| 目录 | 第1-7页 |
| CONTENTS | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述：马铃薯Y病毒属病毒分子生物学及致病机理研究进展 | 第15-36页 |
| 1 马铃薯Y病毒属研究进展 | 第15-26页 |
| ·PVY的危害 | 第15-16页 |
| ·PVY多样性 | 第16-17页 |
| ·PVY血清学特征 | 第17-18页 |
| ·马铃薯Y病毒属基因组结构 | 第18-19页 |
| ·马铃薯Y病毒属基因功能 | 第19-26页 |
| 2 植物病毒侵染性克隆 | 第26-33页 |
| ·侵染性体外转录物 | 第26-28页 |
| ·侵染性体内转录物 | 第28-29页 |
| ·马铃薯Y病毒属病毒侵染性克隆的构建 | 第29-30页 |
| ·影响侵染性克隆侵染性的因素 | 第30-32页 |
| ·侵染性克隆的应用 | 第32-33页 |
| 3 植物病毒致病机理研究进展 | 第33-36页 |
| 第二章 PVY-LN基因组全序列的获得及分析 | 第36-57页 |
| 1 材料与方法 | 第36-44页 |
| ·毒原 | 第36页 |
| ·供试药剂 | 第36页 |
| ·引物 | 第36-37页 |
| ·植物病毒Total RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·提取的RNA进行DNase I处理 | 第38页 |
| ·植物总RNA的完整性检测 | 第38-39页 |
| ·反转录 | 第39页 |
| ·目的基因扩增 | 第39-41页 |
| ·3’RACE | 第41-42页 |
| ·5’RACE | 第42-44页 |
| 2 结果分析 | 第44-56页 |
| ·RNA电泳检测 | 第44-45页 |
| ·DNase I处理后的RNA电泳检测 | 第45页 |
| ·PCR扩增产物的电泳检测 | 第45-46页 |
| ·3’RACE | 第46-47页 |
| ·5’RACE | 第47-48页 |
| ·PCR产物测序 | 第48-52页 |
| ·PVY-LN与Genebank中已报道的基因序列的同源性比较 | 第52-53页 |
| ·PVY分离物系统进化树的构建 | 第53-55页 |
| ·序列重组分析 | 第55-56页 |
| 3 小结 | 第56-57页 |
| 第三章 PVY-LN侵染性克隆的构建及检测 | 第57-85页 |
| 1 材料与方法 | 第57-69页 |
| ·供试毒原 | 第57页 |
| ·菌株和载体 | 第57页 |
| ·酶及化学试剂 | 第57页 |
| ·引物 | 第57-58页 |
| ·培养基和缓冲液配制 | 第58-59页 |
| ·T7启动子控制下的侵染性克隆的构建 | 第59-64页 |
| ·体外转录 | 第64-65页 |
| ·转录物的体外侵染 | 第65-66页 |
| ·接种体外转录物发病植株的RT-PCR检测 | 第66页 |
| ·接种体外转录物发病植株的血清学检测 | 第66-69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-83页 |
| ·T7启动子控制下的侵染性克隆的构建 | 第69-76页 |
| ·体外转录 | 第76-79页 |
| ·35S启动子控制下侵染性克隆的构建 | 第79-81页 |
| ·体外转录物体外侵染 | 第81-82页 |
| ·接种体外转录物发病植株的RT-PCR检测 | 第82页 |
| ·体外转录物和野生毒原RT-PCR检测 | 第82-83页 |
| ·接种体外转录物发病植株的血清学检测 | 第83页 |
| 3. 小结 | 第83-85页 |
| 第四章 突变体侵染性克隆构建及致病因子研究 | 第85-103页 |
| 1 材料与方法 | 第85-93页 |
| ·供试毒原 | 第85页 |
| ·菌株和载体 | 第85页 |
| ·酶及化学试剂 | 第85页 |
| ·引物 | 第85-86页 |
| ·培养基和缓冲液配制 | 第86-87页 |
| ·PVY O株系cDNA合成 | 第87-89页 |
| ·突变体构建 | 第89-92页 |
| ·体外转录 | 第92-93页 |
| ·转录产物的DNase处理和酚氯仿抽提 | 第93页 |
| ·转录物的体外侵染 | 第93页 |
| ·突变体RT-PCR检测 | 第93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-102页 |
| ·目的基因的获取 | 第93-95页 |
| ·酶切载体制备 | 第95-97页 |
| ·In-Fusion克隆 | 第97-98页 |
| ·突变体致病性分析 | 第98-102页 |
| 3 小结 | 第102-103页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第103-106页 |
| 参考文献 | 第106-121页 |
| 附录 | 第121-152页 |
| 致谢 | 第152-153页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第153-154页 |
| 论文图表统计 | 第154页 |