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华癸中慢生根瘤菌7653R BacA互作蛋白的初步鉴定及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-21页
   ·根瘤的两种基本类型第10-11页
   ·根瘤菌类菌体分化过程与特点第11-13页
   ·类菌体分化的决定因素研究进展第13-21页
     ·bacA基因在类菌体分化中的功能研究第14-16页
     ·NCR多肽在类菌体分化中的功能研究第16-21页
2.材料与方法第21-36页
   ·实验材料第21-32页
     ·供试菌株和质粒第21-23页
     ·培养基第23-26页
     ·酶、试剂和试剂盒第26-27页
     ·抗生素第27页
     ·常用缓冲液与试剂第27-29页
     ·PCR 引物第29-32页
   ·方法第32-36页
     ·分子生物学基本操作第32页
     ·质粒的共转和细菌双杂交点板实验第32-33页
     ·SOE-PCR (重叠延伸PCR技术)第33-34页
     ·利用三亲本技术构建双交换突变株第34页
     ·紫云英植物盆栽第34页
     ·固氮酶活的测定第34-35页
     ·蛋白表达载体的构建及蛋白质的小量诱导表达第35-36页
3 结果与分析第36-60页
   ·TypA-BacA蛋白相互作用关键结构域研究第36-42页
     ·lypA及同源蛋白的保守结构域分析第36-37页
     ·7653RTypA截短突变体的构建及其与BacA的互作研究第37-40页
     ·TA的同源蛋白及其截短片段与BacA的互作检测第40-42页
   ·华癸根瘤菌7653R qw『和ytpA突变株构建及筛选第42-49页
     ·PCR扩增qys『和ytpA的左端、右端及Km序列第42-45页
     ·SOE-PCR扩增获得『和妳A插入Km突变目的片段第45-46页
     ·两个目标基因置换载体的构建第46页
     ·两个目标基因插入失活突变体的蹄选第46-49页
   ·互补菌株的构建及蹄选第49-51页
     ·功能互补表达载体的构建第50页
     ·功能互补菌株的构建第50-51页
   ·两个目标基因突变株及其互补菌株的共生表型第51-54页
   ·突变株及其互补菌株形成根瘤的石蜡切片及电镜观察第54页
   ·膜蛋白BacA/CysW/iypA的诱导表达第54-60页
4.讨论第60-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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