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不同抗螨性能东方蜜蜂obp3基因的克隆与表达变化规律的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
文献综述第11-24页
 1 蜜蜂的抗螨研究进展第11-13页
   ·螨的危害第11-12页
   ·蜜蜂抗螨机制的研究进展第12-13页
 2 嗅觉在抗螨机制中的作用第13页
 3 OBPs 的研究进展第13-17页
 4 obp3 研究进展第17-19页
 5 荧光定量技术在基因表达规律中的应用第19-20页
   ·荧光定量 PCR 技术的原理第19页
   ·荧光定量 PCR 技术的种类第19页
   ·定量方法第19-20页
   ·荧光定量 PCR 技术在其它昆虫及蜜蜂研究中的应用第20页
 6 原核表达载体与多克隆抗体概述第20-23页
   ·原核表达载体调控原件第21页
   ·原核表达载体构建第21-22页
   ·多克隆抗体技术第22-23页
 7 本研究的目的与意义第23-24页
引言第24-25页
1 材料与方法第25-35页
   ·主要试剂的配制第25-27页
   ·实验材料第27页
     ·试验动物第27页
     ·蜜蜂解剖第27页
     ·试剂第27页
   ·实验方法第27-35页
     ·总 RNA 抽提第27-28页
     ·cDNA 的合成第28-29页
     ·DNA 片段的克隆测序第29-31页
     ·实时荧光定量 PCR第31-32页
     ·东方蜜蜂 OBP3 蛋白生物信息学分析第32页
     ·东方蜜蜂 obp3 多克隆抗体的制备第32-35页
2 结果与分析第35-51页
   ·总 RNA 的提取与检测第35-36页
   ·东方蜜蜂 obp3 基因克隆第36-39页
   ·不同昆虫 obp3 基因系统进化树的构建第39-40页
   ·东方蜜蜂 obp3 基因 mRNA 时空表达水平的变化第40-44页
   ·生物信息学分析结果第44-49页
     ·蛋白质理化性质分析第44页
     ·卷曲螺旋分析第44-45页
     ·跨膜区分析第45页
     ·氨基酸疏水性分析第45-46页
     ·蛋白质二级结构预测第46页
     ·蛋白质三级结构预测第46-47页
     ·信号肽预测第47-48页
     ·亚细胞定位第48-49页
   ·原核表达载体 pET-OBP3 的酶切鉴定及测序第49-50页
   ·Western blot 结果第50-51页
3 讨论第51-55页
   ·实验材料的选择第51页
   ·obp3 基因克隆结果分析讨论第51-52页
   ·obp3 表达规律第52-53页
   ·多抗方法第53-55页
4 结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
作者简介第62-63页
研究生阶段发表文章第63页

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