| 中文摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 第一部分 围绕策略—结合EPR效应和肿瘤细胞外微酸环境 | 第20-66页 |
| 第一章 pHLIP修饰肿瘤细胞膜靶向pH敏感荧光探针纳米载药系统 | 第22-44页 |
| 1 材料和仪器 | 第23-24页 |
| ·材料和试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-30页 |
| ·萤光探针的化学合成 | 第24-27页 |
| ·游离萤光探针的pH敏感性 | 第27-28页 |
| ·肿瘤细胞膜靶向pH敏感萤光探针的合成 | 第28页 |
| ·肿瘤细胞膜靶向pH敏感萤光探针的pH敏感性 | 第28-29页 |
| ·体外肿瘤细胞显像效率评价 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-41页 |
| ·游离萤光探针的pH敏感性 | 第30-32页 |
| ·肿瘤细胞膜靶向萤光探针的pH敏感性 | 第32页 |
| ·游离探针对生理环境下正常细胞和微酸环境下肿瘤细胞的显像差异 | 第32-33页 |
| ·DPP-DYE7对生理环境正常细胞和微酸环境U87人脑胶质瘤细胞的显像差异 | 第33-35页 |
| ·DPP-DYE2对生理环境正常细胞和微酸环境下U87人脑胶质瘤细胞的显像差异 | 第35-36页 |
| ·DPP-DYE9A对生理环境正常细胞和微酸环境U87人脑胶质瘤细胞的显像差异 | 第36-37页 |
| ·DPP-DYE7对生理环境正常细胞和微酸环境Bel-7402人肝肿瘤细胞的显像差异 | 第37-38页 |
| ·DPP-DYE2对生理环境正常细胞和微酸环境Bel-7402人肝肿瘤细胞的显像差异 | 第38-39页 |
| ·DPP-DYE9A对生理环境正常细胞和微酸环境Bel-7402人肝肿瘤细胞的显像差异 | 第39-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-42页 |
| ·游离pH敏感智能萤光探针 | 第41页 |
| ·肿瘤靶向pH智能萤光诊断纳米载药系统 | 第41-42页 |
| 5. 小结 | 第42-44页 |
| 第二章 pHLIP修饰肝肿瘤靶向载小分子干扰RNA纳米递释系统 | 第44-66页 |
| 第一节 pHLIP修饰肝肿瘤靶向载小分子干扰RNA纳米递释系统的制备和体外研究 | 第45-57页 |
| 1 材料和仪器 | 第45-46页 |
| ·材料和试剂 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·细胞株 | 第45-46页 |
| 2. 实验方法 | 第46-50页 |
| ·DGL-PEG-pHLIP的合成与结构鉴定 | 第46页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF纳米载药系统的制备与表征 | 第46-48页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF的体外评价 | 第48-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-56页 |
| ·DGL-PEG-pHLIP载体~1H-NMR分析结果 | 第50页 |
| ·DGL-PEG-pHLIP载体UV-Vis分析结果 | 第50-51页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF的电镜表征 | 第51-52页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF的粒径和ζ电位表征 | 第52-53页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF与Bel-7402细胞结合 | 第53-54页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF在酸性条件下结合Bel-7402细胞和内化机制研究 | 第54-55页 |
| ·载报告基因的pHLIP-NP/pEGFP在Bel-7402细胞的表达效率评价 | 第55页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF在Bel-7402细胞上下调VEGF mRNA效率评价 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56页 |
| 5. 小结 | 第56-57页 |
| 第二节 pHLIP修饰肝肿瘤靶向载小分子干扰RNA纳米递释系统的体内分布及药效学评价 | 第57-66页 |
| 1 材料和仪器 | 第57-58页 |
| ·材料和试剂 | 第57页 |
| ·仪器 | 第57页 |
| ·实验动物 | 第57-58页 |
| 2. 实验方法 | 第58-60页 |
| ·皮下移植肝肿瘤裸鼠模型的建立 | 第58页 |
| ·小干扰RNA纳米载药系统在皮下移植肝肿瘤裸鼠的体内分布 | 第58页 |
| ·报告基因纳米载药系统在皮下移植肝肿瘤的定性表达情况 | 第58页 |
| ·小干扰RNA纳米载药系统对皮下肝肿瘤VEGF mRNA和蛋白的下调 | 第58-59页 |
| ·小干扰RNA纳米载药系统对皮下肝肿瘤生长抑制效果的评价 | 第59-60页 |
| ·小干扰RNA纳米载药系统抑制皮下肝肿瘤生长机制研究 | 第60页 |
| 3. 实验结果 | 第60-64页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF在荷皮下肝肿瘤模型裸鼠的体内分布 | 第60页 |
| ·载报告基因pRFP的pHLIP-NP/pRFP在荷皮下肝肿瘤模型裸鼠上的肿瘤内表达 | 第60-61页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF对皮下肝肿瘤VEGF mRNA的下调 | 第61-62页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF对皮下肝肿瘤VEGF蛋白的沉默 | 第62页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF对皮下肝肿瘤生长抑制效果的评价 | 第62-63页 |
| ·pHLIP-NP/shVEGF抑制皮下肝肿瘤生长机制研究 | 第63-64页 |
| 4. 讨论 | 第64页 |
| 5. 小结 | 第64-66页 |
| 第二部分 围绕策略二结合EPR效应和肿瘤细胞高表达受体的主动靶向 | 第66-130页 |
| 第三章 新靶向头基的筛选 | 第68-74页 |
| 1 材料和仪器 | 第69页 |
| ·材料和试剂 | 第69页 |
| ·仪器 | 第69页 |
| ·细胞株 | 第69页 |
| 2. 实验方法 | 第69-70页 |
| ·PAMAM-PEG-T7靶向配体修饰的纳米载体高分子的合成 | 第69-70页 |
| ·PAMAM-PEG-T12的合成 | 第70页 |
| ·PAMAM-PEG-Tf的合成 | 第70页 |
| ·BODIOY-PAMAM-PEG-T7、-T12和-Tf的合成 | 第70页 |
| ·BODIOY-PAMAM-PEG-T7、-T12和-Tf在Bel-7402细胞上的摄取 | 第70页 |
| 3 实验结果 | 第70-72页 |
| ·PAMAM-PEG-T7载体~1H-NMR分析结果 | 第70-71页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在Bel-7402细胞上的摄取 | 第71-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-73页 |
| ·靶向头基修饰纳米载体高分子 | 第72页 |
| ·靶向头基修饰纳米载体高分子的细胞摄取 | 第72-73页 |
| 5. 小结 | 第73-74页 |
| 第四章 T7修饰的肝肿瘤靶向核磁共振造影剂纳米递送系统 | 第74-92页 |
| 第一节 T7修饰的肝肿瘤靶向核磁共振造影剂纳米递送系统的制备和体外研究 | 第75-84页 |
| 1 材料和仪器 | 第75页 |
| ·材料和试剂 | 第75页 |
| ·仪器 | 第75页 |
| ·细胞株 | 第75页 |
| 2. 实验方法 | 第75-77页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7磁共振造影剂纳米载药系统的合成、结构鉴定与体外评价 | 第75-77页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7的体外评价 | 第77页 |
| 3 实验结果 | 第77-81页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7合成~1H-NMR和ICP-AES分析结果 | 第77-78页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7弛豫率评价 | 第78-79页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7溶血性评价 | 第79页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在Bel-7402人肝肿瘤细胞上的摄取 | 第79-80页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在C6大鼠脑胶质瘤细胞上的摄取 | 第80-81页 |
| 4. 讨论 | 第81-83页 |
| ·合成的载体高分子 | 第81-82页 |
| ·载体高分子的细胞摄取 | 第82页 |
| ·载GdDTPA的磁共振诊断系统 | 第82-83页 |
| 5. 小结 | 第83-84页 |
| 第二节 T7修饰的肝肿瘤靶向核磁共振造影剂纳米递送系统的体内分布及诊断效果评价 | 第84-92页 |
| 1 材料和仪器 | 第84页 |
| ·材料和试剂 | 第84页 |
| ·仪器 | 第84页 |
| ·实验动物 | 第84页 |
| 2. 实验方法 | 第84-85页 |
| ·荷原位移植脑胶质瘤模型裸鼠的建立 | 第84页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在荷皮下移植肝肿瘤模型裸鼠上的体内分布 | 第84-85页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在原位移植脑胶质瘤模型裸鼠上的体内分布 | 第85页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7对皮下移植肝肿瘤的MRI诊断效果评价 | 第85页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7对原位移植脑胶质瘤的诊断效果评价 | 第85页 |
| 3. 实验结果 | 第85-90页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在荷肝肿瘤模型裸鼠上的体内分布 | 第85-87页 |
| ·PAMAM-PEG-T7在荷脑胶质瘤模型裸鼠上的体内分布 | 第87-88页 |
| ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7体内诊断效果考察 | 第88-90页 |
| 4. 讨论 | 第90-91页 |
| 5. 小结 | 第91-92页 |
| 第五章 T7修饰的肝肿瘤靶向阿霉素纳米递释系统 | 第92-108页 |
| 第一节 T7修饰的肝肿瘤靶向阿霉素纳米递释系统的制备和体外研究 | 第93-101页 |
| 1 材料和仪器 | 第93页 |
| ·材料和试剂 | 第93页 |
| ·仪器 | 第93页 |
| ·细胞株 | 第93页 |
| 2. 实验方法 | 第93-95页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX的制备、结构表征及体外性质评价 | 第93-94页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX的体外评价 | 第94-95页 |
| 3 实验结果 | 第95-99页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX的制备及包封率测定 | 第95-96页 |
| ·PAMAM-PEG-T7对DOX的包封机制 | 第96页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX中DOX的体外释放及机制 | 第96-97页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX纳米载药系统的电镜表征 | 第97页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX的电镜和粒径表征 | 第97-98页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX纳米载药系统在Bel-7402细胞上的摄取 | 第98-99页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX纳米载药系统诱导Bel-7402细胞凋亡效果评价 | 第99页 |
| 4. 讨论 | 第99-100页 |
| 5. 小结 | 第100-101页 |
| 第二节 T7修饰的肝肿瘤靶向阿霉素纳米递释系统的体内分布及药效学评价 | 第101-108页 |
| 1 材料和仪器 | 第101页 |
| ·材料和试剂 | 第101页 |
| ·仪器 | 第101页 |
| ·实验动物 | 第101页 |
| 2. 实验方法 | 第101-102页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的离体成像 | 第101页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的药动学和组织分布 | 第101-102页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX抗皮下移植肝肿瘤药效学及毒性评价 | 第102页 |
| 3. 实验结果 | 第102-106页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的药动学 | 第102-103页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的离体成像 | 第103-104页 |
| ·PAMAM-PEG-TT/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的组织分布 | 第104-105页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/DOX抗皮下移植肝肿瘤药效学及毒性评价 | 第105-106页 |
| 4. 讨论 | 第106-107页 |
| 5. 小结 | 第107-108页 |
| 第六章 T7修饰的肝肿瘤靶向TRAIL基因DOX共输送纳米递释系统 | 第108-130页 |
| 第一节 T7修饰的肝肿瘤靶向TRAIL基因DOX共输送纳米递释系统的制备和体外研究 | 第110-122页 |
| 1 材料和仪器 | 第110页 |
| ·材料和试剂 | 第110页 |
| ·仪器 | 第110页 |
| ·细胞株 | 第110页 |
| 2. 实验方法 | 第110-113页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX的制备、结构表征与体外表征 | 第110-112页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统的体外评价 | 第112-113页 |
| 3 实验结果 | 第113-120页 |
| ·pORF-hTRAIL-DOX复合物的表征 | 第113-114页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第114-115页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统的电镜表征 | 第115页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统的粒径表征 | 第115-116页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统中DOX的体外释放行为考察 | 第116页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统在Bel-7402细胞上的摄取 | 第116-118页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pEGFP-N2-DOX体外绿色荧光蛋白报告基因表达效果评价 | 第118页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX体外凋亡诱导效果评价 | 第118-120页 |
| 4. 讨论 | 第120-121页 |
| 5. 小结 | 第121-122页 |
| 第二节 T7修饰的肝肿瘤靶向TRAIL基因DOX共输送纳米递释系统的体内分布及药效学评价 | 第122-130页 |
| 1 材料和仪器 | 第122页 |
| ·材料和试剂 | 第122页 |
| ·仪器 | 第122页 |
| ·实验动物 | 第122页 |
| 2. 实验方法 | 第122-124页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX的制备 | 第122页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的体内分布 | 第122-123页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX的药效学及毒性评价 | 第123-124页 |
| 3. 实验结果 | 第124-127页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX在皮下肝肿瘤模型裸鼠上的体内分布 | 第124页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX体内抑瘤率考察 | 第124-126页 |
| ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX体内毒性考察 | 第126-127页 |
| 4. 讨论 | 第127页 |
| 5. 小结 | 第127-130页 |
| 第三部分 围绕策略三结合EPR效应、肿瘤细胞外微酸环境和主动靶向 | 第130-166页 |
| 第七章 肿瘤组织细胞外微酸环境控制开启的肝肿瘤主动靶向共输送纳米递释系统 | 第132-166页 |
| 第一节 肿瘤组织细胞外微酸环境控制开启的肝肿瘤主动靶向共输送纳米递释系统的制备和体外研究 | 第134-153页 |
| 1 材料和仪器 | 第134页 |
| ·材料和试剂 | 第134页 |
| ·仪器 | 第134页 |
| ·细胞株 | 第134页 |
| 2. 实验方法 | 第134-137页 |
| ·DPThD的合成、结构表征 | 第134-135页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX的制备、形态表征 | 第135-136页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX纳米载药系统的体外评价 | 第136-137页 |
| 3 实验结果 | 第137-150页 |
| ·载体设计及分组 | 第137-138页 |
| ·DPT的氢谱表征 | 第138-139页 |
| ·DPTD结构表征 | 第139-140页 |
| ·DPThD结构表征 | 第140-145页 |
| ·shCDH17-DOX复合物的表征 | 第145-146页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX体内行为模拟 | 第146-147页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第147页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX纳米载药系统的电镜表征 | 第147-148页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX的粒径和电位表征 | 第148页 |
| ·DPThD在Bel-7402人肝肿瘤细胞上的摄取 | 第148-149页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX在Bel-7402细胞上的摄取 | 第149-150页 |
| ·DPThD/pEGFP-N2-DOX体外绿色荧光蛋白报告基因表达效果评价 | 第150页 |
| 4. 讨论 | 第150-151页 |
| 5. 小结 | 第151-153页 |
| 第二节 肿瘤组织细胞外微酸环境控制开启的肝肿瘤主动靶向共输送纳米递释系统的体内分布和抑瘤率评价 | 第153-166页 |
| 1 材料和仪器 | 第153页 |
| ·材料和试剂 | 第153页 |
| ·仪器 | 第153页 |
| ·实验动物 | 第153页 |
| 2. 实验方法 | 第153-157页 |
| ·原位移植肝肿瘤裸鼠模型的建立 | 第153-154页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX的制备 | 第154页 |
| ·DPThD/shCDH17在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的体内分布 | 第154-155页 |
| ·萤光活体成像表征DPThD/shCDH17在荷原位肝肿瘤裸鼠体内分布 | 第155页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX的药效学及毒性评价 | 第155-156页 |
| ·原位TUNEL检测原位肝肿瘤凋亡 | 第156-157页 |
| 3. 实验结果 | 第157-163页 |
| ·DPThD/shCDH17在荷皮下肝肿瘤裸鼠的体内分布 | 第157-159页 |
| ·DPThD/shCDH17在荷原位肝肿瘤裸鼠的体内分布 | 第159-160页 |
| ·DPThD/shCDH17-DOX延长荷原位肝肿瘤裸鼠存活时间 | 第160-161页 |
| ·荷原位肝肿瘤裸鼠第五次给药30d后变化 | 第161页 |
| ·荷原位肝肿瘤裸鼠第五次给药30d后钙粘蛋白CDH17表达情况 | 第161-162页 |
| ·体内毒性考察 | 第162页 |
| ·荷原位肝肿瘤裸鼠第五次给药30d后原位TUNEL检测凋亡 | 第162-163页 |
| 4. 讨论 | 第163-165页 |
| 5. 小结 | 第165-166页 |
| 全文总结 | 第166-168页 |
| 创新性 | 第168-169页 |
| 中英文缩写对照 | 第169-172页 |
| 参考文献 | 第172-184页 |
| 综述 | 第184-197页 |
| 参考文献 | 第192-197页 |
| 论文成果 | 第197-198页 |
| 专利申请 | 第198-199页 |
| 获奖荣誉 | 第199-200页 |
| 致谢 | 第200-201页 |
