| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-37页 |
| 第一章 猪流感病毒NS1蛋白的研究进展 | 第11-29页 |
| 1 猪流感概述 | 第11-13页 |
| 2 猪流感病毒编码的蛋白特性 | 第13-17页 |
| 3 NS1蛋白结构和功能 | 第17-25页 |
| ·NS1蛋白的结构特征 | 第17-19页 |
| ·NS1蛋白的功能 | 第19-23页 |
| ·NS1蛋白抑制宿主细胞蛋白的合成 | 第19页 |
| ·NS1蛋白促进病毒蛋白的合成与表达 | 第19-20页 |
| ·NS1蛋白颉颃干扰素及肿瘤坏死因子 | 第20-22页 |
| ·NS1蛋白影响宿主细胞凋亡 | 第22-23页 |
| ·NS1蛋白对流感病毒致病性和毒力的影响 | 第23-25页 |
| ·NS1蛋白与病毒致病性 | 第23-24页 |
| ·NS1蛋白与病毒毒力 | 第24-25页 |
| 4 NS1蛋白的应用 | 第25-29页 |
| ·NS1蛋白在鉴别诊断中的应用 | 第25-26页 |
| ·NS1蛋白作为抗病毒治疗的靶点 | 第26页 |
| ·NS1基因突变重组病毒对肿瘤的治疗 | 第26-27页 |
| ·针对NS1蛋白设计新型疫苗 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-37页 |
| 第二篇 试验研究 | 第37-75页 |
| 第二章 猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/2007株NS1蛋白关键氨基酸位点对细胞定位的影响 | 第37-51页 |
| 摘要 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·NS1及其突变体真核表达载体的构建 | 第39-41页 |
| ·引物设计 | 第39-40页 |
| ·目的基因扩增与回收 | 第40页 |
| ·真核重组质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的制备、鉴定及定量 | 第41页 |
| ·脂质体Lipofectamine~(TM) 2000介导瞬时转染细胞 | 第41页 |
| ·Westen blot鉴定NS1重组蛋白的表达 | 第41-42页 |
| ·间接免疫荧光技术分析NS1及其突变体蛋白的细胞定位 | 第42-43页 |
| ·免疫沉淀分析NS1蛋白和NP蛋白相互作用 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-47页 |
| ·NS1及其突变体真核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·Westen blot检测NS1及NS1突变体蛋白 | 第44-45页 |
| ·NS1及NS1突变体蛋白在真核细胞中的定位分析 | 第45-46页 |
| ·免疫沉淀分析NS1蛋白和NP蛋白相互作用 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| Abstract | 第50-51页 |
| 第三章 猪流感病毒NS1蛋白关键氨基酸位点对细胞因子影响 | 第51-63页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·脂质体Lipofectamine~(TM)2000介导瞬时转染细胞 | 第52-53页 |
| ·IFN-α/β和TNF-α分析 | 第53-54页 |
| ·提取细胞总RNA | 第53页 |
| ·RT-PCR扩增IFN-α/β和TNF-α基因 | 第53页 |
| ·ELISA检测IFN-α/β和TNF-α蛋白表达水平 | 第53-54页 |
| 2 结果 | 第54-57页 |
| ·IFN-α/βmRNA和TNF-αmRNA转录水平 | 第54-56页 |
| ·IFN-α/β和TNF-α ELISA检测 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-61页 |
| 参考文献 | 第61-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |
| 第四章 不同毒株NS1蛋白对细胞IFN-α/β和TNF-α表达的影响 | 第63-75页 |
| 摘要 | 第63-64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·病毒、细胞及实验小鼠 | 第64页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| ·ELISA试剂盒检测IFN-α/β和TNF-α蛋白 | 第64-65页 |
| ·BALB/c小鼠免疫及分组 | 第65页 |
| ·小鼠淋巴细胞分离 | 第65页 |
| ·流式细胞仪测定T细胞亚群 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-68页 |
| ·IFN-α/β和TNF-α ELISA检测结果 | 第65-67页 |
| ·流式细胞仪测定T细胞亚群 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| Abstract | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
