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蓝藻PGR5-CET的生理功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 文献综述 蓝藻循环电子传递的研究进展第14-31页
 1 循环电子传递(CET)的发现第16-17页
 2 主要的CET途径第17-27页
   ·蓝藻NDH-CET途径及其功能复合体第17-24页
   ·蓝藻FQR(PGR5)-CET途径及其功能复合体第24-25页
   ·NDH-CET和PGR5-CET间的关系第25-27页
 3 CET的生理功能第27-30页
   ·CET的重要性第27-28页
   ·CET在胁迫环境中的作用第28-30页
 4 本研究的目的和意义第30-31页
第二章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿低碳下NdhS缺失引起的NDH-CET损伤第31-51页
 1 引言第32-33页
 2 材料方法第33-37页
   ·集胞藻6803细胞的培养第33页
   ·叶绿素荧光参数及P700氧化还原动力学分析第33-34页
   ·集胞藻6803总DNA的抽提第34页
   ·同源重组载体的构建第34页
   ·集胞藻6803的自然转化和筛选第34-35页
   ·集胞藻6803突变体的PCR鉴定第35页
   ·集胞藻6803pgr5突变体转录水平的鉴定第35页
   ·细胞破碎和粗蛋白的分离第35-36页
   ·BN-PAGE电泳第36页
   ·蛋白免疫印记检测第36-37页
 3 结果第37-49页
   ·在低碳下ΔndhS突变体损伤的CET功能得以恢复第37-39页
   ·在低碳下PGR5-CET补偿性恢复ΔndhS突变体损伤的CET第39-49页
 4 讨论第49-51页
   ·PGR5-CET是一条蓝藻在空气环境下的备用CET途径第49页
   ·CET检测手段的不专一性和PGR5-CET补偿作用第49-51页
第三章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿作用的生理意义第51-63页
 1 引言第52-53页
 2 材料方法第53页
   ·生长曲线的测定第53页
   ·Chlα含量的检测第53页
   ·生长表型检测第53页
 3 结果第53-62页
   ·PGR5-CET补偿作用对集胞藻6803 CO_2的有效吸收尤为重要第53-60页
   ·PGR5-CET补偿作用对集胞藻6803光保护的有效执行是必须的第60-62页
 4 讨论第62-63页
   ·PGR5-CET额外上调补充蓝藻低碳生长所需的能量第62页
   ·NDH-CET受损下的PGR5-CET额外补偿是高光下细胞存亡的关键因素第62-63页
第四章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿作用对PSI的光保护作用第63-76页
 1 引言第64页
 2 材料方法第64-67页
   ·集胞藻6803细胞的培养第64-65页
   ·细胞破碎和粗蛋白的分离第65页
   ·BN-PAGE电泳第65-66页
   ·蛋白免疫印迹检测第66页
   ·PS活性和NPQ参数的测定第66页
   ·H_2O_2含量的检测第66-67页
   ·Chlα和类胡萝卜素的测定第67页
 3 结果第67-74页
   ·PGR5-CET补偿作用有效地对PSI进行保护第67-70页
   ·PGR5-CET补偿作用可以缓解高光胁迫引起的ROS的积累第70页
   ·PSI的光破坏在LET阻断后得以恢复第70-72页
   ·PGR5-CET补偿作用不依赖于NPQ机制第72-74页
 4 讨论第74-76页
   ·PGR5-CET补偿作用有效避免高光下对PSI的破坏第74-75页
   ·蓝藻的PGR5-CET对PSI的光保护不依赖于NPQ第75-76页
第五章 集胞藻6803状态转换缓解PGR5-CET补偿缺失引起的PSI光破坏第76-88页
 1 引言第77-78页
 2 材料方法第78-79页
   ·集胞藻6803细胞的培养第78页
   ·低温叶绿素荧光的测定第78页
   ·叶绿素荧光动力学变化检测第78页
   ·PS活性和QA的测定第78-79页
 3 结果第79-86页
   ·PGR5-CET补偿缺失削弱细胞状态转换能力第79-82页
   ·PGR5-CET补偿缺失引起Q_A过还原第82-84页
   ·状态转换缺失引起PSI强光损伤第84-86页
 4 讨论第86-88页
   ·ΔndhS/pgr5无法进行有效的状态转换第86页
   ·状态转换是CET损伤突变体的重要光保护机制第86-87页
   ·高光下PSI的光保护对蓝藻生存至关重要第87-88页
第六章 集胞藻6803 PGR5-CET补偿作用的分子基础第88-100页
 1 引言第89页
 2 材料方法第89-92页
   ·集胞藻6803细胞的培养第89-90页
   ·叶绿素荧光参数及P700氧化还原动力学分析第90页
   ·集胞藻6803总DNA的抽提第90页
   ·同源重组载体的构建第90-91页
   ·集胞藻6803的自然转化和筛选第91页
   ·集胞藻6803突变体的PCR鉴定第91页
   ·集胞藻6803pgr5突变体转录水平的鉴定第91-92页
 3 结果第92-98页
   ·PGR5-CET补偿作用在不同的NDH-CET受损突变体中表现第92-96页
   ·PGR5-CET补偿作用的发生依赖于NDH-1亚基NdhF1第96-98页
 4 讨论第98-100页
   ·PGR5-CET补偿作用不能独立进行,依赖于NDH功能复合体第98页
   ·NDH膜亚基对CET的重要作用第98-100页
第七章 总结与展望第100-102页
附录Ⅰ:发表文章目录第102-103页
附录Ⅱ:缩写第103-105页
参考文献第105-114页
致谢第114页

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