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天然抗氧化剂对节球藻毒素诱导的鱼体免疫细胞毒效应的保护作用及机理研究

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
插图和附表清单第10-11页
目录第11-14页
第一章 藻毒素对鱼的毒效应研究进展第14-25页
   ·藻毒素的污染化学特征第14-16页
   ·藻毒素对鱼类的生态毒效应第16-21页
     ·肝肾毒性第17-18页
     ·免疫毒性第18-19页
     ·发育生殖毒性第19-20页
     ·遗传毒性第20-21页
   ·天然抗氧化剂介导的解毒机理研究第21-23页
     ·藻毒素介导的细胞氧化应激作用第21页
     ·槲皮素第21-22页
     ·原花青素第22页
     ·表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)第22-23页
   ·本文研究目标和研究思路第23-25页
     ·研究目标第23-24页
     ·研究思路第24-25页
第二章 节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞的凋亡毒效应研究第25-34页
   ·前言第25-26页
   ·材料与方法第26-28页
     ·试剂和毒素第26页
     ·试验鱼种第26页
     ·试验仪器第26-27页
     ·淋巴细胞分离与诱导第27页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡率第27页
     ·共聚焦激光显微镜观察细胞凋亡第27页
     ·透射电镜观察细胞凋亡第27-28页
     ·DNA-Ladder检测细胞凋亡第28页
     ·数据分析第28页
   ·结果第28-31页
     ·节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡流式细胞仪检测第28-29页
     ·节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡共聚焦激光显微镜观察第29-30页
     ·节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡透射电镜观察第30-31页
     ·节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡DNA-Ladder检测第31页
   ·讨论第31-32页
   ·结论第32-34页
第三章 节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡的分子机理研究第34-48页
   ·前言第34页
   ·材料与方法第34-38页
     ·试剂和毒素第34-35页
     ·试验鱼种第35页
     ·试验仪器第35页
     ·淋巴细胞分离与诱导第35页
     ·流式细胞仪检测胞内钙离子变化规律第35-36页
     ·流式细胞仪检测胞内ROS变化规律第36页
     ·流式细胞仪检测线粒体膜电位变化规律第36页
     ·Caspase3/8/9活性测定第36页
     ·Bax/Bcl-2基因表达测定第36-38页
     ·Bax/Bcl-2蛋白表达测定第38页
     ·数据分析第38页
   ·结果第38-44页
     ·节球藻毒素对鲫鱼淋巴细胞内钙离子的影响第38-39页
     ·节球藻毒素对鲫鱼淋巴细胞内ROS的影响第39-40页
     ·节球藻毒素对鲫鱼淋巴细胞线粒体膜电位的影响第40-41页
     ·节球藻毒素对鲫鱼淋巴细胞内Caspase-3/8/9活性的影响第41-42页
     ·节球藻毒素对鲫鱼淋巴细胞内Bax/Bcl-2基因表达影响第42-43页
     ·节球藻毒素对鲫鱼淋巴细胞内Bax/Bcl-2蛋白表达影响第43-44页
   ·讨论第44-46页
   ·结论第46-48页
第四章 EGCG对节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞毒性的抑制作用研究第48-60页
   ·前言第48-49页
   ·材料与方法第49-51页
     ·试剂和毒素第49页
     ·试验鱼种第49页
     ·试验仪器第49页
     ·淋巴细胞分离与诱导第49-50页
     ·流式细胞仪检测胞内ROS变化规律第50页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)WST-1法测定第50页
     ·过氧化氢酶(CAT)活性测定第50页
     ·微量还原型谷胱甘肽(GSH)测定第50-51页
     ·微量丙二醛(MDA)测定试剂盒第51页
     ·数据分析第51页
   ·结果第51-56页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内ROS含量影响第51-52页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内SOD活性影响第52-53页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内CAT活性影响第53-54页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内GSH含量影响第54-55页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内MDA水平影响第55-56页
   ·讨论第56-58页
   ·结论第58-60页
第五章 EGCG对节球藻毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡的抑制机理研究第60-70页
   ·前言第60-61页
   ·材料与方法第61-63页
     ·试剂和毒素第61页
     ·试验鱼种第61页
     ·试验仪器第61页
     ·淋巴细胞分离与诱导第61-62页
     ·流式细胞仪检测线粒体膜电位变化规律第62页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡率第62页
     ·Westem blot蛋白表达测定第62页
     ·数据分析第62-63页
   ·结果第63-67页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞线粒体膜电位的影响第63-64页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞凋亡率的影响第64页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内bax/bcl-2蛋白表达的影响第64-66页
     ·EGCG对节球藻毒素诱导的鲫鱼淋巴细胞内Caspase-3蛋白表达的影响第66-67页
   ·讨论第67-68页
   ·结论第68-70页
第六章 研究结论、创新点与展望第70-72页
   ·研究结论第70-71页
   ·创新点第71页
   ·展望第71-72页
参考文献第72-95页
作者简历第95页

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