论文主要创新点 | 第1-7页 |
目录 | 第7-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
1 文献综述 | 第16-43页 |
·植物小G蛋白信号通路的研究进展 | 第16-22页 |
·ROP小G蛋白在植物生长发育以及各个生理过程中的作用 | 第16-18页 |
·ROP信号通路的下游效应因子 | 第18-20页 |
·鸟苷酸交换因子(GEF)对ROP活性的调控 | 第20-21页 |
·GTP酶激活蛋白(GAP)对ROP活性的调控 | 第21-22页 |
·鸟苷酸解离抑制因子(RhoGDI)对小G蛋白ROP信号通路的调控机理 | 第22-26页 |
·哺乳动物RhoGDI对Rho GTPase的调控 | 第22-25页 |
·RhoGDI在植物生长发育中的作用 | 第25-26页 |
·植物激素脱落酸的研究进展 | 第26-42页 |
·脱落酸的合成与代谢 | 第26-31页 |
·脱落酸的合成 | 第26-29页 |
·脱落酸的代谢 | 第29-31页 |
·脱落酸信号通路的研究 | 第31-42页 |
·脱落酸受体的研究 | 第31-34页 |
·脱落酸信号通路的研究 | 第34-42页 |
·本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-59页 |
·材料 | 第43-49页 |
·植物材料 | 第43页 |
·菌株与质粒 | 第43-45页 |
·引物名称和序列 | 第45-46页 |
·所用工具酶及试剂盒 | 第46页 |
·抗体 | 第46页 |
·培养基 | 第46-48页 |
·其他主要生物学试剂 | 第48-49页 |
·实验方法 | 第49-59页 |
·拟南芥植株的培养以及表型分析 | 第49-51页 |
·拟南芥的培养以及突变体的鉴定 | 第49-50页 |
·超表达转基因植株的构建 | 第50-51页 |
·分子生物学与生化实验方法 | 第51-55页 |
·基因克隆与载体构建 | 第51页 |
·质粒的提取 | 第51-52页 |
·植物基因组DNA提取 | 第52页 |
·植物总RNA的提取 | 第52页 |
·半定量RT-PCR | 第52页 |
·蛋白质的原核表达 | 第52-53页 |
·拟南芥总蛋白的提取 | 第53页 |
·Western blot(免疫印迹)实验 | 第53-54页 |
·体外磷酸化实验 | 第54页 |
·蛋白质Pull-down实验 | 第54页 |
·小G蛋白GDP交换实验 | 第54-55页 |
·蛋白质双向电泳实验 | 第55页 |
·细胞生物学方法 | 第55-59页 |
·拟南芥叶肉原生质体的分离和转化 | 第55-56页 |
·荧光显微镜的观察 | 第56页 |
·激光扫描共聚焦显微镜的观察 | 第56页 |
·FRET(荧光共振能量转移)实验 | 第56-57页 |
·ABA诱导的气孔关闭实验 | 第57页 |
·GUS染色的组织化学分析 | 第57-58页 |
·基因枪瞬时转化 | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-114页 |
·突变体及转基因植株的鉴定以及GDI基因的组织表达分布 | 第59-61页 |
·gdi1突变体及GDI1超表达转基因植株的表型分析 | 第61-66页 |
·gdi1突变体及GDI1超表达转基因植株的初步表型分析 | 第61-62页 |
·gdi1突变体及GDI1超表达转基因植株的表皮细胞形态观察 | 第62-66页 |
·GDI1蛋白的亚细胞定位 | 第66-68页 |
·GDI1与ROP的相互作用 | 第68-75页 |
·体外蛋白质Pull-down实验检测GDI1与不同ROP的相互作用 | 第68-69页 |
·双分子荧光互补实验验证GDI与不同ROP的相互作用 | 第69-70页 |
·体内FRET研究GDI1与不同形式的ROP的相互作用 | 第70-73页 |
·GDI1转基因植株与ROP转基因植株杂交后代的表型分析 | 第73-75页 |
·GDI1对叶片表皮细胞微丝及微管细胞骨架的影响 | 第75-79页 |
·GDI1的磷酸化修饰及其功能作用 | 第79-84页 |
·双向电泳检测GDI1的磷酸化修饰及质谱鉴定GDI的磷酸化位点 | 第79-80页 |
·GDI1的磷酸化修饰对其功能作用的影响 | 第80-84页 |
·钙离子依赖蛋白激酶对GDI1的磷酸化调控 | 第84-86页 |
·利用体外磷酸化实验验证CPK3对GDI1的磷酸化修饰作用 | 第84页 |
·CPK3与GDI1的蛋白质相互作用的分析 | 第84-86页 |
·药理学实验检验钙离子信号对叶表皮细胞形态的影响 | 第86-88页 |
·小结与讨论关于GDI1在细胞形态发生中功能的研究 | 第88-93页 |
·小结 | 第88-90页 |
·讨论 | 第90-93页 |
·GDI1在ABA诱导的气孔关闭信号通路中的功能 | 第93-97页 |
·gdi1缺失突变体及GDI1超表达转基因植株在ABA诱导气孔关闭过程中的表型 | 第93-96页 |
·GDI1超表达植株气孔对ABA的超敏感反应可被CA-rop6恢复 | 第96-97页 |
·GDI1对ABA诱导的保卫细胞中细胞骨架稳定性的影响 | 第97-103页 |
·实时观测ABA对保卫细胞微丝骨架构架的影响 | 第97-98页 |
·在3D水平上精细分析ABA诱导的保卫细胞中微丝骨架的重排 | 第98-100页 |
·GDI1对ABA诱导的保卫细胞微丝细胞骨架重排的影响 | 第100-103页 |
·GDI1的活性受到ABA信号分子之一的SnRK2.6激酶的调控 | 第103-110页 |
·激酶SnRK2.6可在三个磷酸化位点上对GDI1蛋白进行修饰 | 第103-104页 |
·激酶SnRK2.6与GDI1相互作用的分析 | 第104-106页 |
·GDI1的磷酸化增强了它对ROP6-GDP释放的抑制 | 第106-107页 |
·ABA通过受体PYR蛋白质复合体调控SnRK2.6对GDI1的磷酸化修饰 | 第107-110页 |
·小结与讨论_GDI1在ABA诱导的气孔关闭信号通路中的功能 | 第110-114页 |
·小结 | 第110-111页 |
·讨论 | 第111-114页 |
4 参考文献 | 第114-131页 |
5 在读期间发表和整理的文章 | 第131-132页 |
6 致谢 | 第132页 |