| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 参考文献 | 第17-20页 |
| 第一章 EGFR酪氨酸激酶抑制剂引发体内的肠炎 | 第20-38页 |
| 绪言 | 第20-22页 |
| 第一节 EGFR酪氨酸激酶抑制剂体内引发肠上皮组织的病理变化 | 第22-27页 |
| 1 、实验材料与方法 | 第22-23页 |
| ·实验药品与试剂 | 第22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·动物模型 | 第22-23页 |
| ·小鼠肠切片的病理学检测 | 第23页 |
| ·统计方法 | 第23页 |
| 2 实验结果 | 第23-26页 |
| ·EGFR酪氨酸激酶抑制剂对小鼠体重的影响 | 第23-24页 |
| ·EGFR酪氨酸激酶抑制剂所引发的小鼠肠上皮组织病理变化 | 第24-26页 |
| 3. 讨论 | 第26-27页 |
| 第二节 厄洛替尼体内对肠上皮细胞凋亡、炎症因子和通透性的影响 | 第27-34页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第27-30页 |
| ·实验药品与试剂 | 第27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·动物模型 | 第27页 |
| ·TUNEL染色检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
| ·小鼠血清的采取 | 第28页 |
| ·小鼠肠RNA的提取 | 第28页 |
| ·实时定量PCR | 第28-29页 |
| ·免疫组织化学 | 第29-30页 |
| ·统计方法 | 第30页 |
| 2. 实验结果 | 第30-33页 |
| ·厄洛替尼导致的小鼠肠上皮细胞的凋亡 | 第30-31页 |
| ·厄洛替尼对灌胃小鼠肠上皮组织切片上CHOP表达的影响 | 第31-32页 |
| ·厄洛替尼对灌胃小鼠肠上皮组织切片上E-cadherin表达的影响 | 第32页 |
| ·厄落替尼对小鼠肠上皮组织中炎症因子水平的影响 | 第32-33页 |
| 3. 讨论 | 第33-34页 |
| 小结 | 第34页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 第二章 EGFR酪氨酸激酶抑制剂体外引发肠上皮损伤的研究 | 第38-64页 |
| 绪言 | 第38-39页 |
| 第一节 EGFR酪氨酸激酶抑制剂引发IEC-6细胞的凋亡 | 第39-47页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第39-42页 |
| ·药品与试剂 | 第39-40页 |
| ·仪器和耗材 | 第40页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·PI和Annexin V双染检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
| ·Western blotting | 第41-42页 |
| ·统计方法 | 第42页 |
| 2. 实验结果 | 第42-45页 |
| ·流式细胞术检测厄洛替尼和吉非替尼引发的IEC-6细胞的凋亡 | 第42-43页 |
| ·厄洛替尼和吉非替尼对IEC-6细胞P-AKT和Cleaved-PARP的影响 | 第43-45页 |
| 3. 讨论 | 第45-47页 |
| 第二节 EGFR酪氨酸激酶抑制剂对IEC-6通透性和炎症因子的影响 | 第47-57页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第47-50页 |
| ·药品与试剂 | 第47页 |
| ·实验仪器 | 第47页 |
| ·Western blotting | 第47页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第47页 |
| ·实时定量PCR | 第47-49页 |
| ·ELISA法检测细胞培养上清的IL-6的含量 | 第49页 |
| ·FITC标记的木糖醇检测IEC-6通透性 | 第49页 |
| ·统计方法 | 第49-50页 |
| 2. 实验结果 | 第50-55页 |
| ·厄洛替尼和吉非替尼对IEC-6细胞通透性及其相关蛋白表达的影响 | 第50-53页 |
| ·厄落替尼和吉非替尼对IEC-6细胞分泌炎症因子的影响 | 第53-55页 |
| 3. 讨论 | 第55-57页 |
| 第三节 EGFR酪氨酸激酶抑制剂对原代肠上皮细胞的影响 | 第57-60页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第57-58页 |
| ·药品与试剂 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·PI和Annexin V双染检测细胞凋亡 | 第57页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第57页 |
| ·实时定量PCR | 第57页 |
| ·大鼠原代肠上皮细胞的分离与培养 | 第57-58页 |
| 2. 实验结果 | 第58-60页 |
| ·原代大鼠肠上皮细胞的分离与培养 | 第58-59页 |
| ·厄洛替尼对原代肠上皮细胞炎症水平的影响 | 第59页 |
| ·厄洛替尼对原代肠上皮细胞通透性的影响 | 第59-60页 |
| 3. 讨论 | 第60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第三章 EGFR酪氨酸激酶抑制剂引起肠上皮细胞损伤的机制 | 第64-82页 |
| 绪言 | 第64-66页 |
| 第一节 EGFR酪氨酸激酶抑制剂对E-cadherin的影响 | 第66-72页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第66-67页 |
| ·药品与试剂 | 第66页 |
| ·Western blotting | 第66页 |
| ·ELISA法检测细胞培养上清的IL-6的含量 | 第66页 |
| ·免疫荧光染色 | 第66-67页 |
| ·ELSA法检测竞争性结合作用 | 第67页 |
| 2. 实验结果 | 第67-70页 |
| ·厄洛替尼导致IEC-6细胞内E-cadherin的迁移 | 第67-68页 |
| ·厄洛替尼不影响IEC-6细胞内E-cadherin和EGFR的结合 | 第68-69页 |
| ·厄洛替尼不影响IEC-6细胞内E-cadherinβ-catenin的结合 | 第69-70页 |
| 3. 讨论 | 第70-72页 |
| 第二节 厄洛替尼引发肠上皮细胞内质网应激 | 第72-77页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第72-73页 |
| ·药品与试剂 | 第72页 |
| ·Western blotting | 第72页 |
| ·ELISA法检测细胞培养上清的IL-6的含量 | 第72页 |
| ·免疫荧光染色 | 第72页 |
| ·免疫共沉淀 | 第72页 |
| ·细胞转染 | 第72-73页 |
| 2. 实验结果 | 第73-77页 |
| ·厄洛替尼引发肠上皮细胞内质网应激 | 第73页 |
| ·厄洛替尼时间依赖性的引发IEC-6内质网应激 | 第73-74页 |
| ·干扰CHOP下调IEC-6细胞内CHOP的表达 | 第74页 |
| ·干扰CHOP部分逆转厄洛替尼引发的E-cadherin的迁移 | 第74-75页 |
| ·干扰CHOP部分逆转厄洛替尼引发的炎症因子的上调 | 第75-77页 |
| 3. 讨论 | 第77页 |
| 小结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 结语 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
