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病毒基因组连接蛋白影响烟草脉带花叶病毒致病性的机制

缩略词表第1-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-14页
1 前言第14-27页
   ·马铃薯 Y 病毒属病毒(potyviruses)基因组结构及蛋白功能第14-16页
   ·马铃薯 Y 病毒属病毒 VPg 的功能第16-21页
     ·VPg 的亚细胞定位第16-17页
     ·VPg 参与病毒复制第17-18页
     ·VPg 参与病毒翻译第18-19页
     ·VPg 参与病毒移动第19-20页
     ·VPg 的磷酸化作用第20-21页
   ·植物 eIF4E 与病毒的互作第21-25页
     ·eIF4E 在植物中的功能第21-22页
     ·植物 e1F4E 在病毒侵染中的作用第22页
     ·eIF4E 参与 potyviruses 侵染的作用机制第22-23页
     ·Potyviruses 选择性地与 eIF4E 基因家族成员特异性互作第23-24页
     ·eIF4E 在植物抗病上的应用第24-25页
   ·本论文的研究目的第25-27页
     ·烟草脉带花叶病毒的研究进展第25-26页
     ·本论文的研究目的第26-27页
2 材料与方法第27-42页
   ·实验材料第27-28页
     ·供试植物第27页
     ·菌株和载体第27页
     ·生化及分子生物学试剂第27页
     ·主要实验仪器第27-28页
   ·实验方法第28-42页
     ·定点突变方法第28-31页
     ·病毒接种方法第31-33页
     ·注射叶片及系统侵染叶片的 RNA 检测第33-34页
     ·利用 ELISA 测定病毒浓度第34-35页
     ·实时荧光 PCR 测定病毒 RNA 积累水平第35-36页
     ·突变体侵染烟草后细胞间移动情况分析第36页
     ·蛋白互作的 YTHS 和 BiFC 分析第36-42页
3 结果与分析第42-72页
   ·突变位点的筛选第42-45页
     ·突变位点的选择及突变引物的设计第42-44页
     ·突变质粒的获得与序列测定第44-45页
   ·VPg 突变体在本氏烟上的致病性第45-56页
     ·突变体在本氏烟上的症状第45-51页
     ·突变体浸润本氏烟后的 RT-PCR 检测第51-52页
     ·突变体对病毒浓度的影响第52-53页
     ·突变体对病毒 RNA 积累水平的影响第53-54页
     ·突变对病毒在本氏烟细胞间移动能力的影响第54-56页
   ·TVBMV VPg 及其突变体自身互作第56-59页
     ·YTHS 分析结果第56-58页
     ·BiFC 分析结果第58-59页
   ·VPg 及其突变体与 eIF4E 的互作第59-66页
     ·eIF4E 和 eIF(iso)4E 基因的克隆第59-60页
     ·VPg 与 eIF4E 和 eIF(iso)4E 的互作分析第60-62页
     ·VPg 突变体与 eIF(iso)4E-2 基因互作的 YTHS 分析第62-65页
     ·VPg 突变体与 eIF(iso)4E-2 基因互作的 BiFC 分析第65-66页
   ·VPg 突变对 TVBMV 在普通烟上致病性的影响第66-72页
     ·TVBMV 及突变体在普通烟上的症状第66-71页
     ·TVBMV 及 VPg 突变体在普通烟中的病毒浓度分析第71-72页
4 结论与讨论第72-78页
   ·关于突变位点的筛选第72-73页
   ·不同位点的突变对病毒致病性的影响第73-78页
     ·VPg 第 10、40 和 54 位的突变对病毒致病性的影响第73-74页
     ·VPg 第 42 和 45 位的突变对病毒致病性的影响第74页
     ·VPg 第 64 位的突变对病毒致病性的影响第74-75页
     ·VPg 第 183 位的突变对病毒致病性的影响第75-76页
     ·TVBMV VPg 与 eIF(iso)4E 的互作第76-78页
参考文献第78-94页
致谢第94页

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