45页 |
| ·Real time-PCR检测SelK、IL-2Rα 和CHERP基因在mRNA水平上的表达 | 第26-29页 |
| ·Western blot检测相关蛋白表达水平 | 第29-32页 |
| ·免疫组化检测各组织中Sel K的表达与分布 | 第32-35页 |
| ·T淋巴细胞的培养 | 第35-36页 |
| ·细胞免疫荧光检测Sel K在T淋巴细胞中的定位 | 第36-37页 |
| ·shRNA载体的构建与鉴定 | 第37-41页 |
| ·细胞转染 | 第41-43页 |
| ·流式细胞术检测钙流 | 第43页 |
| ·ELISA检测细胞因子 | 第43-44页 |
| ·CCK-8 检测细胞增殖情况 | 第44-45页 |
| 第3章 实验结果 | 第45-64页 |
| ·SelK在小鼠中的组织分布 | 第45-48页 |
| ·SelK在小鼠组织中mRNA水平上的差异 | 第45-47页 |
| ·SelK在小鼠各组织中蛋白水平上的表达差异 | 第47-48页 |
| ·SelK的细胞内定位 | 第48-49页 |
| ·免疫组化检测Sel K在小鼠脾脏中的分布 | 第48-49页 |
| ·细胞免疫荧光结果 | 第49页 |
| ·干扰质粒的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| ·干扰质粒的双酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组质粒的测序鉴定结果 | 第50页 |
| ·体外干扰Sel K对T淋巴细胞的影响 | 第50-61页 |
| ·shRNA体外干扰小鼠T淋巴细胞SelK的表达 | 第50-53页 |
| ·SelK干扰对T淋巴细胞中钙流的影响 | 第53-56页 |
| ·SelK干扰对细胞内CHERP的影响 | 第56-57页 |
| ·SelK干扰对细胞内IL-2R的影响 | 第57-59页 |
| ·SelK缺乏对T淋巴细胞中细胞因子的影响 | 第59-61页 |
| ·体外加硒对T淋巴细胞增殖以及SelK表达的影响 | 第61-64页 |
| ·硒代蛋氨酸对T淋巴细胞增殖的影响 | 第61-62页 |
| ·硒代蛋氨酸对T淋巴细胞中SelK表达的影响 | 第62-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第78-79页 |