| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-19页 |
| 第一章 胃癌腹膜转移相关差异蛋白质组的分离、鉴定与生物信息学分析 | 第19-55页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 1、实验材料 | 第20-26页 |
| ·标本来源 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要溶液配制 | 第23-26页 |
| ·主要数据库及生物信息学网站 | 第26页 |
| 2、实验方法 | 第26-35页 |
| ·取材方法 | 第26-27页 |
| ·总蛋白提取 | 第27页 |
| ·总蛋白纯化 | 第27页 |
| ·蛋白定量 | 第27-28页 |
| ·CyDye染料标记 | 第28页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第28-30页 |
| ·分析胶的成像 | 第30页 |
| ·制备胶的制作 | 第30页 |
| ·制备胶的胶体考马斯亮蓝染色以及扫描 | 第30页 |
| ·差异点的软件分析及挖胶 | 第30-32页 |
| ·考染胶粒的胶内酶解 | 第32页 |
| ·样品纯化浓缩、点靶 | 第32页 |
| ·质谱鉴定 | 第32-33页 |
| ·差异蛋白质的相互作用分析 | 第33页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第33-34页 |
| ·Western blot检测 | 第34-35页 |
| 3、实验结果 | 第35-44页 |
| ·手术取材组织的质量评估 | 第35-36页 |
| ·分析胶荧光图像扫描 | 第36-37页 |
| ·差异蛋白点的分析和质谱鉴定 | 第37-39页 |
| ·选择Myosin-9蛋白作为进一步研究的目标 | 第39-42页 |
| ·验证Myosin-9蛋白在胃癌组织和相应腹膜转移组织间的差异表达 | 第42-44页 |
| 4、讨论 | 第44-48页 |
| 5、参考文献 | 第48-55页 |
| 第二章 Myosin-9在胃癌侵袭转移中的功能研究 | 第55-90页 |
| 前言 | 第55-58页 |
| 1、实验材料 | 第58-61页 |
| ·细胞系及培养条件 | 第58页 |
| ·实验动物及饲养条件 | 第58-59页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| ·主要溶液配制 | 第60-61页 |
| 2、实验方法 | 第61-71页 |
| ·细胞培养及处理 | 第61-62页 |
| ·qRT-PCR检测Myosin-9 mRNA在胃癌细胞株中的表达情况 | 第62-65页 |
| ·构建稳定的Myosin-9表达沉默的细胞株 | 第65-68页 |
| ·细胞体外实验 | 第68-70页 |
| ·构建人胃癌细胞裸鼠腹腔内播散转移动物模型 | 第70-71页 |
| ·HE染色 | 第71页 |
| ·统计方法 | 第71页 |
| 3、实验结果 | 第71-80页 |
| ·胃癌细胞株中Myosin-9 mRNA水平的表达情况 | 第71-72页 |
| ·人胃癌细胞株中Myosin-9蛋白水平的表达情况 | 第72-73页 |
| ·构建稳定沉默表达Myosin-9蛋白的细胞株 | 第73-74页 |
| ·干扰Myosin-9对SGC7901和AGS细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第74-76页 |
| ·干扰Myosin-9对SGC7901和AGS细胞粘附能力的影响 | 第76-77页 |
| ·干扰Myosin-9对人胃癌细胞裸鼠腹腔内播散转移能力的影响 | 第77-80页 |
| 4、讨论 | 第80-84页 |
| 5、参考文献 | 第84-90页 |
| 第三章 Myosin-9在胃癌侵袭和转移中作用机制的初步研究 | 第90-106页 |
| 前言 | 第90-92页 |
| 1、实验材料 | 第92-94页 |
| ·细胞系及培养条件 | 第92页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第92页 |
| ·主要仪器 | 第92-93页 |
| ·主要溶液配制 | 第93-94页 |
| 2、实验方法 | 第94-96页 |
| ·细胞培养 | 第94页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第94-95页 |
| ·蛋白定量 | 第95页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳和蛋白质印迹 | 第95页 |
| ·目的蛋白检测 | 第95-96页 |
| 3、实验结果 | 第96页 |
| 4、讨论 | 第96-101页 |
| 5、参考文献 | 第101-106页 |
| 第四章 全文小结 | 第106-107页 |
| 中英文缩略词表 | 第107-109页 |
| 综述 | 第109-120页 |
| 参考文献 | 第116-120页 |
| 攻读博士期间成果 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
