| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| ·前言 | 第12-14页 |
| ·甲状旁腺激素的结构 | 第12页 |
| ·甲状旁腺激素生理功能 | 第12-13页 |
| ·临床应用 | 第13-14页 |
| ·对骨质疏松症的治疗作用 | 第13-14页 |
| ·对其它疾病的治疗 | 第14页 |
| ·甲状旁腺激素1-34的制备 | 第14-17页 |
| ·甲状旁腺素的化学制备法 | 第14页 |
| ·甲状旁腺素的生物制备法 | 第14-15页 |
| ·PTH国内外的研究现状 | 第15-17页 |
| ·本课题的研究背景、研究意义和主要研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 重组人甲状旁腺素(1-34)融合蛋白 金属螯合亲和纯化 | 第18-29页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·实验材料与仪器 | 第18-19页 |
| ·材料和试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-20页 |
| ·层析填料过载实验 | 第19-20页 |
| ·上样及收集穿出液 | 第19页 |
| ·洗脱获得融合蛋白 | 第19页 |
| ·SDS蛋白电泳分析 | 第19页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第19页 |
| ·饱和上样常数计算 | 第19-20页 |
| ·不同饱和上样量对层析行为影响 | 第20页 |
| ·不同上样量及淋洗液中咪唑浓度对洗脱液目的蛋白纯度的影响 | 第20页 |
| ·按50%饱和上样量不同淋洗体积的比较 | 第20页 |
| ·结果 | 第20-28页 |
| ·层析填料过载实验结果 | 第20-23页 |
| ·镍离子螯合亲和层析 | 第20-22页 |
| ·蛋白含量的测定结果 | 第22-23页 |
| ·饱和上样常数的实际应用 | 第23页 |
| ·不同饱和上样量对层析行为影响 | 第23-25页 |
| ·淋洗液中的咪唑浓度对纯化影响 | 第25-26页 |
| ·不同淋洗量对纯化结果影响 | 第26-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第三章 强阴离子交换纯化重组人甲状旁腺素(1-34) | 第29-35页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料和仪器 | 第29-30页 |
| ·材料和试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30页 |
| ·验证Q柱对杂蛋白结合能力 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·不同载量对Q纯化影响 | 第30-32页 |
| ·影响Q柱纯化的原因分析 | 第32-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第四章 反相层析纯化重组人甲状旁腺素(1-34) | 第35-43页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料和仪器 | 第35-36页 |
| ·材料和试剂 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·不同梯度洗脱对纯化影响 | 第36页 |
| ·分开收集洗脱峰比较 | 第36页 |
| ·比较A液含有10%乙醇影响 | 第36页 |
| ·洗脱梯度的优化 | 第36页 |
| ·RPC-15动态载量的测定 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-42页 |
| ·不同洗脱梯度对纯化影响 | 第37-38页 |
| ·原工艺洗脱峰的分析 | 第38-39页 |
| ·Buffer A液中加入10%乙醇对纯化影响 | 第39页 |
| ·反相层析洗脱梯度的优化 | 第39-40页 |
| ·RPC-15动态载量的测定 | 第40页 |
| ·不同时间段洗脱峰的HPLC分析 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第五章 强阳离子SP柱分离纯化甲状旁腺素(1-34) | 第43-48页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·材料和仪器 | 第43页 |
| ·材料和试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·原纯化工艺分析 | 第43-44页 |
| ·SP线性梯度洗脱 | 第44页 |
| ·改变上样缓冲体系为pH=7.0 | 第44页 |
| ·SP柱动态载量测试 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·原纯化工艺分析 | 第44-45页 |
| ·SP线性梯度洗脱 | 第45-46页 |
| ·改变上样体系酸碱度 | 第46-47页 |
| ·动态载量测试 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第六章 甲状旁腺素(1-34)中试放大工艺 | 第48-58页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·材料和仪器 | 第48-49页 |
| ·材料和试剂 | 第48-49页 |
| ·仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-53页 |
| ·放大过程层析柱床体积计算 | 第49-50页 |
| ·中试放大的操作规程(SOP) | 第50-52页 |
| ·最终产品检测 | 第52-53页 |
| ·结果 | 第53-57页 |
| ·连续三批中试生产的结果 | 第53-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 结论和展望 | 第58-61页 |
| 一、结论 | 第58-59页 |
| 二、创新点 | 第59页 |
| 三、展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附件 | 第65页 |
