中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
前言 | 第9-21页 |
1 本课题的研究背景 | 第9-11页 |
2 内毒素及其检测 | 第11-12页 |
·内毒素及其毒性反应 | 第11页 |
·内毒素检测 | 第11-12页 |
3 鲎 C 因子作为内毒素检测试剂的开发 | 第12-15页 |
·鲎试剂 | 第12-13页 |
·鲎 C 因子 | 第13-15页 |
4 蛋白质反式剪接及其在蛋白质工程领域的应用 | 第15-18页 |
·蛋白质内含子 | 第15页 |
·蛋白质内含子的顺式剪接(Cis-splicing)机制 | 第15-17页 |
·蛋白质内含子的反式剪接(Trans-splicing)机制 | 第17-18页 |
·蛋白质反式剪接的应用 | 第18页 |
5 本课题的意义及研究主要内容 | 第18-21页 |
实验材料与方法 | 第21-30页 |
1 实验材料与仪器 | 第21-23页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验仪器 | 第22-23页 |
2 实验技术与方法 | 第23-30页 |
·主要试剂的配制 | 第23-24页 |
·主要实验方法 | 第24-30页 |
结果与讨论 | 第30-43页 |
1 Sushi 基因片段的筛选和基因构建 | 第30-36页 |
·CES12,Ssp DnaX 序列的获得及断开位点的选择 | 第30-31页 |
·pTA2/CES12 载体的构建 | 第31-33页 |
·pTA2/his-DnaX-CES12 质粒的构建 | 第33-35页 |
·pTWIN/his-DnaX-CES12-N/C 质粒的构建 | 第35-36页 |
2 His-DnaX-CES12-N/C 融合蛋白的表达和纯化和复性 | 第36-40页 |
·His-DnaX-CES12-N/C 融合蛋白的表达 | 第36-38页 |
·His-DnaX-CES12-N/C 融合蛋白的纯化 | 第38-39页 |
·His-DnaX-CES12-N/C 蛋白去除内毒素 | 第39页 |
·His-DnaX-CES12-N 包涵体的复性 | 第39-40页 |
3 体外蛋白反式剪接反应 | 第40页 |
4 动态荧光浊度法检测剪接产物内毒素结合活性 | 第40-43页 |
结论 | 第43-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录 | 第52-53页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |