| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-35页 |
| 第一章 波氏杆菌研究进展 | 第13-25页 |
| 1 病原学及流行病学 | 第13-15页 |
| ·形态及培养特性 | 第13-14页 |
| ·致病性及致病机理 | 第14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| 2 Bb外膜蛋白(OMPs)研究进展 | 第15-17页 |
| ·丝状血凝素(filanlentous hemagglutinin,FHA) | 第15页 |
| ·百日咳黏附素(pertactin,PRN) | 第15-16页 |
| ·气管定居因子(tracheal colonization factor,TcfA) | 第16页 |
| ·腺苷环化酶溶血素(Adenylate Cyclase-hemolisin,AC-Hly) | 第16页 |
| ·铁调节外膜蛋白成分(iron-regulated outer membrane proteins,IROMPs) | 第16页 |
| ·外膜蛋白A(OMP A) | 第16-17页 |
| ·外膜孔蛋白(Outer Membrane Porin Protein,40KD) | 第17页 |
| ·脂蛋白(lipoprotein) | 第17页 |
| 3 疫苗研究 | 第17-20页 |
| ·灭活苗 | 第17页 |
| ·弱毒苗 | 第17-18页 |
| ·亚单位疫苗 | 第18-20页 |
| 参考文献 | 第20-25页 |
| 第二章 蛋白质组学及其在病原菌中的应用 | 第25-35页 |
| 1 免疫蛋白质组学 | 第25-28页 |
| ·免疫蛋白质组学技术流程 | 第25-26页 |
| ·免疫蛋白质组学技术要点 | 第26-27页 |
| ·双向电泳 | 第26页 |
| ·半干转印 | 第26页 |
| ·免疫检测 | 第26页 |
| ·质谱鉴定 | 第26-27页 |
| ·生物信息学分析 | 第27页 |
| ·免疫蛋白质组学在病原菌疫苗候选抗原筛选中的应用 | 第27-28页 |
| 2 比较蛋白质组学 | 第28-31页 |
| ·以双向电泳为基础的比较蛋白质组学技术流程 | 第28-29页 |
| ·比较蛋白质组学在细菌中的应用 | 第29-31页 |
| ·菌株间的比较 | 第29页 |
| ·环境对菌株的影响 | 第29-30页 |
| ·遗传操控对菌株的影响 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 第二篇 试验研究 | 第35-75页 |
| 第三章 波氏杆菌外膜蛋白双向电泳图谱的建立 | 第35-47页 |
| 摘要 | 第35页 |
| Abstract | 第35-36页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·菌株及培养条件 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·仪器设备 | 第36-37页 |
| ·HB菌株生长曲线的测定 | 第37页 |
| ·HB菌株OMPs的提取 | 第37页 |
| ·蛋白的定量 | 第37-38页 |
| ·双向电泳 | 第38-39页 |
| ·等电聚焦 | 第38页 |
| ·第一向胶条的平衡与转移 | 第38-39页 |
| ·第二向十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第39页 |
| ·染色 | 第39-40页 |
| ·胶体考马斯染色 | 第39页 |
| ·银染 | 第39-40页 |
| ·凝胶图像的扫描 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| ·HB菌株的生长曲线 | 第40页 |
| ·OMPs的浓度 | 第40-41页 |
| ·2-DE条件的优化 | 第41-43页 |
| ·不同pH范围对蛋白质2-DE图谱的影响 | 第41页 |
| ·不同聚焦时间对蛋白质2-DE图谱的影响 | 第41-42页 |
| ·不同上样量对蛋白质2-DE图谱的影响 | 第42页 |
| ·不同染色方法对蛋白质2-DE图谱的影响 | 第42-43页 |
| ·2-DE图谱 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 第四章 波氏杆菌外膜蛋白免疫蛋白质组学研究 | 第47-63页 |
| 摘要 | 第47页 |
| Abstract | 第47-48页 |
| 1 材料和方法 | 第48-51页 |
| ·菌株和培养条件 | 第48页 |
| ·免疫血清的制备 | 第48-49页 |
| ·OMPs制备 | 第49页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第49-50页 |
| ·等电聚焦(IEF) | 第49页 |
| ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第49-50页 |
| ·免疫印迹 | 第50页 |
| ·蛋白点的质谱鉴定与数据库分析 | 第50-51页 |
| 2 结果 | 第51-55页 |
| ·免疫血清效价 | 第51-52页 |
| ·免疫印迹图谱 | 第52-55页 |
| 3 讨论 | 第55-59页 |
| ·Bb已知的重要的OMPs | 第55页 |
| ·本文鉴定的Bb免疫原性蛋白 | 第55-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第五章 波氏杆菌外膜蛋白比较蛋白质组学研究 | 第63-75页 |
| 摘要 | 第63页 |
| Abstract | 第63-64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·菌株及实验动物 | 第64-65页 |
| ·Bb分离株对小鼠半数致死量(LD_(50))测定 | 第65页 |
| ·OMPs的制备 | 第65页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第65-66页 |
| ·等电聚焦(IEF) | 第65-66页 |
| ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第66页 |
| ·蛋白点的质谱鉴定与数据库分析 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-70页 |
| ·Bb菌株对小鼠LD_(50)测定 | 第66-67页 |
| ·RB和HB菌株OMPs的2-DE图谱 | 第67页 |
| ·双向电泳图谱比较 | 第67-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 4 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 硕士期间发表及待发表的文章 | 第81页 |
