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拟南芥β-葡萄糖苷酶BG3与耐旱性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
缩写词第7-11页
1 前言第11-19页
   ·逆境胁迫对植物的伤害第11-12页
   ·植物的干旱应答反应与 ABA 的关系第12-14页
   ·干旱胁迫下 ABA 参与气孔运动的调节第14-15页
   ·葡萄糖苷酶与 ABA 代谢第15-18页
     ·葡萄糖苷酶研究进展第15-16页
     ·ABA 的合成和代谢第16页
     ·ABA-GE 的形成第16-17页
     ·ABA-GE 被水解释放 ABA 的研究第17-18页
   ·立题依据第18-19页
2 材料与方法第19-34页
   ·实验仪器设备第19页
   ·实验所用材料、载体以及菌株第19页
     ·材料第19页
     ·质粒载体与菌株第19页
   ·常用实验试剂第19-20页
   ·常用培养基及试剂的配制方法第20-21页
     ·常用培养基的配制第20页
     ·常用溶液的配制第20-21页
     ·DNA 抽提液第21页
     ·拟南芥总蛋白提取 buffer 配方第21页
     ·拟南芥脱落酸提取及测定相关溶液第21页
     ·抗生素的配制第21页
   ·实验方法第21-34页
     ·材料的培养方法第21-22页
     ·拟南芥基因组 DNA 提取方法第22页
     ·拟南芥总 RNA 的提取(Trizol 法)第22-23页
     ·反转录进行拟南芥 cDNA 的制备第23页
     ·目的基因片段的扩增第23-24页
     ·质粒的提取第24-25页
     ·酶切产物的回收第25-26页
     ·连接第26页
     ·大肠杆菌感受态的制备与转化第26-27页
     ·重组质粒的鉴定第27页
     ·农杆菌感受态的制备与转化第27-28页
     ·PEG 介导的拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达方法第28-29页
     ·GFP 荧光的观察第29页
     ·GUS 染色方法第29-30页
     ·离体植株失水率的测定第30页
     ·远红外热图的分析第30页
     ·萌发率的统计第30-31页
     ·拟南芥根细胞的质壁分离实验第31页
     ·脱落酸的酶联免疫吸附测定法(ELISA)第31-32页
     ·植物总蛋白提取方法第32-33页
     ·Western第33-34页
3 结果与分析第34-48页
   ·突变体材料的获得及鉴定第34-35页
   ·T-DNA 插入对基因 BG3 表达的影响第35页
   ·突变体 bg3 的表型分析第35-41页
     ·胁迫下突变体 bg3 和 WT 萌发及子叶生长表型第35-37页
     ·突变体 bg3 耐旱性分析第37-38页
     ·bg3 和 WT 的气孔开闭分析第38-39页
     ·bg3 和 WT 离体失水和红外表型第39-40页
     ·突变体 bg3 和 WT 中游离态 ABA 含量的测定第40-41页
   ·BG3 基因参与多种胁迫应答第41页
   ·BG3 的组织定位第41-43页
     ·pBG3:: pCAMBIA1381 载体的构建及转基因植株的筛选第41-42页
     ·BG3 基因的组织表达分析第42-43页
   ·BG3 的亚细胞定位第43-46页
     ·pHBT::BG3::GFP 载体的构建第43-44页
     ·BG3 蛋白亚细胞定位分析第44-46页
   ·BG3::MYC 转基因植株的鉴定第46-48页
     ·S1300::BG3::MYC 载体的构建第46-47页
     ·BG3::MYC 转基因植株的鉴定第47-48页
4 讨论第48-50页
结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页

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