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红花FAD2基因家族的克隆及高油酸红花分子机制研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 文献综述第11-33页
   ·红花植物学和生态学特征第11-12页
   ·红花的起源和驯化第12-13页
   ·红花世界的分布和生产第13-14页
   ·红花的多种应用第14-16页
     ·药用的用途第14-15页
     ·红花的临床应用第15页
     ·牲畜饲料第15页
     ·食用第15-16页
     ·其他用途第16页
   ·油含量和品质第16-17页
   ·红花的未来第17页
   ·红花油的遗传工程第17-19页
     ·高硬脂酸红花油第17-18页
     ·低棕榈酸红花油第18页
     ·高油酸红花油第18页
     ·可可脂替代物第18-19页
     ·单一脂肪酸占主导地位的红花油第19页
   ·种子脂质的生物合成第19-22页
     ·主要油料作物的脂肪酸第19-20页
     ·植物的从头合成脂肪酸第20页
     ·脂肪酸链合成的终止和两个并行的脂质生物合成途径第20-21页
     ·质体外脂肪酸代谢第21-22页
   ·脂肪酸的去不饱和作用第22-25页
     ·△9 硬脂酰 ACP 脱氢酶第22页
     ·FAD2 酶的特性第22-24页
     ·FAD2 的多样化第24-25页
   ·跨膜去饱和酶的结构性质第25-26页
     ·跨膜酶识别基序的鉴定第25-26页
   ·油料作物脂肪酸组成基因工程研究进展第26页
     ·引进新基因第26页
     ·下调不需要性状基因的表达第26页
   ·miRNA 及其在植物中的调控作用第26-30页
     ·miRNA 简介第26-27页
     ·miRNA 的生物合成和功能第27-28页
     ·miRNA 作用模式第28-29页
     ·miRNA 自身平衡的调控第29页
     ·特异 miRNA 丰度和活性调控第29-30页
   ·温度对 FAD2 基因及植物脂质的效应第30-33页
     ·温度对 FAD2 基因表达影响第30-31页
     ·温度对脂类的不饱和度的影响第31-33页
第二章 红花中数量庞大并功能多样化的 FAD2 基因家族第33-53页
   ·引言第33-34页
   ·材料与方法第34-37页
     ·植物材料和生长条件第34页
     ·总 RNA 的提取和 cDNA 的合成第34页
     ·发育的胚中构建及筛选 cDNA 文库第34-35页
     ·非种子组织中表达的 FAD2 基因全长和开放阅读框的分离第35页
     ·DNA 的分离和 Southern 杂交分析第35-36页
     ·CtFAD2 基因 5′UTR 内含子的分离第36页
     ·实时定量 PCR 分析第36页
     ·酵母中 CtFAD2 基因的表达分析第36-37页
     ·烟草叶片中 CtFAD2 基因的瞬时表达第37页
     ·脂肪酸分析第37页
   ·结果第37-48页
     ·红花 CtFAD2 基因家族成员的克隆和测序分析第37-40页
     ·红花的 ctFAD2 基因家族基因组结构和系统进化第40-41页
     ·Southern blot 分析 CtFAD2 基因家族复杂性第41-42页
     ·CtFAD2 基因家族在红花不同组织中的表达谱分析第42-44页
     ·CtFAD2 基因家族在酵母中的表达分析第44-46页
     ·CtFAD2 基因在烟草叶子中的瞬时表达第46-48页
   ·讨论第48-52页
   ·结论第52-53页
第三章 深度测序分析红花高油酸突变体 ol 的 miRNA 表达谱第53-65页
   ·引言第53-54页
   ·材料与方法第54-55页
     ·植物材料和生长条件第54页
     ·小 RNA 的提取和小 RNA 测序第54页
     ·深度测序数据的初步分析第54页
     ·已知 miRNA 的鉴定和新 miRNA 的预测第54-55页
     ·小 RNA 的 Northern Blot 凝胶印迹分析第55页
     ·茎-环 RT-PCR 分析 miRNA 的表达第55页
   ·结果第55-62页
     ·野生型 HL 和高油酸 HO 红花发育胚中小 RNA 转录本的分析第55-57页
     ·红花中已知的 miRNA 的鉴定第57-60页
     ·红花中新 miRNA 的鉴定第60-61页
     ·HL 和 HO 基因型红花发育胚中 miRNA 表达差异第61-62页
   ·讨论第62-64页
   ·结论第64-65页
第四章 高油酸红花在不同温度中 CtFAD2 基因家族的表达和脂肪酸的变化第65-77页
   ·前言第65-66页
   ·材料与方法第66-68页
     ·植物材料和生长条件第66-67页
     ·总 RNA 的提取和 cDNA 的合成第67页
     ·实时荧光定量 PCR第67页
     ·脂肪酸组成分析第67-68页
   ·结果第68-73页
     ·温度对 HL 和 HO 发育中种子脂肪酸谱的影响第68-69页
     ·温度对 HL 和 HO 成熟种子中脂肪酸谱的影响第69-70页
     ·温度对 HL 和 HO 发育种子中 CtFAD2 基因表达的影响第70-71页
     ·温度对 HL 不同组织中表达的 CtFAD2 基因表达的影响第71-73页
   ·讨论第73-76页
   ·结论第76-77页
参考文献第77-89页
致谢第89-90页
在学期间公开发表的论文及专利情况第90-91页
附录第91-97页

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