摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 文献综述 蓝藻循环电子传递的研究进展 | 第14-31页 |
1 循环电子传递(CET)的发现 | 第16-17页 |
2 主要的CET途径 | 第17-27页 |
·蓝藻NDH-CET途径及其功能复合体 | 第17-24页 |
·蓝藻FQR(PGR5)-CET途径及其功能复合体 | 第24-25页 |
·NDH-CET和PGR5-CET间的关系 | 第25-27页 |
3 CET的生理功能 | 第27-30页 |
·CET的重要性 | 第27-28页 |
·CET在胁迫环境中的作用 | 第28-30页 |
4 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿低碳下NdhS缺失引起的NDH-CET损伤 | 第31-51页 |
1 引言 | 第32-33页 |
2 材料方法 | 第33-37页 |
·集胞藻6803细胞的培养 | 第33页 |
·叶绿素荧光参数及P700氧化还原动力学分析 | 第33-34页 |
·集胞藻6803总DNA的抽提 | 第34页 |
·同源重组载体的构建 | 第34页 |
·集胞藻6803的自然转化和筛选 | 第34-35页 |
·集胞藻6803突变体的PCR鉴定 | 第35页 |
·集胞藻6803pgr5突变体转录水平的鉴定 | 第35页 |
·细胞破碎和粗蛋白的分离 | 第35-36页 |
·BN-PAGE电泳 | 第36页 |
·蛋白免疫印记检测 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-49页 |
·在低碳下ΔndhS突变体损伤的CET功能得以恢复 | 第37-39页 |
·在低碳下PGR5-CET补偿性恢复ΔndhS突变体损伤的CET | 第39-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
·PGR5-CET是一条蓝藻在空气环境下的备用CET途径 | 第49页 |
·CET检测手段的不专一性和PGR5-CET补偿作用 | 第49-51页 |
第三章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿作用的生理意义 | 第51-63页 |
1 引言 | 第52-53页 |
2 材料方法 | 第53页 |
·生长曲线的测定 | 第53页 |
·Chlα含量的检测 | 第53页 |
·生长表型检测 | 第53页 |
3 结果 | 第53-62页 |
·PGR5-CET补偿作用对集胞藻6803 CO_2的有效吸收尤为重要 | 第53-60页 |
·PGR5-CET补偿作用对集胞藻6803光保护的有效执行是必须的 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-63页 |
·PGR5-CET额外上调补充蓝藻低碳生长所需的能量 | 第62页 |
·NDH-CET受损下的PGR5-CET额外补偿是高光下细胞存亡的关键因素 | 第62-63页 |
第四章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿作用对PSI的光保护作用 | 第63-76页 |
1 引言 | 第64页 |
2 材料方法 | 第64-67页 |
·集胞藻6803细胞的培养 | 第64-65页 |
·细胞破碎和粗蛋白的分离 | 第65页 |
·BN-PAGE电泳 | 第65-66页 |
·蛋白免疫印迹检测 | 第66页 |
·PS活性和NPQ参数的测定 | 第66页 |
·H_2O_2含量的检测 | 第66-67页 |
·Chlα和类胡萝卜素的测定 | 第67页 |
3 结果 | 第67-74页 |
·PGR5-CET补偿作用有效地对PSI进行保护 | 第67-70页 |
·PGR5-CET补偿作用可以缓解高光胁迫引起的ROS的积累 | 第70页 |
·PSI的光破坏在LET阻断后得以恢复 | 第70-72页 |
·PGR5-CET补偿作用不依赖于NPQ机制 | 第72-74页 |
4 讨论 | 第74-76页 |
·PGR5-CET补偿作用有效避免高光下对PSI的破坏 | 第74-75页 |
·蓝藻的PGR5-CET对PSI的光保护不依赖于NPQ | 第75-76页 |
第五章 集胞藻6803状态转换缓解PGR5-CET补偿缺失引起的PSI光破坏 | 第76-88页 |
1 引言 | 第77-78页 |
2 材料方法 | 第78-79页 |
·集胞藻6803细胞的培养 | 第78页 |
·低温叶绿素荧光的测定 | 第78页 |
·叶绿素荧光动力学变化检测 | 第78页 |
·PS活性和QA的测定 | 第78-79页 |
3 结果 | 第79-86页 |
·PGR5-CET补偿缺失削弱细胞状态转换能力 | 第79-82页 |
·PGR5-CET补偿缺失引起Q_A过还原 | 第82-84页 |
·状态转换缺失引起PSI强光损伤 | 第84-86页 |
4 讨论 | 第86-88页 |
·ΔndhS/pgr5无法进行有效的状态转换 | 第86页 |
·状态转换是CET损伤突变体的重要光保护机制 | 第86-87页 |
·高光下PSI的光保护对蓝藻生存至关重要 | 第87-88页 |
第六章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿作用的分子基础 | 第88-100页 |
1 引言 | 第89页 |
2 材料方法 | 第89-92页 |
·集胞藻6803细胞的培养 | 第89-90页 |
·叶绿素荧光参数及P700氧化还原动力学分析 | 第90页 |
·集胞藻6803总DNA的抽提 | 第90页 |
·同源重组载体的构建 | 第90-91页 |
·集胞藻6803的自然转化和筛选 | 第91页 |
·集胞藻6803突变体的PCR鉴定 | 第91页 |
·集胞藻6803pgr5突变体转录水平的鉴定 | 第91-92页 |
3 结果 | 第92-98页 |
·PGR5-CET补偿作用在不同的NDH-CET受损突变体中表现 | 第92-96页 |
·PGR5-CET补偿作用的发生依赖于NDH-1亚基NdhF1 | 第96-98页 |
4 讨论 | 第98-100页 |
·PGR5-CET补偿作用不能独立进行,依赖于NDH功能复合体 | 第98页 |
·NDH膜亚基对CET的重要作用 | 第98-100页 |
第七章 总结与展望 | 第100-102页 |
附录Ⅰ:发表文章目录 | 第102-103页 |
附录Ⅱ:缩写 | 第103-105页 |
参考文献 | 第105-114页 |
致谢 | 第114页 |