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草坪草抗旱生理及相关基因的分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-21页
缩略词第21-23页
第一章 文献综述第23-52页
 1 植物抗旱机制及其分子生物学研究进展第23-41页
   ·植物形态结构特征与抗旱性第24-25页
     ·根系第24-25页
     ·叶片第25页
   ·干旱胁迫下植物生理生化变化第25-32页
     ·细胞膜结构的变化第26页
     ·渗透调节第26-27页
     ·抗氧化防御系统第27-28页
     ·干旱胁迫下植物光合作用的变化第28-29页
     ·内源激素的变化第29-30页
     ·干旱胁迫诱导蛋白的表达与植物的抗旱性第30-32页
   ·植物对干旱胁迫信号的感应和传导第32-33页
   ·干旱胁迫应答基因第33-35页
     ·功能性相关基因第33-34页
     ·调控性相关基因第34-35页
   ·分离差异表达基因的方法第35-41页
     ·mRNA 差异显示(DD-PCR)第35页
     ·cDNA 代表性差异分析(cDNA-RDA)第35-36页
     ·cDNA 扩增片段长度多态性(cDNA-AFLP)第36页
     ·基因表达系列分析(SAGE)第36-37页
     ·表达序列标签技术(EST)第37-38页
     ·抑制消减杂交技术(SSH)第38-40页
     ·cDNA 微阵列(cDNA Microarray)第40-41页
 2 本研究的目的、意义及主要内容第41-44页
   ·目的与意义第41-42页
   ·研究的主要内容第42-43页
     ·狗牙根抗旱性能比较与生理评价第42页
     ·草地早熟禾抗旱光合生理特性及其抗旱相关基因的筛选第42-43页
   ·技术路线第43-44页
 参考文献第44-52页
第二章 不同基因型狗牙根抗旱性能的生理评价第52-69页
 1 材料与方法第53-55页
   ·植物材料与培养第53页
   ·试验设计与处理第53-54页
   ·测定项目与方法第54页
     ·草坪目测质量第54页
     ·叶片相对含水量的测定第54页
     ·叶片细胞膜透性的测定(电导率法)第54页
     ·蛋白SDS-PAGE 及免疫印迹(Immunoblotting)第54页
   ·数据统计与分析第54-55页
 2 结果与分析第55-59页
   ·干旱胁迫下不同基因型狗牙根草坪外观质量的变化第55-56页
   ·干旱胁迫下不同基因型狗牙根叶片相对含水量的变化第56-57页
   ·干旱胁迫下不同基因型狗牙根叶片细胞膜透性的变化第57-58页
   ·干旱胁迫对不同基因型狗牙根叶片可溶性蛋白的影响第58页
   ·干旱胁迫对不同基因型狗牙根叶片脱水素蛋白表达的影响第58-59页
 3 小结与讨论第59-64页
   ·水分与草坪质量及其抗旱性第59-61页
   ·叶片相对含水量及保水能力与草坪草的抗旱性第61页
   ·叶片细胞膜稳定性与草坪草的抗旱性第61-62页
   ·可溶性蛋白图谱变化与草坪草的抗旱性第62页
   ·脱水素蛋白表达与草坪草的抗旱性第62-63页
   ·小结第63-64页
 参考文献第64-69页
第三章 不同抗旱性狗牙根品种离体叶片失水率及脱水素蛋白表达的差异第69-78页
 1 材料与方法第70-71页
   ·植物材料与培养第70页
   ·试验设计与处理第70页
   ·测定项目与方法第70-71页
     ·离体叶片失水率第70-71页
     ·蛋白免疫印迹(Immunoblotting)第71页
   ·数据统计与分析第71页
 2 结果与分析第71-72页
   ·狗牙根离体叶片失水率的差异第71页
   ·不同失水量离体叶片脱水素蛋白的表达第71-72页
 3 讨论与小结第72-74页
   ·离体叶片失水速率与草坪草的抗旱性第72-73页
   ·离体叶片脱水素表达与草坪草的抗旱性第73-74页
   ·小结第74页
 参考文献第74-78页
第四章 干旱胁迫下不同抗旱性狗牙根品种的光合生理差异第78-95页
 1 材料与方法第78-81页
   ·植物材料与培养第78-79页
   ·试验设计与处理第79页
   ·测定项目与方法第79-81页
     ·叶片相对含水量第79页
     ·土壤含水量的测定第79页
     ·叶片细胞膜透性(电导率法)第79-80页
     ·叶片光化学效率第80页
     ·光合作用第80页
     ·Rubisco 酶活性的测定第80-81页
     ·蛋白SDS-PAGE第81页
 2 结果与分析第81-87页
   ·干旱胁迫下植株和土壤水分状况及叶片细胞膜透性的变化第81-82页
   ·干旱胁迫对光合的影响第82-84页
   ·干旱胁迫对Rubisco 活性及活化率的影响第84-87页
   ·干旱胁迫对光合蛋白SDS-PAGE 图谱的影响第87页
 3 讨论与小结第87-90页
   ·光化学效率对干旱胁迫的反应第87-88页
   ·光合酶及光合蛋白对干旱胁迫的反应第88-89页
   ·干旱胁迫下光合作用的气孔限制与非气孔限制第89-90页
   ·小结第90页
 参考文献第90-95页
第五章 干旱胁迫及复水对草地早熟禾光合生理特性的影响第95-114页
 1 材料与方法第95-99页
   ·植物材料与培养第95-96页
   ·试验设计与处理第96页
   ·测定项目与方法第96-99页
     ·土壤含水量第96页
     ·叶片相对含水量第96-97页
     ·叶片光化学效率第97页
     ·光合响应曲线测定第97页
     ·光合响应曲线相关参数计算第97-98页
     ·Rubisco 活性测定第98-99页
   ·数据统计与分析第99页
 2 结果与分析第99-108页
   ·干旱及复水后土壤和植株水分状况第99-100页
   ·干旱及复水对光化学效率的影响第100-101页
   ·干旱及复水对叶片气体交换参数的影响第101-102页
   ·干旱及复水对Rubisco 活性及活化率的影响第102-104页
   ·干旱及复水对光合响应曲线的影响第104-106页
   ·干旱及复水对光合响应曲线特征参数的影响第106-108页
 3 讨论与小结第108-111页
   ·光合作用对干旱胁迫的反应:气孔与非气孔限制第108-109页
   ·复水对草地早熟禾叶片光合作用及光合参数的影响第109-110页
   ·小结第110-111页
 参考文献第111-114页
第六章 复水后CTKs 和KCl 对草地早熟禾叶片气孔开度及光合作用的影响第114-132页
 1 材料与方法第115-117页
   ·植物材料与培养第115页
   ·试验设计与处理第115-116页
   ·测定项目与方法第116-117页
     ·土壤含水量第116页
     ·叶片相对含水量第116页
     ·叶片光化学效率(Fv/Fm)第116页
     ·光合作用第116-117页
     ·气孔孔径第117页
   ·数据统计与分析第117页
 2 结果与分析第117-124页
   ·离体叶片脱水及复水气孔孔径的变化第117-120页
     ·细胞分裂素对脱水后复水草地早熟禾离体叶片气孔孔径的影响.第117页
     ·氯化钾对脱水后复水草地早熟禾离体叶片气孔孔径的影响第117-120页
   ·干旱胁迫及复水对草地早熟禾生理及气孔的影响第120-124页
     ·土壤及植株水分状况第120-121页
     ·叶片光化学效率的变化第121页
     ·光合作用的变化第121-123页
     ·干旱胁迫及复水对草地早熟禾叶片气孔孔径的影响第123-124页
     ·干旱及复水下草地早熟禾叶片气孔孔径与 P_n、g_s 及 Tr 的相关性第124页
 3 讨论与小结第124-128页
   ·CTKs 对干旱胁迫后复水叶片气孔再开放及光合作用的影响第127页
   ·KCl 对干旱胁迫后复水叶片气孔再开放及光合作用的影响第127-128页
   ·小结第128页
 参考文献第128-132页
第七章 干旱胁迫下草地早熟禾叶片差异表达基因的分离第132-165页
 1 材料与方法第132-133页
   ·植物材料与培养第132-133页
   ·试验设计与处理第133页
 2 试验方法第133-145页
   ·总RNA 的提取第133-134页
   ·mRNA 的分离第134-135页
   ·消减cDNA 文库的构建第135-144页
     ·cDNA 第一链的合成第135-136页
     ·cDNA 第二链的合成第136-137页
     ·Rsa I 酶切消化第137-138页
     ·接头连接第138-139页
     ·接头连接效率分析第139-140页
     ·第一轮杂交第140页
     ·第二轮杂交第140-141页
     ·第一轮PCR 扩增第141页
     ·第二轮PCR 扩第141-142页
     ·正反向差减cDNA 的克隆(T/A 克隆法)第142-143页
     ·菌液PCR 鉴定插入片段大小第143-144页
   ·阳性克隆序列定测及生物信息学分析第144页
   ·差异表达EST 的半定量PCR第144-145页
 3 结果与分析第145-152页
   ·总RNA 及m RNA 提取质量分析第145页
   ·SSH 文库构建及其质量检测第145-149页
     ·反转录及酶切效果检测第146页
     ·接头连接效率分析第146-147页
     ·抑制消减杂交结果分析第147-148页
     ·消减cDNA 文库插入片段大小检测第148-149页
   ·测序结果及其序列生物信息学分析第149页
   ·差异表达基因的功能分类第149-151页
   ·差异表达EST 半定量RT-PCR 分析第151-152页
 4 讨论与小结第152-160页
   ·SSH 文库的构建第152-153页
   ·干旱胁迫应答基因与草坪草的抗旱性第153-159页
     ·光合作用第153-154页
     ·新陈代谢第154-155页
     ·蛋白合成与降解第155页
     ·抗氧化及细胞防御第155-156页
     ·信号传递与转导第156-157页
     ·转录调控第157-158页
     ·跨膜转运和水分运输第158-159页
     ·渗透调节第159页
   ·小结第159-160页
 参考文献第160-165页
主要结论、创新点及后续工作第165-168页
 1. 主要结论第165-166页
 2. 创新之处第166-167页
 3. 本研究的后续工作第167-168页
论文发表及其它第168-170页
 1. 攻读博士期间发表的论文第168-169页
 2. 奖助学金第169页
 3. 学术会议第169-170页
致谢第170-172页
附录:差异表达ESTs 同源性分析及功能分类第172-183页

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